Снятие ип с енвд в 2019 году: Прекращение деятельности по ЕНВД в 2021 году

Содержание

Заявление о снятии с учета ЕНВД – бланк, сроки, порядок, заполнение 2020

В нашем сегодняшнем материале мы расскажем читателя о процедуре снятия с учета ЕНВД и правилах заполнения соответствующего заявления. В нижней части страницы можно скачать бланк заявления о снятии с учета ЕНВД. Правила и документы, действовавшие в 2019 году, остаются неизменными на 2020 год. Постановка и снятие плательщика ЕНВД происходит на основании заявлений.

Если вы являетесь плательщиком налога ЕНВД, может возникнуть ситуация, когда ваша коммерческая деятельность оказалась вне рамок условий применения данного вида налогообложения. Например:

отказ от вида деятельности, при котором можно применять специальный режим налогообложения ЕНВД;
в связи с расширением объема предпринимательской деятельности, т. е. площадь торгового зала была увеличена и теперь превысила 150 кв.м.;
доля участия в других организациях составила более 25 процентов;
по итогам налогового периода среднесписочная численность работников превысила 100 человек.

В первом случае, в течение пяти дней после вышеуказанных изменений вы должны подать заявление о снятии с учета ЕНВД. Для организаций и индивидуальных предпринимателей разработаны разные формы заявлений. В остальных случаях вы выходите за рамки применения ЕНВД, тем самым нарушая правила применения ЕНВД. Заявление о снятии с учета при нарушении порядка применения ЕНВД подается не позднее последнего дня месяца того квартала, в котором обнаружилось одно из трех описанных выше нарушений.

Для организаций — форма ЕНВД 3 (Заявление о снятии с учета организации в качестве налогоплательщика единого налога на вмененный доход для отдельных видов деятельности (Форма № ЕНВД-3). Снятие ИП с учета ЕНВД регулируется Приказом ФНС России от 11 декабря 2012 г. № ММВ-7-6/94.

Для индивидуальных предпринимателей — форма ЕНВД 4 (Заявление о снятии с учета индивидуального предпринимателя в качестве налогоплательщика единого налога на вмененный доход для отдельных видов деятельности (Форма № ЕНВД-3). Снятие юридического лица с учета ЕНВД регулируется Приказом ФНС России от 11 декабря 2012 г. № ММВ-7-6/941.

Сроки снятия с учета ЕНВД

На основании вашего заявления, в течение 5 рабочих дней со дня его получения налоговая инспекция выдает или отправляет по почте, в зависимости от того как вы укажите в заявлении, уведомление о снятии с учета, в котором будет указана дата снятия вас с учета.

Обратите внимание, такой датой будет являться дата, указанная вами в заявлении. То есть, в заявлении вы указываете дату снятия вас со специального налогового режима и причину прекращения деятельности или перехода на другой режим налогообложения.

Если вы нарушили срок предоставления заявления о снятии с учета ЕНВД в связи с прекращением предпринимательской деятельности, то датой снятия с учета будет последний день месяца, в котором было подано заявление. Для вас это будет означать, что вы обязаны уплатить налог за весь последний месяц, а не за фактическое время осуществления деятельности в этом месяце (НК РФ п.10 ст.346.29).

Добровольно перейти на иной режим налогообложения вы вправе только с начала года, в случае если вы сохраняете виды деятельности для ЕНВД.

Перейти на другой режим налогообложения в течение года, если вы в течение года прекращаете деятельность, подлежащую налогообложению единым налогом, и начинаете осуществлять другой вид деятельности. В этом случае заявление о снятии с учета ЕНВД должно содержать дату прекращения осуществления данного вида деятельности.

Но если вы допустили хоть одно нарушение, о которых написано выше, то это уже ваша обязанность перейти на иной режим налогообложения с последнего дня месяца налогового периода, в котором допущены нарушения требований, установленных подпунктами 1 и 2 пункта 2.2 статьи 346.26 НК РФ.

Не забудьте предоставить декларацию ЕНВД, после того как вы снялись с учета плательщика ЕНВД. Срок подачи декларации ЕНВД в случае снятия с учета не отличается от обычного срока предоставления декларации, а именно до 20 числа первого месяца, следующего за отчетным кварталом.

Подать декларацию после снятия с учета необходимо в ту инспекцию, в которой вы стояли на учете в качестве «вмененщика». Встречаются, например, такие ситуации, в которых инспекция, в которой вы были зарегистрированы как плательщик ЕНВД, отказывается принимать декларацию после того, как вас сняли с учета ЕНВД. Например, вы снялись с учета 10 октября 2019 года. Срок предоставления декларации за третий квартал — до 20 января 2020 года. Следовательно, вы вправе подать декларацию до окончания этого срока, но инспекция к моменту подачи вами декларации уже сняла вас с учета и передала карточку плательщика налогов в Вашу основную ИФНС, по месту вашей прописки и отказывает принять декларацию. В этом случае действия инспекции незаконны. Об этом сказано в Письме ФНС от 20.03.2015г. № ГД-4-3/4431@. Если вы столкнулись с такой ситуацией, то вправе подать жалобу, сославшись на вышеуказанное письмо ИФНС.

Порядок заполнения заявления о снятии с учета ЕНВД

Порядок заполнения заявления о снятии с учета плательщика ЕНВД, описан в Приказе ФНС РФ от 11.12.2012 № ММВ-7-6/941@). Ничего сложного и отличного от порядка заполнений документов такой категории это заявление не представляет. Остановимся только на одном моменте. Это определение кода основания снятия с учета ЕНВД.

При заполнении заявления вам будет предложено выбрать один из четырех кодов:

«1» – если прекращена предпринимательская деятельность;
«2» – если осуществляется переход на иной режим налогообложения;
«3» – если нарушены требования для применения ЕНВД, установленные пп.1 и пп.2 п.2.2 ст.346.26 НК РФ;
«4» – если основанием не является ни один из вышеперечисленных пунктов.

Первые 3 кода не вызывают вопросов. Выясним, при каких обстоятельствах использовать цифру 4 в данном заявлении.

Код 4 необходимо ставить в одном из следующих случаев:

при прекращении одного или нескольких видов деятельности из тех, которые осуществляются им на ЕНВД;

при смене адреса, по которому вид деятельности осуществляется.

Бланк заявления о снятии с учета ЕНВД

По ссылкам ниже вы можете скачать заявления о снятии с учета ЕНВД, а также порядок заполнения этой формы.

Тоже может быть полезно:

Информация полезна? Расскажите друзьям и коллегам

Уважаемые читатели! Материалы сайта TBis.ru посвящены типовым способам решения налоговых и юридических вопросов, но каждый случай уникален.

Если вы хотите узнать, как решить именно ваш вопрос — обращайтесь в форму онлайн консультанта. Это быстро и бесплатно!

Вопросы и ответы в комментариях даются пользователями сайта и не носят характера юридической консультации. Если вам необходима юридическая консультация, рекомендуем получить ее, задав вопрос по телефонам, указанным выше, или через эту форму

Как встать на учет по ЕНВД и сняться с учета – «Моё дело»

Оглавление Скрыть

В отличие от ОСНО и УСН, на ЕНВД переводят только отдельные виды бизнеса, остальные остаются на другом режиме (ОСНО или УСН). При этом перевести какую-либо деятельность на уплату вмененного налога можно даже в середине года.

С 2021 года специальный налоговый режим ЕНВД прекращает свое действие. Всем, кто его применяет, до конца 2020 года нужно продумать, какой режим налогообложения использовать в дальнейшем.

Переход с ЕНВД на другую систему налогообложения

«Моё дело» возьмёт на себя всю работу по переходу на другой режим.

Заказать услугу

Для кого доступен переход на ЕНВД

Среди самых распространенных видов деятельности – розничная торговля, бытовые услуги для населения, точки общественного питания. Полный перечень разрешенных видов деятельности для перевода на ЕНВД содержится в

статье 346.26 Налогового кодекса РФ.

Рассчитать налоги ЕНВД онлайн

В той же статье установлены ограничения для использования этой системы налогообложения. В частности, переход запрещен, если:

в штате у предпринимателя или организации больше 100 человек;
процент участия других юрлиц в организации составляет больше 25%.

Прежде чем переходить на спецрежим, нужно убедиться, что на вашей территории этот режим введен местным нормативным актом. Такая информация есть на сайте Федеральной налоговой службы.

Как перевести деятельность на ЕНВД

Нужно отправить заявление по формам ЕНВД-1 (для предприятий) или ЕНВД-2 (для индивидуальных предпринимателей) в налоговый орган, курирующий территорию, на которой ведется деятельность, облагаемая вмененным налогом. Для транспортных услуг, развозной и разносной торговли, и рекламы на транспорте сделано исключение – по этим видам бизнеса на учет встают в ту инспекцию, в которой изначально зарегистрировано ООО или ИП.

Скачать заявление о постановке на учет ЕНВД-1 (для ООО) Скачать заявление о постановке на учет ЕНВД-2 (для ИП)

Если юридическое или физическое лицо имеет несколько торговых точек в регионах, относящихся к разным ИФНС, то на учет надо вставать в каждой из них, а после этого в каждую направлять отчеты и платить налог.

Срок для подачи заявления – 5 дней с начала применения спецрежима.

Заявление о постановке на учет по ЕНВД сотрудники налоговых органов рассматривают в течение пяти дней, после чего в адрес налогоплательщика должно поступить соответствующее уведомление. ИФНС направит уведомление тем же способом, каким налогоплательщик отправлял заявление.

После получения на руки уведомления о постановке на учет в качестве плательщика ЕНВД, налогоплательщик не обязан сообщать об этом в «родную» налоговую инспекцию.

Так вы сэкономите массу времени и не допустите ошибок.

Снятие с учета ЕНВД в 2019 году

Сняться можно по нескольким причинам:

налогоплательщик принял решение перейти на иную систему налогообложения или же вовсе прекращает этот вид деятельности;
вид деятельности, которым занимается ООО/ИП, местные власти убрали из разрешенного перечня;
допустимые при ЕНВД физические показатели превышены: количество единиц транспорта для оказания транспортных услуг стало больше 20, квадратных метров торговой площади – больше 150, квадратных метров площади обслуживания посетителей при оказании услуг общепита – больше 150 и т.д.;
штат сотрудников ИП или ООО превысил 100 человек;
в уставном капитале ООО больше 25% стало принадлежать другим организациям;
бизнес меняет адрес и переводится на территорию, подведомственную другой инспекции ФНС. Тогда нужно сняться с учета в прежней и зарегистрироваться в новой.

Юридические лица заполняют бланк заявления о снятии с учета по форме ЕНВД-3, индивидуальные предприниматели – ЕНВД-4, и сдают в инспекцию, в которой в свое время регистрировались как плательщики единого налога по этому виду деятельности.

Скачать заявление о снятии с учета ЕНВД-3 (для ООО) Скачать заявление о снятии с учета ЕНВД-4 (для ИП)

Сроки зависят от причины снятия:

При прекращении вида деятельности, который облагался единым налогом – в течение пяти дней с даты прекращения.
При утере права на спецрежим в связи с превышением ограничений (площадь, количество сотрудников и т.д.) – в течение 5 рабочих дней по окончании месяца, в котором было утеряно право.
При добровольной смене режима налогообложения – в течение 5 дней со дня перехода на другой режим. При этом нужно иметь в виду, что добровольно отказаться от «вмененки» и сменить ее на другой режим нельзя до конца календарного года.

Последний платеж рассчитывается с первого дня квартала до дня снятия с учета.

В течение 5 дней налоговая инспекция рассматривает заявление и направляет уведомление о снятии с учета.

сроки, причины, штрафы, порядок — Контур.Бухгалтерия

Единый налог на вмененный доход используется как режим налогообложения для малого бизнеса. Его основное преимущество — отсутствие связи уплачиваемой в бюджет суммы с фактическим доходом, в этом он может быть выгоднее УСН. Также вмененку можно совмещать с другими режимами для налоговой оптимизации и улучшения финансового результата.

Однако иногда плательщику может потребоваться сняться с учета по вмененному налогу. Прекращение деятельности обычно происходит по четырем причинам.

Компания или ИП могут закрыть бизнес на данном режиме. Например, если ведение такой деятельности экономически невыгодно.
Власти региона могут исключить ваш вид бизнеса из списка разрешенных для обложения единым налогом.
Предприятие самостоятельно решает перейти на другой режим налогообложения. Перейти на ОСНО вы можете в любое время, а вот применять УСН можно будет только с начала будущего года.
Для использования вмененки необходимо соблюдать ряд ограничений. Следовательно, при их нарушении юрлицо или ИП автоматически переходят на ОСНО.

Скидка 45% в ноябре: 7 590 р. вместо

~~13 800 р.~~ за год работы

Простое ведение бухгалтерии

Система сама рассчитает налоги и напомнит вам о сроках платежей и сдачи отчетов

Автоматический расчет зарплаты, отпускных и больничных

Техподдержка 24/7, подсказки внутри сервиса, справочно-правовая база

Отправка отчетности через интернет

Отчеты и КУДиР формируются автоматически по данным бухучета

Электронный документооборот и быстрая проверка контрагентов

Документы, сделки, аналитические отчеты, сверка по НДС

Порядок снятия с учета по единому налогу

Для снятия с учета по вмененке плательщик подает заявление в налоговую. Оно заполняется по специальным формам ЕНВД-3 (для компаний) или ЕНВД-4 (для ИП). Документ представляется в ФНС в течение пяти дней с даты окончания применения спецрежима.

День прекращения работы по вмененке зависит от причины, по которой компания или ИП снимается с учета. В заявлении указывается одна из трех дат:

дата закрытия бизнеса по виду деятельности на спецрежиме;
дата перехода на другой режим налогообложения;
последний день месяца, в котором было допущено нарушение условий использования ЕНВД.

В течение пяти дней налоговая направит уведомление о том, что снятие с учета с ЕНВД произведено. После этого организация или ИП должны представить декларацию и уплатить налог за последний период работы на спецрежиме.

Рассмотрим основные правила заполнения бланков заявлений. Формы вы можете найти в Приложениях 3 и 4 к Приказу ФНС России от 11.12.2012 № ММВ-7-6/941@, а также непосредственно на сайте ФНС. Бланки заявления делятся на две части: основная и приложение к ней.

Нужно ли сниматься с учета и писать заявление, если ЕНВД в 2021 году отменяют

С 1 января 2021 года ЕНВД отменят по всей России. Обычно налоговая инспекция ставит налогоплательщиков на вмененный учет и снимает с него по заявлению. Но если все вмененщики начнут подавать в налоговую заявления после его отмены, она просто не успеет их обработать. Разберемся, когда заявление нужно подать.

Снимаетесь с ЕНВД с начала 2021 года — не подавайте заявление. По общему правилу бизнес обязан подать заявление о снятии с вмененного учета в течение пяти рабочих дней после перехода на новый режим. Вы смените ЕНВД на другой режим с 1 января 2021 года, соответственно, заявление надо подать не позднее 15 января 2021 года. Но к этому времени вмененка уже перестанет существовать и гл. 26.3 НК РФ утратит силу. Поэтому заявление о снятии с учета по ЕНВД подавать не нужно. ФНС разъяснила это в письме от 21.08.2020 № СД-4-3/13544@. Всех вмененщиков автоматически снимут с учета с 1 января.

Снимаетесь с ЕНВД с начала месяца — подайте заявление. Если вы перестали работать на вмененке в течение 2020 года, подайте заявление о снятии с учета в течение пяти рабочих дней. Например, вы прекратили торговлю в розницу на ЕНВД с 24 сентября 2020 года. Подайте заявление в ИФНС не позднее 1 октября. Формы заявлений описаны ниже.

Подберите для своего бизнеса другую систему налогообложения с помощью нашего бесплатного калькулятора. Мы написали статью, в которой собрали ответы экспертов на популярные вопросы о налоговых режимах, переходе с ЕНВД и онлайн-кассах. Если вы не нашли ответ на свой вопрос, задайте его в комментариях, мы обязательно ответим.

Заполнение заявления ЕНВД-3 для организации

Заполним первый лист формы. Сначала укажите ИНН, код налогового органа и КПП. Необходимо проставить КПП, который был присвоен при постановке на учет в качестве плательщика единого налога. В следующем блоке вставьте цифру, соответствующую причине снятия с учета.

Далее впишите цифру 1 или 2 в зависимости от того, является ли фирма российской или иностранной. В следующем поле потребуется указать полное наименование плательщика. ОГРН прописывается, если компания зарегистрирована в России. В блоке с датой впишите день, когда было завершено применение спецрежима. Дата определяется исходя из причины прекращения такой деятельности.

В разделе с подтверждением представляемых сведений указываются реквизиты уполномоченного лица: руководителя компании или ее представителя. Во втором случае впишите название документа, на основании которого действует представитель. Также не забудьте указать количество листов в таком документе. В пакет для налоговой необходимо вложить его копию.

На втором и последующих листах формы укажите виды деятельности, по которым вы снимаетесь с учета, вместе с полными адресами. Количество листов, потребовавшихся в данном случае, отметьте на первом листе в специальном поле. Коды вида предпринимательской деятельности представлены в классификаторе. Его можно найти в Приложении № 5 к Приказу ФНС от 04.07.2014 № ММВ-7-3/353@. Например, коду 03 соответствует деятельность по ремонту и обслуживанию автотранспорта.

Причина снятия с учета

Отдельно рассмотрим такой пункт как причина снятия с учета. В данном поле проставляется цифра 1, 2, 3 или 4.

Снятие с учета происходит из-за прекращения предпринимательской деятельности — выберите цифру 1.
Плательщик планирует добровольно сменить режим налогообложения: например, если это целесообразно с точки зрения успешного ведения бизнеса. Тогда проставляется цифра 2.
Предположим, плательщик допускает нарушение условий применения вмененки: например, количество сотрудников в предыдущем календарном году превысило 100 человек. Другой вариант — у компании на вмененке появился собственник-юрлицо, владеющий более 25% капитала. Выбирается цифра 3.
Форма ЕНВД-3 применяется также при прекращении только одного вида деятельности на спецрежиме из нескольких. В таком случае выберите вариант «иное» (цифра 4).

Особенности заявления ЕНВД-4 для индивидуальных предпринимателей

Порядок заполнения формы для снятия с учета по вмененке для ИП и для юрлиц во многом одинаков. Отличия заключаются в следующем:

ИП при учете в налоговой присваивается только ИНН, поэтому поле «КПП» отсутствует;
вместо наименования прописываются полные фамилия, имя и отчество; каждое слово — с новой строчки, также укажите ОГРНИП предпринимателя;
лицом, подтверждающим достоверность и полноту сведений в заявлении, может выступить сам предприниматель. В этом случае ФИО и ИНН повторно не приводятся.

В обеих формах заполняются все строчки кроме раздела для сотрудника налоговой. В строках, оставшихся пустыми, а также в незаполненных клетках проставьте прочерки.

Автор статьи: Валерия Текунова

Меняете налоговый режим? Работайте в облачном сервисе для малого бизнеса Контур.Бухгалтерия: сервис подходит для ораганизаций и ИП на ОСНО, УСН, ЕНВД и для совмещения режимов. Легко ведите учет, начисляйте зарплату, платите налоги и взносы. Система формирует отчетность автоматически, вам останется отправить ее через интернет. Изучите возможности сервиса на бесплатном периоде — 14 дней.

Заявление о снятие с учета ЕНВД ИП

Законодательство для предпринимателей предусматривает несколько видов льготных режимов налогообложения, куда относится и ЕНВД. Все они используются в добровольном порядке. Поэтому ИП с целью снижения налоговой нагрузки периодически могут менять системы налогообложения. К тому же в связи с будущей отменой ЕНВД (2018 год), многие предприниматели постепенно уходят с него.

Оглавление статьи

Порядок снятия с учета ЕНВД

ИП может прекратить использовать вмененку по следующим причинам:

Больше не осуществляется находящийся на ЕНВД вид деятельности.
Закрывает предпринимательство.
Нарушены критерии применения этого режима.
Производится смена режима налогообложения.

НК РФ устанавливает, что предприниматель должен в пятидневный срок направить в ИФНС заявление о снятии с ЕНВД, если он прекращает использовать этот режим. Для этого документа установлена приказом ФНС специальная форма ЕНВД 4. Для ее заполнения можно использовать интернет-сервисы, программы по заполнению отчетности. ИП также может приобрести бланк ЕНВД-4 в типографии или распечатать его с компьютера и заполнить от руки.

Заявление о снятие с учета ЕНВД ИП направляет в налоговую по месту, где осуществляется деятельность, лично, через доверенное лицо. Возможна отправка формы ЕНВД-4 через почту или по электронным каналам связи.

Прекращение использования вмененки начинается с даты, указанной в документе, с последнего дня месяца, в котором было нарушение требований применения ЕНВД, момента перехода на новый режим.

ИП должен помнить, что в некоторых случаях смена ЕНВД на другой льготный режим (например, УСН), может быть произведена по окончании года. Если это будет осуществлено в течение него, то, скорее всего, предприниматель будет вынужден применять общую систему налогообложения. Поэтому решение о переходе целесообразней будет отложить до завершения года.

ИФНС после приема заявления по форме ЕНВД-4 в пятидневный срок должно произвести снятие ИП в качестве налогоплательщика по вмененке, и выслать ему в письменной форме уведомление об этом.

Если предприниматель работал на этом режиме в нескольких муниципалитетах, то заявления нужно подавать в каждую ИФНС по местам осуществления деятельности. Также если ИП полностью решил не использовать ЕНВД, а он его применял для двух и более видов деятельности, в заявлении нужно указывать их все.

Для снятия организаций с учета плательщика вмененки в ИФНС предоставляется форма ЕНВД-3.

Образец заполнения ЕНВД-4

В верхней части документа указывается ИНН предпринимателя из 12 знаков. Немного ниже, в правой части листа под номером формы, вписывается код налоговой службы из 4 цифр, в которую направляется заявление.

Затем нужно указать причину, по которой предприниматель снимается с учета по ЕНВД:

Код «1» ставится если он полностью прекращает любую предпринимательскую деятельность.
Код «2» – если он собирается переходить на применение другой системы налогообложения.
Код «3» используется, если в процессе осуществления деятельности были нарушены условия на применение вмененной системы — численность наемных рабочих превысила 100 человек.
Код «4» – в прочих случаях, к примеру, если предприниматель будет продолжать работу, но закрывает вид деятельности, по которой применялся ЕНВД.

После этого необходимо без сокращений указать Ф.И.О. Все пустые клетки в данном поле прочеркиваются.

На следующей строке вписывается код ОГРНИП. После него проставляется дата, с которой предприниматель хочет сняться с учета.

Под ней нужно указать количество листов приложений, с расшифровкой видов деятельности. Кроме этого, если заявление в налоговую подает доверенный представитель, то необходимо вписать на скольких листах прилагаются документы, подтверждающие его права.

В следующем блоке, который делится на две части, предприниматель заносит данные только слева. В ней указывается, кто подает заполненный бланк — сам предприниматель (код «1») или его представитель (код «2»). Во втором случае нужно вписать его полные Ф.И.О. и ИНН. Затем записывается контактный телефон, ставится подпись и дата заполнения. Если документ подает представитель, то необходимо указать название документа, подтверждающего его права. Во всех пустых клеточках нужно обязательно проставить знак «-».

На листе приложения можно заносить три кода деятельности, по которым происходит снятие с учета. Если таких видов больше — то можно использовать дополнительные страницы.

В каждый необходимо вписать код вида деятельности и полный адрес, по которому она велась. Все пустые клеточки во всех блоках прочеркиваются. В конце страницы нужно поставить подпись, которая подтверждает правильность указания данных в документе.

Скачать бланк заявления ЕНВД-4

Скачать форму ЕНВД-4 для ИП в формате Excel.

Скачать бланк формы ЕНВД-4 в формате Pdf.

Скачать образец заполнения формы ЕНВД-4.

О порядке уведомления о начале и прекращении применения специального налогового режима «Налог на профессиональный доход» | ФНС России

О порядке уведомления о начале и прекращении применения специального налогового режима «Налог на профессиональный доход»

Федеральная налоговая служба в связи с проведением с 1 января 2019 года по 1 января 2028 года эксперимента по установлению специального налогового режима «Налог на профессиональный доход» (далее — НПД) в соответствии с Федеральным законом от 27.11.2018 № 422-ФЗ «О проведении эксперимента по установлению специального налогового режима «Налог на профессиональный доход» в городе федерального значения Москве, в Московской и Калужской областях, а также в Республике Татарстан (Татарстан)» (далее – Закон № 422-ФЗ), сообщает следующее.

1. Согласно части 3 статьи 15 Закона № 422-ФЗ индивидуальные предприниматели, применяющие упрощенную систему налогообложения (далее – УСН), систему налогообложения для сельскохозяйственных товаропроизводителей (единый сельскохозяйственный налог) (далее – ЕСХН), систему налогообложения в виде единого налога на вмененный доход для отдельных видов деятельности (далее – ЕНВД), при условии соблюдения требований, установленных Законом № 422-ФЗ для применения налогоплательщиками НПД, вправе отказаться от их применения и перейти на НПД в соответствии с указанным законом.

Физическое лицо обязано в течение одного месяца со дня постановки на учет в качестве налогоплательщика НПД направить в налоговый орган по месту жительства (по месту ведения предпринимательской деятельности) уведомление о прекращении применения УСН, ЕСХН, ЕНВД. В этом случае налогоплательщик считается прекратившим применение УСН, ЕСХН или подлежит снятию с учета в качестве налогоплательщика ЕНВД со дня постановки на учет в качестве налогоплательщика НПД (часть 4 статьи 15 Закона № 422-ФЗ).

В случае направления указанного уведомления с нарушением установленного срока или не направления такого уведомления постановка данного лица на учет в качестве налогоплательщика НПД аннулируется (часть 5 статьи 15 Закона № 422-ФЗ).

В рамках проведения эксперимента для уведомления налогового органа о прекращении применения указанных специальных налоговых режимов ФНС России рекомендует применять соответствующие действующие формы № 26.2-8 «Уведомление о прекращении предпринимательской деятельности, в отношении которой применялась УСН» (форма по КНД 1150024), утвержденную приказом ФНС России от 02.11.2012 № ММВ-7-3/829@, и № 26.1-7 «Уведомление о прекращении предпринимательской деятельности, в отношении которой применялась ЕСХН» (форма по КНД 1150027), утвержденную приказом ФНС России от 28.01.2013 № ММВ-7-3/41@.

Уведомление налогоплательщика о прекращении применения ЕНВД в связи с постановкой на учет в качестве налогоплательщика НПД осуществляется путем представления в налоговый орган заявления о снятии с учета индивидуального предпринимателя в качестве налогоплательщика ЕНВД по форме № ЕНВД-4 (код по КНД 1112017), утвержденной приказом ФНС России от 11.12.2012 № ММВ-7-6/941@.

2. Согласно части 6 статьи 15 Закона № 422-ФЗ лица, утратившие право на применение НПД в соответствии с частью 19 статьи 5 Закона № 422-ФЗ, вправе уведомить налоговый орган по месту жительства о переходе на УСН или ЕСХН и (или) подать в налоговый орган по месту жительства (по месту ведения предпринимательской деятельности) заявление о постановке на учет в качестве налогоплательщика ЕНВД в течение 20 календарных дней с даты снятия с учета в качестве налогоплательщика НПД. В этом случае физическое лицо признается перешедшим на УСН или ЕСХН и (или) подлежит постановке на учет в качестве налогоплательщика ЕНВД с даты:

1) снятия с учета в качестве налогоплательщика НПД — для физических лиц, являющихся индивидуальными предпринимателями;

2) регистрации в качестве индивидуального предпринимателя — для физических лиц, которые на дату утраты права на применение специального налогового режима не являлись индивидуальными предпринимателями и зарегистрировались в течение 20 календарных дней с даты утраты такого права.

Для уведомления налогового органа о переходе на УСН ФНС России рекомендует применять форму № 26.2-1 «Уведомление о переходе на УСН» (форма по КНД 1150001), утвержденную приказом ФНС России от 02.11.2012 № ММВ-7-3/829@ .

Индивидуальный предприниматель, переходящий на УСН с даты снятия с учета в качестве налогоплательщика НПД, в уведомлении указывает код признака налогоплательщика «3» — индивидуальные предприниматели, переходящие с иных режимов налогообложения. В поле «переходит на упрощенную систему налогообложения __, где 1 — с 1 января 20__года» указывает «1» и год перехода на УСН.

Индивидуальный предприниматель, переходящий на УСН с даты регистрации в качестве индивидуального предпринимателя, отражает в уведомлении код признака налогоплательщика «1» – заявители, подающие уведомление одновременно с документами на государственную регистрацию, и переход на УСН «2» — с даты постановки на налоговый учет.

Кроме того, данные налогоплательщики указывают выбранный объект налогообложения: 1 – доходы или 2 – доходы, уменьшенные на величину расходов.

Сведения о полученных доходах за девять месяцев года подачи уведомления, а также об остаточной стоимости основных средств на 1 октября года подачи уведомления налогоплательщики не заполняют.

Для уведомления налогового органа о переходе на ЕСХН ФНС России рекомендует применять форму № 26.1-1 «Уведомления о переходе на ЕСХН» (форма по КНД 1150007), утвержденную приказом ФНС России от 28.01.2013 № ММВ-7-3/41@.

Индивидуальный предприниматель, переходящий на ЕСХН с даты снятия с учета в качестве налогоплательщика НПД, в уведомлении указывает код признака налогоплательщика «3» — индивидуальные предприниматели, переходящие с иных режимов налогообложения. В поле «переходит на систему налогообложения для сельскохозяйственных товаропроизводителей __, где 1 — с 1 января 20__ года» указывает «1» и год перехода на ЕСХН.

Индивидуальный предприниматель, переходящий на ЕСХН с даты регистрации в качестве индивидуального предпринимателя, отражает в уведомлении код признака налогоплательщика «1» – заявители, подающие уведомление одновременно с документами на государственную регистрацию, и переход на ЕСХН «2» — с даты постановки на учет в налоговом органе.

Сведения о доле доходов от реализации произведенной сельскохозяйственной продукции, включая продукцию первичной переработки, произведенную из сельскохозяйственного сырья собственного производства, в общем объеме полученных доходов от реализации товаров (работ, услуг), налогоплательщиками не указываются.

Для применения ЕНВД индивидуальному предпринимателю следует подать заявление о постановке на учет в налоговом органе в качестве налогоплательщика ЕНВД по форме № ЕНВД-2 (код по КНД 1112012), утвержденной приказом ФНС России от 11.12.2012 № ММВ-7-6/941@.

Действительный государственный советник
Российской Федерации 2 класса
Д.С. Сатин

куда предприниматель обязан подавать 6-НДФЛ?

Индивидуальный предприниматель обязан (в случае снятия с учета в качестве плательщика ЕНВД) сдавать отчет в инспекцию по месту жительства
07.11.2017Российский налоговый портал

Автор: Татьяна Суфиянова (консультант по налогам и сборам)

Федеральная налоговая служба рассмотрела вопрос сдачи отчета по форме 6-НДФЛ предпринимателем, который на момент подачи отчета уже был снят с учета в качестве плательщика ЕНВД (Решение ФНС РФ от 02.08.2017 г. № СА-3-9/5198@).

Налоговая служба получила интернет обращение от предпринимателя, который до 30 декабря 2016 года осуществлял деятельность и платил ЕНВД. Стоит отметить, что ИП был зарегистрирован в двух инспекциях – по месту жительства и по месту ведения деятельности на ЕНВД. Когда подошел срок сдачи отчетности, а именно, 27 февраля 2017 года предприниматель сдал отчет 6-НДФЛ за 2016 год в налоговую инспекцию, в которой он был зарегистрирован в качестве плательщика ЕНВД.

Но он получил отказ в принятии отчета, в связи, с чем и возникла спорная ситуация. Прав ли предприниматель или нет? Как рассказала налоговая служба, абз. 6 п. 2 ст. 230 НК РФ установлено, что налоговые агенты – индивидуальные предприниматели, которые состоят в налоговом органе на учете по месту осуществления деятельности в связи с применением системы налогообложения в виде ЕНВД, представляют документ, содержащий сведения о доходах физических лиц за истекший налоговый период, и расчет сумм НДФЛ в налоговый орган по месту своего учета в связи с осуществлением такой деятельности.

Основанием для отказа в приеме налоговой декларации (расчета) является, в том числе, представление налоговой декларации (расчета) в налоговый орган, в компетенцию которого не входит прием этой налоговой декларации (расчета).

Таким образом, поскольку налогоплательщик 30 декабря 2016 года была снят с налогового учета по месту осуществления деятельности в связи с применением системы налогообложения в виде ЕНВД, то расчет по форме 6-НДФЛ следовало представить в налоговый орган по месту его учета в качестве индивидуального предпринимателя.

Так как на дату представления отчета (а это было 27 февраля 2017 года) предприниматель уже был снят с учета в качестве плательщика ЕНВД, то ему надо было отчитываться в налоговую инспекцию по месту своей регистрации.

Напомним, что снятие с учета плательщика ЕНВД при прекращении им предпринимательской деятельности, подлежащей налогообложению единым налогом, переходе на иной режим налогообложения, осуществляется на основании заявления. Заявление подается в налоговый орган в течение пяти дней со дня прекращения предпринимательской деятельности, облагаемой единым налогом, или со дня перехода на иной режим налогообложения, или с последнего дня месяца налогового периода, в котором допущены нарушения требований, установленных подп. 1 и 2 п. 2.2 ст. 346.26 НК РФ.

Датой снятия с учета налогоплательщика считается указанная в заявлении дата прекращения им предпринимательской деятельности, подлежащей налогообложению ЕНВД, или дата перехода на иной режим налогообложения.

Налоговый орган в течение пяти дней со дня получения от налогоплательщика заявления о снятии с учета в качестве налогоплательщика единого налога направляет ему уведомление о снятии его с учета.

Как заполнить заявление о снятии с учета в качестве плательщика ЕНВД?

Чтобы предпринимателю сняться с учета, надо заполнить заявление по форме ЕНВД-4, форма которого утверждена приказом ФНС России от 11.12.2012 г. № ММВ-7-6/941@.

Скачать форму № ЕНВД-4

На титульном листе заявления под названием есть поле «Прошу в соответствии с пунктом 3 статьи 346.28 Налогового кодекса Российской Федерации снять с учета индивидуального предпринимателя в связи», которое состоит из одного знакоместа. В этой ячейке надо поставить соответствующий номер:

– «1» – с прекращением предпринимательской деятельности, облагаемой единым налогом на вмененный доход;

– «2» – с переходом на иной режим налогообложения;

– «3» – с нарушением требований, установленных подпунктом 1 пункта 2.2 статьи 346.26 Налогового кодекса Российской Федерации;

– «4» – иное. Цифра 4 указывается в случае сообщения индивидуальным предпринимателем о прекращении отдельного вида предпринимательской деятельности и об адресе места осуществления этой деятельности.

Например, предприниматель вел два вида деятельности, один из которых облагался ЕНВД. ИП решил прекратить заниматься деятельностью, переведенной на «внеменку». Но сам предприниматель продолжает работать, не снимается с учета в качестве предпринимателя, в таком случае мы должны поставить в указанной ячейке «1».

Заявление состоит из титульного листа и Приложения. В случае, если количество видов предпринимательской деятельности и (или) мест осуществления предпринимательской деятельности составляет более трех, заполняется необходимое количество листов приложения к форме № ЕНВД-4.

Файлы для скачивания

Переход с ЕНВД и ПСН при реализации маркированных товаров

С 1 января 2020 года вступают изменения в ст. 346.27 часть 2 НК РФ. В соответствие с указанными изменениями налогоплательщики, применяющие ЕНВД и патент, не имеют право реализовывать следующие маркированные товары: лекарственные препараты, обувь и одежду из натурального меха. Соответственно, для продолжения своей деятельности такие наши клиенты должны сменить систему налогообложения на УСН или на ОСН.

1. Выбор другой системы налогообложения

Переход с ЕНВД на УСН

Налогоплательщики, применяющие ЕНВД, имеют право перейти на УСН, если они соответствуют условиям применения (ст. 346.12 НК РФ).

Добровольно перейти на уплату УСН организация или предприниматель, уплачивающие ЕНВД, могут только со следующего календарного года.

Для перехода на УСН организация или предприниматель, ранее уплачивавшие ЕНВД, должны:

подать уведомление о переходе на УСН в свою налоговую инспекцию;
сняться с налогового учета в качестве плательщика ЕНВД.

1.1. Согласно п. 1 ст. 346.13 НК РФ организации и индивидуальные предприниматели, изъявившие желание перейти на упрощенную систему налогообложения со следующего календарного года, уведомляют об этом налоговый орган по месту нахождения организации или месту жительства индивидуального предпринимателя не позднее 31 декабря календарного года, предшествующего календарному году, начиная с которого они переходят на упрощенную систему налогообложения. Т.е. направить уведомление (форма 26.2-1 с КНД 1150001) не позднее 31.12.2019 года.

1.2. Согласно абз. 3 п. 3 ст. 346.28 НК РФ Заявление о снятии с учета организации или индивидуального предпринимателя в качестве плательщика вмененного налога (по форме ЕНВД-3 с КНД 1111050 для организации, ЕНВД-4 с КНД 1112017 для ИП) необходимо направить в течение первых 5 рабочих дней января следующего года. Т.е. не позднее 15.01.2020 года.

Следует отметить, что заявление о снятии с учета в качестве плательщика ЕНВД организация или ИП должны подать в ту налоговую инспекцию, где они состоят на учете в качестве плательщиков ЕНВД.

По общему правилу датой снятия с учета плательщика ЕНВД будет считаться дата, указанная в заявлении налогоплательщика.

Получив это заявление, налоговый орган в течение пяти рабочих дней снимет налогоплательщика с учета и выдаст соответствующее уведомление.

Переход с ЕНВД на ОСН

Налогоплательщики могут добровольно отказаться от ЕНВД и перейти на ОСН.

Отказаться можно только с начала следующего календарного года. То есть переход на общую систему налогообложения состоится не ранее 1 января нового года (п. 1 ст. 346.28 НК).

Для перехода организации и индивидуальные предприниматели, ранее уплачивавшие ЕНВД, должны:

сняться с налогового учета в качестве плательщика ЕНВД.

Согласно абз. 3 п. 3 ст. 346.28 НК РФ Заявление о снятии с учета организации или индивидуального предпринимателя в качестве плательщика вмененного налога (по форме ЕНВД-3 с КНД 1111050 для организации, ЕНВД-4 с КНД 1112017 для ИП) необходимо направить в течение первых 5 рабочих дней января следующего года. Т.е. не позднее 15.01.2020 года.

Автоматически налоговая служба переведет налогоплательщика на ОСН.

Переход с ПСН на УСН

Индивидуальные предприниматели, применяющие патентную систему налогообложения, могут перейти на УСН с начала календарного года. Для перехода им необходимо:

подать уведомление о переходе на УСН в свою налоговую инспекцию;
не продлевать патент.

Согласно п. 1 ст. 346.13 НК РФ индивидуальные предприниматели, изъявившие желание перейти на упрощенную систему налогообложения со следующего календарного года, уведомляют об этом налоговый орган по месту нахождения организации или месту жительства индивидуального предпринимателя не позднее 31 декабря календарного года, предшествующего календарному году, начиная с которого они переходят на упрощенную систему налогообложения. Т.е. направить уведомление (форма 26.2-1 с КНД 1150001) не позднее 31.12.2019 года.

2. Отправка документов в ФНС

Если вы используете наше ПО для представления отчетности, чтобы сформировать уведомление о переходе, воспользуйтесь статьей «Формирование документов для ФНС».

Отправить заявку на подключение к нашей системе для представления отчетности вы можете на странице нашего сайта.

3. Изменение настроек ККТ

Важно! Фискальный накопитель нужно менять, только если:

вы переходите на ОСН,
и
в паспорте фискального накопителя есть ограничения для ОСН. которые установил его производитель. Например, ФН от производителя «Инвента» на 36 месяцев можно использовать на ОСН только при оказании услуг.

В остальных случаях его можно использовать до окончания срока действия.

После смены системы налогообложения вам необходимо изменить настройки ККТ:

Перерегистрировать ККТ в ФНС. В заявлении на перерегистрацию необходимо выбрать «Перерегистрация ККТ по иным причинам»;
Изменить систему налогообложения у товаров. Подробнее можете уточнить у персонала, который обслуживает вашу ККТ.

Это нужно сделать после закрытия последней кассовой смены в старом году и до ее открытия в новом.

Вы можете сделать всё это:

Close IP по UNVD в год. Прекращение вида деятельности на ЕНВД. Как закрыть ИП на ЕНВД

Каждый налогоплательщик Российской Федерации, осуществляющий предпринимательскую деятельность в качестве частного предпринимателя, имеет право прекратить предпринимательскую деятельность в любое время. Прекращение деятельности интеллектуальной собственности в 2019 году с применением налогового режима согласно UNVD обязывает предпринимателя вести бухгалтерский учет в качестве плательщика этого налога. Делать это нужно своевременно и правильно, чтобы избежать проблем в будущем.

Стандартная процедура закрытия ИП в 2019 году

Особых проблем возникнуть не должно. Рассматриваемая процедура довольно проста. Разберем подробно, как осуществляется прекращение деятельности ИП в 2019 году. Для этого необходимо выполнить следующие действия:

Нюансы прекращения деятельности ИП, применяющих налоговый режим УНВД

Требования, связанные с выводом IP в 2019 году с использованием UNVD, остались прежними.Прекращение деятельности ИП, работающих на ЕНВД, происходит на основании установленного приложения формы № ENVD-4.

Данная справка предоставляется в налоговый орган в обязательном порядке. В течение пяти дней, начиная с этого дня, была сделана запись о предпринимательской деятельности.

Налоговый кодекс РФ при закрытии ИП специалистами не предусмотрены обязательные сроки подачи деклараций и уплаты налогов. Однако прекращение деятельности предприятия, работающего на ЕНВД, не влечет списания накопленной задолженности.В налоговой инспекции При закрытии бизнеса необходимо, во-первых, сдать «последнюю» декларацию, а во-вторых, оплатить ЕНВД за последний рабочий квартал. Декларация AVD может быть предоставлена как до подачи заявления на форму UNVD-4, так и после окончания налогового периода в соответствии с общими правилами.

Следует помнить, что в главе 26.3 Налогового кодекса не предусмотрено представление «нулевых» деклараций на УНВД.

Специфика закрытия ИП с долгами

При регистрации закрытия ИП налоговый орган размещает информатору внебюджетные средства — ПФР и ФСС.На основании данных, полученных от налоговых органов, эти органы автоматически снимают ИП с учета. Однако неоплаченная задолженность остается, и ее необходимо выплатить, даже будучи физическим лицом. В противном случае долги предпринимателя будут взысканы в судебном порядке.

Порядок снятия с учета индивидуального предпринимателя, зарегистрированного в качестве работодателя, несколько иной. Сложность заключается в том, что этого предпринимателя нужно заранее рассчитывать по долгам во внебюджетные фонды.

Факт официальной регистрации закрытия бизнеса не означает отмены прежних обязательств предпринимателя. Поэтому с выплатой долга кредиторам и ранее наемным работникам затягивать не рекомендуется, так как при подаче требований в суд бывший предприниматель рискует потерять все свое имущество.

В заключение необходимо отметить, что после снятия с учета индивидуальному предпринимателю необходимо будет аннулировать бухгалтерский учет индивидуального предпринимателя, а также провести процедуру снятия с учета Анкеты.

Полезные мелочи, о которых нужно помнить плательщикам ENVD в 2019 году

При официальной регистрации закрытия бизнеса необходимо помнить, что правильно оформленные и своевременно поданные документы гарантируют быстрое завершение процедуры и отсутствие проблем в будущем.

Так, бизнесмены часто ошибаются при заполнении квитанций об уплате госпошлины.

Необходимо помнить, что при уплате пошлины на прекращение деятельности ИП в 2019 году необходимо поставить на право ЦБК.

Также при заполнении налоговой отчетности важно знать, что в 2019 году произошли изменения для индивидуальных предпринимателей, у которых есть возможность снизить ДНВД по страховым взносам,

В расчет этих взносов внесены изменения. (1 Марлет умноженный на тариф). Фиксированная сумма Завершено до 31 декабря.

В 2019 году не следует забывать, что превышение годового оборота ИП отметки в 300000 рублей, влечет за собой рост отчислений в ПФР на 1% от суммы превышения.

У этой системы есть свои тонкости, с которыми нужно разбираться. Хорошо, если вы решили «завить» в конце отчетного периода. А если нет, то как быть? Я вообще не хочу платить налог за 90 дней, если проработал 2 недели. Не нужно. Налог не обязывает вас тратить зря, если вы отправите ему окончательный отчет с кодом ликвидации.

Что делать в отчете

Форма налоговой декларации Когда она не отличается от той, которую вы привыкли сдавать ежеквартально.Утверждено в 2014 году приказом № ММБ-7-3 / 353.

Главное отличие в его содержании. В случае, если вы развернете деятельность, потратив полный трехмесячный период, срок сдачи документа сохраняется — до 20 числа первого месяца после отчетного периода.

Отличие от «обычного» документа состоит в том, что в поле «Налоговое исполнение» нужно просто поставить значение 50, а в поле «Форма реорганизации» нужно ввести цифру 0 — код ликвидации.Это говорит о том, что не стоит ожидать от вас отчетов по UNVD.

По налогу совершенно неважные доходы и расходы предпринимателя, практикующего уплату УНВД.

Налог начисляется на основании ряда показателей, утвержденных на федеральном и местном уровнях. Присутствует налог, есть физический показатель, который в числовом эквиваленте определяет масштаб вашего бизнеса. Предположим, вы остановили бизнес до конца отчетного периода, персонал был распущен, закрыты магазины, распродано оборудование и т. Д.В этом случае физический показатель будет равен 0, и именно эту цифру нужно поставить в соответствующее поле декларации.

Как рассчитать сумму AVD в случае закрытия одного из кафе на территории муниципального образования Где организация (ИП) продолжает вести «вмененную» деятельность через другие объекты общественного питания? Как быть, если наоборот откроется другое кафе?

Расчет суммы UNVD зависит от величины физического показателя, характеризующего «вмененный» вид деятельности.При оказании услуг общественного питания через объект общественного питания, имеющий зал обслуживания посетителей, площадь зала обслуживания посетителей выступает в качестве физического показателя (в квадратных метрах), через объект, не имеющий зала обслуживания посетителей, — номер сотрудников, в том числе ИП.

ИН от татт 346.29 Налогового кодекса РФ выявлены особенности исчисления УНВД в следующих случаях.

Обстоятельства	Особенности расчета УЭНВД
Выписка организации (ИП) для учета в налоговом органе как плательщика ЕНВД	Расчет производится с даты регистрации (исходя из фактического количества дней осуществления «вмененных» мероприятий) (п.10)
Исключение из учета в качестве плательщика ЕНВД в связи с прекращением «вмененной» деятельности	Расчет ведется с первого дня налогового периода до даты снятия со счета, указанного в уведомлении (учитывается фактическое количество мероприятий) (п.10)
Изменение величины физического показателя	Изменение учитывается при расчете UNVD с начала того месяца, когда это произошло (пункт 9)

В ситуации закрытия одного из кафе на территории муниципального образования, где организация (ИП) продолжает вести «вмененную» деятельность через другие объекты общественного питания, налогоплательщик не снимается с учета как плательщик УНВД, так как продолжает оставаться таковым.Ошибочно считается изменение величины физического показателя. Фактически, организация (ИП) прекращает осуществлять деятельность через одно из предприятий общественного питания — одно из мест «вмененной» деятельности. В этом случае расчет ENVD должен производиться в порядке, установленном для ситуации удаления как плательщика указанного налога. Для такого подхода финансисты (см. Письма от 23.06.2017 № 03-11-11 / 39527, от 03.12.2015 № 03-11-09 / 70689 (предназначены для ознакомления и использования в работе ФНС РФ). Российская Федерация от 19.02.2016 г.СД-4-3 / 2690)).

Так, если налогоплательщик прекратил осуществление «вмененной» деятельности через объект общественного питания, УНВД рассчитывается в соответствии с п. 10 ст. 346.29 Налогового кодекса Российской Федерации вне зависимости от:

— налогоплательщик, ведущий налоговый учет по данному виду деятельности;

продолжает ли она осуществляться на других аналогичных объектах в муниципальном образовании, где она состоит из налогового учета как плательщика ЕНВД.

Тот же подход — ориентироваться на положения п. 10 ст. 346.29 НК РФ — его следует использовать в случае открытия нового кафе на территории муниципального образования, где организация (ИП) уже «вменена» через аналогичные объекты. Об этом говорится в письме Минфина РФ от 08.12.2015 № 03-11-06 / 3/71666.

Ранее финансисты в описанной ситуации закрытие / открытие кафе расценивали как изменение физического показателя и настаивали на необходимости расчета п. 9 ст.346.29 Налогового кодекса Российской Федерации (см. Письмо от 30.10.2013 № 03-11-11 / 46223).

Обновленная точка зрения должностных лиц финансового отдела ориентирована на сложившуюся арбитражную практику, на которую они сами указали: позиция полностью учитывает подход арбитражных судов по данному вопросу . Мы писали о наличии складной арбитражной практики в консультации «УНВД: закрыто одно из кафе». Список судебных актов остался прежним (напомним).

В то же время есть и такой судебный акт, который срывается с общего здания. Данное постановление АС ДВО от 23.11.2015 № Ф03-4746 / 2015 по делу № А73-240 / 2015, в передаче которого в судебную коллегию по экономическим спорам ВС РФ отказано Определение ВС РФ от 31.03.2016 № 303-кг16-1788.

Создание нового отдельного торгового объекта в том же муниципалитете, в котором общество уже реализует розничную торговлю. Через стационарные торговые объекты и ведение налогового учета в качестве плательщика UNVD — это изменение величины физического показателя: Площадь торговли.Следовательно, проверка была основана на расчете ДНВД с начала месяца, в котором произошло изменение физического показателя.
Довод общества о исчислении ЕНВД в порядке п. 10 ст. 346.29 Налогового кодекса Российской Федерации рассмотрено судами и законно отклонено, поскольку порядок, предусмотренный указанной нормой, связан с постановкой налогоплательщика для учета в налоговом органе и в отношении налогоплательщика.При открытии нового объекта торговли в муниципальном образовании, в котором налогоплательщик уже осуществляет аналогичный вид деятельности, регистрация в налоговом органе не производится, следовательно, применяется п. 9 ст. 346.29 Налогового кодекса РФ.

В случае закрытия одного из кафе на территории муниципального образования, где организация (ИП) продолжает вести «вмененную» деятельность через другие объекты общественного питания, расчет суммы AVD должен производиться в порядке, установленном для отношений с учетом как налогоплательщик, то есть исходя из фактического количества дней осуществления деятельности через закрытое кафе.То же касается и открытия нового кафе на территории, где организация (ИП) уже ведет «вмененную» деятельность через аналогичные объекты. Такой подход поддерживают официальные лица и большинство судей.

Применение налогового режима ЕНВД является добровольным, однако, чтобы начать работу по нему, необходимо зарегистрироваться в налоговых органах. Поэтому, когда налогоплательщик принимает решение о выходе в УНВД, он также должен проинформировать налоговые органы и пройти процедуру снятия с учета в ФНС.

Добровольная помощь при ENVD может быть обусловлена следующими факторами:

прекращение деятельности в смену, это происходит, например, если плательщик прекратил предоставлять услуги, переведенные на УНВД, или территориальные власти вывели свою деятельность из перечня услуг, подпадающих под этот режим;

переход в другой режим.

Обратите внимание на другую ситуацию: налогоплательщик не попадает ни под одно из вышеперечисленных оснований, а просто пострадал по месту своей деятельности.Влияет ли это на обязанность снятия с учета в ФНС?

Я хочу ответить на этот вопрос в публикации «Минфин объяснил, как платить UNVD при переезде магазина на новое место» .

Где найти анкету-заявку с ENVD 2018-2019

Бланк заявления, на основании которого налоговый орган снимает налогоплательщика с УНВД, отличается для предпринимателей и компаний.Форма для IP называется UNVD-4, а для организаций — UNVD-3.

Указанные документы можно скачать .

Какие сроки должны быть соблюдены, чтобы подать заявление об исключении из UNVD

При проведении смены плательщик должен подать заявление о снятии с учета в течение 5 дней с момента прекращения работы по УНВД. При этом порядок расчета периода снятия с учета ENVD отличается:

если деятельность прекращена самим налогоплательщиком, отсчет времени начинается с момента ее фактического завершения;
, если снятие с учета связано с причинами, не зависящими от плательщика, то отсчет 5 дней осуществляется иначе.

Как — вы узнаете из этого материал .

Получив такую справку, налоговые органы, в свою очередь, обязаны снять плательщика с бухгалтерского учета в течение 5 дней со дня ее подачи. После снятия с учета ИФНС отправляет соответствующее уведомление.

Узнать подробнее .

Бывает, что «вакцина» в срок, указанный для подачи заявки, не попала.Тогда налог не выполнит его в течение 5-дневного срока, отведенного законом.

Когда ИФНС снимает с учета такого плательщика, говорится в этот материал .

Глядя из налогового учета, важно не забыть сдать декларацию по ЕНВД.

В какую инспекцию нужно подавать последний отчет, рассказывается в материале «Снято с учета на ЕНВД? Не забудьте сдать декларацию» .

Как оформить заявление о снятии с учета ЕНВД для ООО

В бланке УНВД-3 компании необходимо указать следующие данные:

сведения о причине отказа УНВД; Важно правильно отразить реквизит, характеризуя его в зависимости от завершения одного из нескольких видов деятельности;
наименование;
вид деятельности;
мастерская;
прочие данные.

Безошибочно заполнить ЭНВД-3 вам поможет материал «Форма ENVD 3: Заявление о снятии с учета организации» .

Как ИП должно оформить акт об снятии с учета ENVD

В заявлении IP указывается информация:

обо мне — фамилия, имя, отчество;
причина прекращения деятельности по начислению, обозначенная кодами от 1 до 4.

О том, что еще необходимо отразить в этой форме, говорится в статье «Форма UNVD 4: заявление о снятии с регистрации ИС».

Итак, снятие с учета должно сопровождаться обязательным уведомлением об этом факте налоговых органов.Как это сделать правильно, помогите разобраться в материалах нашей постоянно обновляемой рубрики

Закрытие и ликвидация — разные дела .

Это главное, что нужно понимать, чтобы не путать процессы и смысл операции. Строго говоря, индивидуальный предприниматель является физическим лицом, а не юридическим лицом, поэтому исключить его как ООО. Человек, зарегистрированный как индивидуальный предприниматель, может только завершить карьеру (а индивидуальное предпринимательство — это карьера).Он имеет право заполнить его в любой момент, как уволиться с работы по трудовому договору. Но, как и при увольнении, нужно соблюдать все правила и распоряжения.

И важно знать, в чем отличия процедуры закрытия ИП, работающих на УНВД и ИП от «упрощенного» или иных вариантов налогообложения.

Подготовка к закрытию ИП

Необходимо сдать отчет
Необходимо закрыть расчетные счета в банках
Необходимо отменить регистрацию кассы
Необходимо выявить со счета в Фонде социального страхования (ФСС) и Пенсионном фонде Российской Федерации (ПФР)

Ни один из этих шагов нельзя упускать, необходимо грамотно подойти к их выполнению, правильно заполнить все документы и предоставить отчеты.Все шаги специально описаны в отдельных статьях на нашем сайте, поэтому внимательно их прочтите. В некоторых случаях можно упустить важные нюансы той или иной процедуры.

Первые четыре шага были подготовительными, что характерно для процедуры регистрации предпринимательской деятельности вообще. Теперь перейдем к основным процессам закрытия ИП, работающих по принципу единого налога на вмененный доход.

Закрыть ИП на «Венчейн»

Подайте заполненное заявление в налоговую инспекцию по месту регистрации вашего ИП.Чтобы получить форму заявки, вы можете обратиться в саму налоговую или найти форму заявки и скачать ее для печати на официальном сайте ФНС. Вам нужен номер формы P26001.
Уплачиваем госпошлину 160 руб. Оплата также может осуществляться посредством электронных платежей с использованием налоговой службы. В дальнейшем вам понадобится квитанция об оплате госпошлины, так что сразу ее распечатайте.
Подайте заранее определенное заявление и квитанцию напрямую в налоговую службу.Или вы можете снова воспользоваться их электронным сервисом и отправить так цифровую версию.
Ждем пять дней. После этого налоговая выдает вам документ, предполагающий, что деятельность индивидуального предпринимателя прекращена.
Далее отправляем в налоговый документ в виде УНВД-4. Это необходимо в течение пяти рабочих дней, не позднее. Эта форма предназначена для регистрации отмены уплаты этого налога на вмененный доход.

Какая форма ENVD-4 и почему это важно

Форма ЭНВД-4, утвержденная Приказом ФНС России от 28.07.2012 г.ММБ-7-6 / 941. Бланк формы можно получить в самом заказе. Он находится в Приложении №4 к настоящему приказу.

Как заполнить анкету ЯНВД-4, вы также можете узнать, обратившись на официальный сайт ФНС, где есть образцы.

Важно! Без заполнения Бланка, ENVD-4 IP не будет считаться закрытым! И соответственно, вы рискуете тем, что налоги будут продолжать начисляться, даже если вы не работаете индивидуальным предпринимателем. Кстати, в других специальных системах национопификации такой формы нет.Поэтому для незнающего человека необходимость заполнения анкеты может остаться незамеченной.

Когда предприниматель принимает решение о прекращении деятельности, ему нужно не забыть провести закрытие предпринимательства. В этой ситуации у таких бизнесменов часто возникает вопрос, как закрыть ИП, можно ли это сделать самому. Такое мероприятие не требует особых затрат, но во избежание проблем необходимо проводить в соответствии с законодательством.

В последние годы идет процесс увеличения количества предпринимателей, решивших прекратить деятельность в форме физического лица.

Для этого существует множество причин, среди которых можно выделить:

Ликвидация ИП в связи с финансовыми проблемами является наиболее частой причиной закрытия предпринимательства. В основном это связано с нехваткой денег для дальнейшего бизнеса, высоким уровнем налогов и т. Д. Также существует процедура банкротства, в соответствии с которой предпринимательство закрывается на основании решения суда.
Закрытие ИП с целью открытия нового юридического лица — для некоторых видов деятельности на законодательном уровне бизнес предоставляется только как организации в связи с повышенными требованиями к ним.Поэтому многие предприниматели подают документы на закрытие ИП для дальнейшего изучения выбранных ими видов.
Устранение ИП в связи с отсутствием желания продолжать заниматься бизнесом из-за отсутствия навыков в этой сфере.
Закрытие ИП физического лица по причинам, связанным со здоровьем.
Сильное трудоустройство физического лица оформлено в виде ИП.
Устранение ИП как способа уйти от налогообложения — такое прекращение деятельности может повлечь соответствующее наказание.

Важно! В любом случае прекращение деятельности физического лица в форме ИП должно быть правильно выполнено независимо от причин, вызвавших это событие. Это позволит избежать дальнейших штрафов со стороны налоговой службы и Пенсионного фонда.

Закрытие ИП Пошаговая инструкция в 2017 году

Шаг 1. Сбор документов для закрытия ИП

Принимая решение о прекращении деятельности физическим лицом, предприниматель должен собрать документы на закрытие ИП.

Какие документы необходимы для закрытия ИП определяется нормами действующего законодательства:

Необходимые — составляются предпринимателем самостоятельно при закрытии своего дела. Его можно взять в типографии или распечатать в соответствующем интернет-сервисе. Главное, чтобы необходимая форма не устарела и была актуальной на данный момент. При нанесении вручную необходимо использовать чернила черного цвета.
Квитанция об оплате госпошлины.

Внимание! Если форма P26001 будет применяться самостоятельно физическим лицом, и его доверенному представителю необходимо будет оформить нотариально заверенную доверенность.

Шаг 2. Оплата госпошлины

Для фиксации прекращения деятельности в виде ИП также необходимо предоставить квитанцию об оплате госпошлины. В 2017г. Размер госпошлины составляет 160 руб.

Можно оплатить через отделения банковских учреждений или через терминалы.

Внимание! Квитанцию можно оформить на соответствующем Интернет-ресурсе, на сайте ИФНС HTTPS://Service.nalog.ru/gp.do.

Реквизиты бланка госпошлины также можно узнать в отделе налоговой службы.

КБК этого платежа должен быть таким 182 1 08 07010 01 1000 110.

При использовании банковских терминалов квитанция формируется автоматически, необходимо заполнить только данные плательщика.

Внимание! Также желательно сделать ксерокопию оплаченной квитанции, чтобы экземпляр оставался в руках физического лица, поскольку оригинал необходимо сдать в налоговую.

Шаг 3. Запросить справку из пенсионного фонда

Заявление об исключении из ENVD ИП в 2017 году

В связи с тем, что ИП как налогоплательщик мог быть зарегистрирован по месту деятельности, то есть налог не на по месту жительства, то заявление на бланк УНВД-4 необходимо подать в тот же налоговый орган. Срок подачи заявок в случае прекращения деятельности — пять дней, как указано в п. 3 шт. 3 ст. 346.28 Налогового кодекса РФ.Дата прекращения деятельности указывается в заявлении.

Автоматическая снятие с учета в случае прекращения деятельности в качестве предпринимателя не предусмотрено, тем более, что налоговый орган другого региона не знает, что предприниматель принял решение закрыть ИП на ЕНВД и в случае необработки деклараций будет взиматься плата и штраф за непредоставление информации. Следовательно, в случае nonVD-4 возникнет необходимость рассмотрения дела в налоговых органах, потому что даже в случае прекращения деятельности в качестве предпринимателя долг будет предъявлен физическому лицу.

В выписке необходимо указать данные предпринимателя, иногда трудности вызывают подбор кода снятия с учета. Всего кодов четыре, и в случае прекращения предпринимательской деятельности необходимо поставить «1».

Последствия неправильного подхода к коду — IP не может быть удален или удален на другой базе, и он должен будет подать заявление об исправлении, может взиматься налог за этот период, так как в этом случае чтение дата может быть указана в соответствии с датой в отчете о корректировке.

Налог на ЕНВД уплачивается до снятия с учета в качестве налогоплательщика. При своевременной подаче заявки выплата УНВД производится в тот период, когда предприниматель фактически работал. Например, IP подал заявку и указал, что деятельность прекратилась 25 декабря. В этом случае налог на смену необходимо рассчитывать из расчета фактически затраченного времени, то есть за период с 1 октября по 24 декабря. Соответственно, за декабрь налог уплачивается не полностью, а только до даты снятия с учета.

Никаких других возможностей относительно сдачи отчетности при прекращении деятельности не предусмотрено, то есть декларация о UEND, при закрытии ИП, предъявляется одновременно. Если ИП удаляется со счета как плательщика UCND 25 декабря, а прекращение регистрации в качестве ИП было 11 января, то он должен подать декларацию до 20 января (письмо Минфина РФ. и Федеральной налоговой службы РФ от 08.04.2016 N СД-3-3 /). Более того, за оставшийся период, от снятия со счета в качестве сварочного шва для исключения записи из ENGRIP, предприниматель должен быть отчитан и, при необходимости, уплатить налог по используемой налоговой системе — общей или упрощенной.

В связи с тем, что ИС в отношении деятельности, облагаемой ENVD, может быть зарегистрирована в другом налоговом органе, возникают определенные трудности с тем, куда подавать декларацию после снятия с учета. В письме Минфина РФ и ФНС РФ от 20.03.2015 N, ГД-4-3 / указано, что налоговый орган по месту жительства обязан принять декларацию.

Таким образом, если ИП использует УНВД, помимо установленных документов, необходимых для закрытия ИП, она должна подать заявку на снятие с формы УНВД-4 и Декларации по УНВД.

Здравствуйте. В этой статье мы расскажем, как закрыть IP, который работает в ЕНВД.

Сегодня вы узнаете:

Документы, необходимые для закрытия отдельных видов деятельности;
Как подать документы;
На что обратить внимание после закрытия деятельности.

Пошаговая инструкция по закрытию IP на UNVD

Согласно закону, каждый предприниматель может при необходимости закрыть. Вы можете самостоятельно решить все вопросы, связанные с закрытием вашего бизнеса, и доверить дело квалифицированным юридическим компаниям, которые оперативно решат все вопросы.

Рассмотрим, как правильно провести процедуру закрытия ПП. По сути, процедура ничем не отличается от обычной.

Погашение всей задолженности

Если вы решили перестать работать предпринимателем, то первое, что вам нужно сделать, это выплатить все долги.Узнать сумму можно на официальном сайте налоговой службы или в госуслугах.

Увольнение работников

Если вы выполнили всю работу самостоятельно, то этот этап закрытия пропускается. Если вам помогли работники, то не менее чем за 2 месяца они должны уведомить о своем решении. Уведомление производится исключительно в письменной форме в адрес каждого сотрудника.

Работнику, который вынужден покинуть основное место работы, необходимо оплатить:

Уплата госпошлины

Закрытие любой деятельности облагается налогом.Стоимость госпошлины в 2017 году всего 160 рублей.

Оплату можно произвести в отделении любого банка или на официальном сайте налоговой службы. После оплаты обязательно сохраните чек, он понадобится позже при подаче документов.

Оформление пакета документов

Для корректного закрытия ИП на ЕНВД подготовьте список обязательных документов:

Заключительный отчет;
Платежное поручение об уплате госпошлины;
Паспорт.

Заявка заполняется строго по утвержденной форме P26001.

Также получить анкету-заявление можно лично в налоговой инспекции.

Стоит отметить, что все столбцы состояния должны быть заполнены правильно. Не допускаются исправления и помарки. Образец правильного заполнения также можно найти в Интернете или запросить в налоговой службе.

При выборе второго варианта стоит учесть, что такие сертификаты могут быть опубликованы в специальном уголке потребителя.

Важно учитывать, что подпись на заявке не нужно ставить заранее — это грубая ошибка. Подписать заявление можно только в присутствии налогового эксперта.

Нарушение пломбы

Есть два варианта, благодаря которым вы можете уничтожить и быть уверенным, что никто другой не сможет этим воспользоваться:

Самостоятельно;
Через организацию.

Если вы решили сохранить личные инструменты, вы можете самостоятельно уничтожить печать.Выбирая этот вариант, будьте готовы подать заявку и оплатить госпошлину за уничтожение пресса. Заявление заполняется в специальной форме.

Когда он доверяет профессионалам, предприниматель должен будет предоставить марки и оттиски специализированной компании и получить документ, подтверждающий, что пресса уничтожена.

Подача документов

На этом этапе многие предприниматели допускают самую большую ошибку — их не принимают в налоговую службу.Согласно требованиям, подать документы на устранение II можно только в тот орган, в котором вы прошли регистрацию.

Получается где, там закрыто. В противном случае вся проделанная работа будет потрачена зря.

Можно подавать документы:

Подготовленный пакет передается инспектору налоговой службы под расписку. Отныне у вас есть 5 дней, чтобы дождаться полного закрытия вашей деятельности.

В этом случае вам необходимо будет оформить нотариально заверенную доверенность на представителя.Заверенная копия и паспорт доверенного лица прилагается к полному пакету документов.

При выборе этого варианта вы можете отправить документацию заказным письмом с уведомлением. Только не все так просто, так как документы необходимо сохранить у нотариуса и сделать опись. Днем подачи документов будет считаться день получения письма уполномоченным налоговым инспектором.

Через официальный сайт ФНС.

Это самый популярный вариант предоставления документов, так как он экономит время и позволяет отслеживать процесс закрытия в режиме реального времени.Для подачи документов необходимо перейти на официальный сайт налоговой службы. Электронный пакет документов заверяется электронной подписью.

Получение сертификатов о закрытии ИП

Последнее, что вам нужно сделать, это получить официальное подтверждение того, что ваш IP закрыт. На шестой день после подачи документов необходимо обратиться в налоговую инспекцию и получить выписку из Ехрип.

На практике бывает, что в указанный день вы получаете не закрывающие документы, а отказ.В этом случае также предоставляется официальный документ, в котором четко прописана причина отказа.

В большинстве случаев отрицательный отчет получает:

При предоставлении неполного пакета документов;
В документации есть ошибки;
Если документы не переданы в соответствующую налоговую службу.

После исправления ошибки документы отправляются.

Заключение

Многих предпринимателей беспокоит вопрос, может ли налоговая служба отказать в закрытии ИП, если есть долги перед Пенсионным фондом и налоговой службой.Если внимательно изучить закон, то можно понять, что это не повод для отказа.

По закону любой предприниматель имеет полное право, так как все равно прислушивались к физическому лицу. Поэтому, если вы столкнулись с отказом по такой причине, то просто не бойтесь отстаивать свои права, ведь закон на вашей стороне.

Мало кто знает, что после закрытия ИП необходимо подавать декларацию, даже если она равна нулю. Если вы не сдадите его, вы будете вынуждены заплатить штраф.

Инструкция по наполнению. За сколько дней со дня подачи документов о прекращении деятельности ИП налог снимут с учета предпринимателя

В нашем сегодняшнем материале мы расскажем читателю о порядке снятия с учета ЭНВД и правилах заполнения соответствующей ведомости. Внизу страницы вы можете скачать анкету-заявку из бухгалтерии ENVD.Правила и документы, действующие в 2019 году, остаются неизменными на 2020 год. Оформление и снятие плательщика ENVD происходит на основании заявок.

Если вы являетесь налогоплательщиком ЕНВД, может возникнуть ситуация, когда ваша коммерческая деятельность оказалась вне рамок условий применения данного вида налогообложения. Например:

отказ от вида деятельности, при котором можно применять специальный режим налогообложения ЕНВД;
в связи с расширением объемов предпринимательской деятельности, т.е. площадь торгового зала увеличена и теперь превысила 150 кв. м;
доля участия в других организациях составила более 25 процентов;
по итогам налогового периода. Среднесписочная численность сотрудников превысила 100 человек.

В первом случае, в течение пяти дней после вышеуказанных изменений, вы должны подать заявление о снятии с учета UNVD. Для организаций и индивидуальных предпринимателей разработаны различные формы отчетности.В остальных случаях вы выходите за рамки использования UNVD, тем самым нарушая правила использования UTII. Заявление о снятии с учета с нарушением порядка использования УНВД подается не позднее последнего числа месяца того месяца, в котором обнаружено одно из трех нарушений, описанных выше.

Для организаций — форма УэнВД 3 (заявление об исключении из организации организации в качестве налогоплательщика единого налога на вмененный доход по отдельным видам деятельности (форма №ЭНВД-3). Исключение ИП из учета ЭНВД регламентировано приказом ФНС России от 11 декабря 2012 г. № ММБ-7-6 / 94.

Для индивидуальных предпринимателей — Форма ENVD 4 (заявление о снятии с учета индивидуального предпринимателя в качестве налогоплательщика единого налога на вмененный доход по отдельным видам деятельности (Форма ENVD-3). Исключение юридического лица из бухгалтерского учета ENVD регулируется приказом Федеральная налоговая служба России от 11 декабря 2012 г.ММБ-7-6 / 941.

Даты снятия с учета УНВД

На основании вашего заявления в течение 5 рабочих дней со дня его получения налоговая инспекция выдает или отправляет по почте, в зависимости от того, как вы укажете в заявлении, уведомление о снятии с учета, в котором будет указана дата снятия вас с учета.

Обратите внимание, что этой датой будет дата, указанная вами в выписке. То есть в заявке вы указываете дату снятия вас с особого налогового режима и причину прекращения деятельности или перехода на другой режим налогообложения.

Если вы нарушили срок подачи заявления о предпринимательской деятельности в связи с прекращением предпринимательской деятельности, датой снятия со счета будет последний день месяца, в котором было подано заявление. Для вас это будет означать, что вы обязаны уплатить налог за последний месяц, а не за фактическое время осуществления деятельности в этом месяце (Налоговый кодекс CF.10, статья 346.29).

Вы имеете право добровольно перейти на другой режим налогообложения только с начала года, если сохраните деятельность на ЕНВД.

Перейти на другой режим налогообложения в течение года, если прекратить деятельность, подлежащую налогообложению в течение года единым налогом, и начать осуществлять другой вид деятельности. В этом случае заявление о снятии с учета УНВД должно содержать дату прекращения данного вида деятельности.

Но если вы допустили хотя бы одно нарушение, о котором написано выше, то это ваша обязанность перейти на другой режим налогообложения с последнего дня налогового периода, в котором нарушены требования, установленные подпунктами 1 и 2 пункта 2.2 статьи 346.26 Налогового кодекса Российской Федерации.

Не забудьте предоставить декларацию ENVD, после того как вы сняли с учета ENVD плательщика. Срок подачи декларации ENVD В случае снятия с учета он не отличается от обычного срока подачи декларации, а именно до 20 числа первого месяца, следующего за отчетным кварталом.

Для подачи декларации после снятия с учета необходимо в инспекцию, в которой вы числились «вакцинировщиком».Бывают, например, такие ситуации, когда инспекция, в которой вы были зарегистрированы в качестве плательщика UTI, отказывается подавать декларацию после того, как вас сняли с учета UNVD. Например, вы вылетели с 10 октября 2019 года. Срок предоставления декларации за третий квартал — до 20 января 2020 года. Следовательно, вы имеете право подать декларацию до конца этого периода, но проверка по К моменту подачи Декларации вы уже сняли вас с учета и передали карту налогоплательщика в вашу базовую ИФНС, по месту вашей регистрации и отказываетесь принимать Декларацию.В этом случае действия проверки незаконны. Об этом говорится в письме ФНС от 20.03.2015. № GD-4-3 / [Электронная почта защищена] Если вы столкнулись с такой ситуацией, вы имеете право подать жалобу, ссылаясь на приведенное выше письмо IFNS.

Порядок заполнения декларации о снятии с учета УНВД

Порядок заполнения декларации о снятии с учета плательщика ЕНВД, описан в приказе ФНС РФ от 11.12.2012 № ММБ-7-6 / [Электронная почта защищена]). Ничего сложного и отличного от порядка заполнения документов такой категории это утверждение не представляет. Остановимся на одном моменте. Это определение основы удаления ENVD.

При заполнении заявки вам будет предложено выбрать один из четырех кодов:

«1» — если предпринимательская деятельность прекращена;
«2» — в случае перехода на другой режим налогообложения;
«3» — при соблюдении требований к использованию ЕНВД, установленных пп.1 и абзацем 2 пункта 2.Нарушены 2 статьи 346.26 Налогового кодекса Российской Федерации;
«4» — если в основе нет ни одного из вышеперечисленных пунктов.

Первые 3 кода не вызывают вопросов. Узнаем, при каких обстоятельствах использовать цифру 4 в этом приложении.

Налогообложение доходов с рукавами — это добровольный режим, который предприятие может выбрать (или отказаться от него) без каких-либо указаний. Прекращая «входную» деятельность, ИП необходимо подать в налоговые органы ENVD-4 .Он используется, когда остановлено , а не все действия .

Образец заполнения и пустой бланк формы ENVD-4

Файлы

Использование формы

Основная функция формы ENVD-4 — показать, что ИП перестанет платить единый налог на вмененный доход. Поэтому приложение ассоциируется с окончанием предпринимательской позиции. Однако это не всегда так.

Часто необходимость заполнения UHAND-4 связана с переходом на другую систему налогообложения.Затем на титульном листе необходимо указать дату этого перехода. После того, как заявка обработана налоговой, режим eNVD останавливает указанную дату.

Еще одна причина — превышение лимитов лимитов ИП по единому налогу. В этом случае также предполагается переход на другую систему, однако в процессе заполнения формы вы увидите, что эти причины имеют разные коды.

Особенности наполнения

Сроки и особенности подачи

Заявление на бланк УНВД-4 подается в тот же орган, что и ЭНВД-2 (о регистрации ИП в качестве плательщика единого налога на вмененный доход).По общим правилам следует уведомить налоговую в течение 5 дней после прекращения деятельности. Если даты не выдерживались, датой будет последний день месяца, в котором оформляется форма.

При переходе на другую систему налогообложения (код 2) указывается дата регистрации в качестве плательщика УНН или другого налога.

Когда форма ЭНВД-4 не нужна

Единственный случай, когда форма УНВД-4 не нужна — закрытие предприятия по единому налогу на вмененный доход.Надо будет залить ENVD-3. Во всех остальных случаях, когда предприниматель решает отказаться от спец, следует заполнить и передать заявку, так как вывод из ИВП не происходит автоматически. Отсутствие отчетности может привести только к возникновению и дальнейшему увеличению штрафа.

Иллюстрация: Ирина Григорьева / Clerk.ru

С 1 января многие организации и ИП лишатся права применять ENVD и им пора подумать, как снять с учета и перейти на другую систему налогообложения.

Кто не сможет пользоваться ENVD и PSN с 2020 года, вы можете узнать из материала

Для выявления из бухгалтерского учета налогоплательщиком UTID необходимо подать в акте налоговой инспекции. Его необходимо передать в налог, если организация или ИП зарегистрированы как плательщик ЕНВД и где сдаются декларации. Если таких налогов несколько (например, несколько торговых точек в разных городах), заявление в каждый налог подается по месту регистрации.

Организации заполняются формой ENVD-3, а форма UNVD-4 предназначена для IP. Разницы между ними практически нет, принцип наполнения одинаковый.

На что следует обратить внимание в первую очередь — указать причину снятия с учета. Форма предусматривает четыре основания:

1 - при прекращении предпринимательской деятельности налогооблагаемый налог на добавленную прибыль;
2 — с переходом на другой режим налогообложения;
3 — с нарушением требований, установленных подпунктом 1 пункта 2.2 статьи 346.26 Налогового кодекса Российской Федерации;
4 — прочие.

Если организация и IP прекращают деятельность, на которой использовался UNVD, на территории этого налога, то в выписке указывается цифра 1. Если после выхода из UTID произойдет еще один переход на USN, то лучше укажите цифру 2, и при этом следует помнить, что на УСН это возможно только с 1 января и необходимо подать уведомление о переходе не позднее 31 декабря.

Цифра 4 отображается только при удалении одного объекта из аккаунта, а не нескольких. Например, одна торговая точка закрыта, остальные продолжают работать в налоговой сфере, где зарегистрирован налогоплательщик. Или прекратил одно из действий, подпадающих под действие импланта. При этом в заявку заполняется выписка, в которой обязательно указывается код активности (от заявки к заказу) и адрес осуществления мероприятий.

Помните, ошибочное указание цифры 4 в выписке приводит к тому, что налогоплательщик ЕНВД не снимается с учета!

Для выявления со счета как плательщика ЕНВД с 1 января 2020 года необходимо подать выписку не позднее 10 января.

Если в заявлении об исключении из учета стоит цифра 1 — «в связи с прекращением предпринимательской деятельности», налоговый орган снимет все торговые точки (по всем адресам), по которым у налогоплательщика состоит бухгалтерия в данном налоговом органе в качестве плательщика ЕНВД. В этом случае в течение пяти дней со дня поступления заявления налоговый орган направляет ему уведомление об исключении его из бухгалтерского учета. Если в качестве причины указано число 4, уведомление не выдается.

Заявки на ENVD-3 и UNVD-4 можно отправлять как через ТКС, так и через Почту России (ценное письмо с описанием вложения). Также их можно предоставить лично в налоговых органах. Не забывайте, что если заявление на ИП будет принимать представитель, то он должен иметь нотариально заверенную доверенность.

Образец декларации о снятии с учета ЭНВД-4

Законодательство для предпринимателей предусматривает несколько типов льготных налоговых режимов, к которым относится ENVD.Все они используются добровольно. Поэтому ИП в целях снижения налоговой нагрузки Периодически меняйте налоговые системы. Кроме того, из-за грядущей отмены UNVD (2018) многие предприниматели постепенно покидают его.

IP может перестать использовать смену по следующим причинам:

В UNVD больше нет информации о деятельности.
Закрывает ИП.
Критерии использования этого режима нарушены.
Изменить режим налогообложения.

НК РФ устанавливает, что предприниматель должен в течение пяти дней направить заявление об удалении, если он перестанет использовать этот режим.Для этого документа приказом устанавливается специальная форма УНВД. 4. Для его заполнения вы можете использовать интернет-сервисы, программы отчетности. ИП также может приобрести бланк ENVD-4 в типографии или распечатать его с компьютера и заполнить прямо из рук.

Следствие ENVD IP направляется в налоговую по месту, где деятельность осуществляется лично, через доверительного управляющего. Форма AVD-4 возможна по почте или по электронным каналам связи.

Прекращение использования смены начинается с даты, указанной в документе, с последнего дня месяца, в котором имело место нарушение требований использования ЕНВД, момента перехода на новый режим.

IP должен помнить, что в некоторых случаях изменение ENVD на другой предпочтительный режим (например,) может производиться в конце года. Если это будет осуществляться во время нее, то, скорее всего, предприниматель будет вынужден применить общесистемное налогообложение. Поэтому решение о переходе целесообразно отложить до конца года.

IFSN после принятия заявки в форме UNVD-4 в течение пяти дней должен произвести снятие ИП в качестве налогоплательщика на смену и направить ему уведомление в письменной форме.

Если предприниматель работал в этом режиме в нескольких муниципалитетах, то отчеты необходимо подавать в каждый IFX по видам деятельности. Кроме того, если IP полностью решил не использовать ENVD и применил его для двух или более действий, в приложении необходимо указать их все.

Образец заливки ЭНВД-4

Вверху документа указывается трактирщик из 12 знаков. Чуть ниже, в правой части листа под номером формы умещается 4-значный код налоговой службы, в которую отправляется заявление.

Далее нужно указать причину, по которой предприниматель снимается с аккаунта на УНВД:

Код «1» устанавливается, если он полностью прекращает любую предпринимательскую деятельность.
Код «2» — если он собирается перейти в использование другой системы налогообложения.
Код «3» используется, если в процессе проведения работ были нарушены условия использования рукавной системы — количество наемных рабочих превысило 100 человек.
Код «4» — в остальных случаях, например, если предприниматель продолжит работу, но закрывает тот вид деятельности, на котором использовался УНВД.

После этого необходимо без сокращений указать F.I.O. Все пустые ячейки в этом поле выдвигаются вперед.

В следующей строке помещается код ОГРНИП. После проставляется дата, с которой предприниматель хочет раскрыться со счета.

Под ним нужно указать количество листов приложений, с действиями по декодированию. Кроме того, если заявление в налоговый орган подано доверенным лицом, то необходимо указать, на скольких листах приложены документы, подтверждающие его права.

В следующем блоке, который разделен на две части, предприниматель вводит данные только слева. В нем указано, кто отправляет заполненную форму — сам предприниматель (код «1») или его представитель (код «2»). Во втором случае необходимо ввести полное имя. и ИНН. Затем записывается номер контактного телефона, ставится подпись и дата заполнения. Если документ подает представитель, то необходимо указать наименование документа, подтверждающего его права.Во всех пустых ячейках обязательно ставить знак «-».

На листе заявки вы можете ввести три кода активности, для которых происходит снятие с учета. Если таких видов больше — можно использовать дополнительные страницы.

Каждому нужно ввести и полный адрес, по которому она велась. Все пустые клетки во всех блоках стреляют. В конце страницы необходимо поставить подпись, подтверждающую правильность данных, указанных в документе.

Выберите заголовок 1.Предпринимательское право (239) 1.1. Инструкция по открытию бизнеса (26) 1.2. Открытие СП (29) 1.3. Изменения в Eagle (4) 1.4. Закрытие СП (5) 1.5. ООО (39) 1.5.1. Открытие ООО (27) 1.5.2. Изменения в ООО (6) 1.5.3. Ликвидация ООО (5) 1.6. ОКВЭД (31) 1.7. Лицензирование предпринимательской деятельности (13) 1.8. Кассовая дисциплина и учет (69) 1.8.1. Расчет заработной платы (3) 1.8.2. Декальные платы (7) 1.8.3. Пособие по временной нетрудоспособности (11) 1.8.4. Общие вопросы Аккаунты (8) 1.8.5. Опись (13) 1.8.6. Кассовая дисциплина (13) 1.9. Бизнес-чеки (19) 10. Онлайн-кассы (15) 2. Предпринимательство и налоги (450) 2.1. Общие налоговые вопросы (29) 2.10. Налог на прибыль (26) 2.2. УСН (50) 2.3. ENVD (47) 2.3.1. Коэффициент K2 (2) 2.4. Снаружи (37) 2.4.1. НДС (18) 2.4.2. НДФЛ (8) 2.5. Патентная система (26) 2.6. Торговые комиссии (8) 2.7. Страховые взносы (69) 2.7.1. Внебюджетные средства (9) 2.8. Отчетность (87) 2.9. Налоговые льготы (71) 3. Полезные программы и услуги (40) 3.1. Налогоплательщик Юл (9) 3.2. Налог на услуги RU (12) 3.3. Услуги пенсионной отчетности (4) 3.4. Бизнес Пак (1) 3.5. Онлайн калькуляторы (3) 3.6. Онлайн (1) 4. Государственная поддержка малого бизнеса (6) 5. Персонал (105) 5.1. Отпуск (7) 5.10 Заработная плата (6) 5.2. Преимущества декалей (2) 5.3. Отпуск по болезни (7) 5.4. Увольнение (11) 5.5. Общие (23) 5.6. Локальные акты и кадровые документы (8) 5.7. Охрана труда (9) 5.8. Прием работы (3) 5.9. Иностранный персонал (1) 6. Договорные отношения (34) 6.1. Банк договоров (15) 6.2. Заключение договора (9) 6.3. Дополнительные соглашения к Соглашению (2) 6.4. Расторжение договора (5) 6.5. Требования (3) 7. Законодательная база (37) 7.1. Разъяснения Минфина России и ФНС России (15) 7.1.1. Деятельность по ДООНВР (1) 7.2. Законы и подкоммерческие акты (12) 7.3. ГОСТ и технические изменения (10) 8. Формы документов (82) 8.1. Исходные документы (35) 8.2. Объявления (25) 8.3. Доверенность (5) 8.4. Формы отчетности (12) 8.5. Решения и протоколы (2) 8.6. ООО «Чартерс» (3) 9. Разное (26) 9.1. Новости (5) 9.2. Крым (5) 9.3. Кредитование (2) 9.4. Судебные споры (5)

Как снять обременение с дома, купленного на материнский капитал

Одним из направлений использования средств материнского капитала является улучшение жилищных условий. Деньги сертификата можно использовать для оплаты ипотеки или первоначального взноса. Но квартира, купленная на матке, считается обремененной до тех пор, пока не будут выполнены все обязательства перед банком.

Для многих семей ипотечное кредитование — единственный способ приобрести собственное жилье.При рождении второго (и последующих детей) ребенка российская семья в соответствии с законом получает сертификат на материнский (семейный) капитал, дающий право на материальную помощь государства. В 2018 году его размер составляет 453026 рублей. Фонды материнства могут быть использованы на улучшение жилищных условий, в том числе на приобретение жилья на условиях ипотечного кредитования. Если у вас недостаточно собственных денег для покупки квартиры или дома, вы можете использовать сертификат для оплаты ипотеки или ее первоначального взноса.В этом случае жилье, приобретенное на условиях ипотеки, будет иметь статус «обремененного» до тех пор, пока заемщик окончательно не оплатит банк.

Информация о том, что приобретаемое имущество находится в залоге, находится в Едином государственном реестре регистрации имущественных прав, где делается соответствующая запись. Как только ипотечный кредит будет погашен, необходимо решить вопрос о снятии обремененных квадратных метров. Теоретически выплата ипотеки является основанием для снятия обременения.Но владельцу необходимо внести изменения в EDRR и получить новую выписку.

Для этого необходимо предоставить соответствующие документы в Росреестр

заявление о снятии обременения с имущества,
справка банка или иной кредитной организации, выдавшей ипотечный кредит, о погашении ипотечной ссуды;
договор о предоставлении ипотеки, заключенный с финансовым учреждением
копия залога недвижимого имущества,
документ, удостоверяющий личность гражданина — паспорт
документы, по которым возникли права на объект недвижимости (договор купли-продажи или договор участия),
квитанция об уплате госпошлины за внесение изменений в кадастровый регистр и сбора за выдачу новой выписки из ЕГРП,

Если снятие сбора производится в судебном порядке, к решению суда прилагается вышеуказанные документы.

Перечень документов, прилагаемых к заявлению, зависит от специфики кредитных и иных имущественных отношений в рамках приобретаемого имущества.

Если собственников несколько, то заявки должны подавать все, кто имеет долю в этом имуществе. Заявление на несовершеннолетних детей могут подать родители или законные представители.

Для подачи документов на снятие обременений с недвижимого имущества необходимо обратиться в отдел Федеральной регистрационной службы или МФЦ «Мои документы» по месту жительства.

Банк предоставляет клиентам Сбербанка упрощенную и к тому же бесплатную процедуру снятия обременений. Для его выполнения заемщику необходимо обратиться в отделение банка и, предоставив паспорт и кредитный договор, подать заявку. В течение недели Сбербанк подготовит и отправит в МФЦ по месту жительства заемщика сообщение о готовности документов для прохождения процедуры. После этого клиенту (собственнику недвижимости) необходимо обратиться в Многофункциональный центр или в региональное управление Росреестра для подачи заявления о снятии бремени.

Иногда возникают ситуации, когда собственник жилища (заемщик) не может пройти по инстанциям для подачи документов. В этом случае он может доверить это адвокату, которому необходимо предварительно оформить доверенность и заверить ее у нотариуса.

При покупке дома без участия банка продавец должен подать заявление о снятии сбора в регистрационную палату (государственный регистратор в Федеральной регистрационной службе). Он подписывает заявление в присутствии регистратора.Если у продавца нет возможности самостоятельно связаться с Росреестром, он должен заверить подпись на заявлении нотариусу и отправить в Росреестр, в том числе заказным письмом.

(PDF) Описание механизмов активного транспорта свободных жирных кислот и антибиотиков у Synechocystis sp. PCC 6803

Диего, Калифорния). Кривая нелинейной регрессии с использованием логарифма

(химическая концентрация) в сравнении с концентрацией клеток в 4-параметрической модели наклона

с 4 параметрами была использована для идентификации

, IC

, а также 95% доверительных интервалов что концентрация

.Для сравнения общей концентрации FFA

штаммов использовали тест Манна-Уитни. Для определения

разницы в скорости роста штаммов использовали однофакторный дисперсионный анализ

, в котором каждая временная точка рассматривалась как

и сравнивался соответствующий результат. Различия составляли

считались значимыми при значении P <0,05. * p <0,05,

** p <0,005, *** p <0,0005, **** <0,0001.

Дополнительный файл

Дополнительный файл 1: Рисунок S1.Гель для электрофореза, отображающий

фрагментов ДНК, созданных с помощью ОТ-ПЦР (A) генов acrA и acrB E. coli и (B)

Synechocystis sp. PCC6803 ген petB. Рисунок S2. Оптическая плотность

измерения на длине волны 730 нм каждые 24 часа в течение 168 часов (A) SD277

и его мутантных и комплементарных производных, (B) SD100 и его mu-

танта и производных комплементации, (C) SD277 и его добавление плазмиды

производных и (D) SD100 и его производные присоединения плазмиды.Условия куль- 100 мл / мин, а концентрация CO

была нормальной атмосферной концентрацией

. Рисунок S3. Гель для электрофореза, отображающий фрагменты ДНК

, созданные с помощью ПЦР с использованием праймеров любых концевых фрагментов sll0180 в

(A) SD100, SD100 Δsll0180, SD100 Δsll0180 pSacrA и (B) SD277, SD277

Δsll ΔrГель для электрофореза, отображающий фрагменты

ДНК, созданные с помощью ПЦР, с использованием праймеров для обоих концевых фрагментов

slr2131 в (C) SD100, SD100 Δslr2131, SD100 Δslr2131 pacrB, SD277, SD277

Δslr2131. Гель для электрофореза, отображающий

фрагментов ДНК, созданных с помощью ПЦР с использованием праймеров области в пределах

slr2131 в (D) SD100, SD100 Δslr2131, SD100 Δslr2131 pacrB, SD277, SD277

Δslr2131, SDR2131, SDR2131 и SDR2131(DOCX 6501 kb)

Сокращения

ABC: АТФ-связывающая кассета; Amp: ампициллин; См: Хлорамфеникол; FFA: свободная жирная кислота

; ГХ: газовый хроматограф; IC

: Половинная максимальная ингибирующая концентрация

; Кан: канамицин; LB: бульон лизогени; MFP: мембранный слитый белок

; OD: оптическая плотность; ПЦР: полимеразная цепная реакция; RT-

ПЦР: обратная транскриптаза-полимеразная цепная реакция; SDS: додецилсульфат натрия

; Spc: Спектиномцин; Улица: Стрептомицин; TES: N- [трис (гидроксиметил)

метил] -2-аминоэтансульфоновая кислота

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Dr.Susan Bellefleur и Alexandria Voigt Bellefleur

за помощь в редактировании рукописи.

Финансирование

Это исследование было поддержано Университетом штата Аризона за счет финансирования

Роя Кертисса и гранта на открытие стартапа Университета Флориды для профессора Роя

Кертисс, III.

Доступность данных и материалов

Наборы данных, использованные и проанализированные для текущего исследования, можно получить у автора-корреспондента

по разумному запросу.

Вклад авторов

MPAB, SYW и RCIII разработали это исследование. MPAB и SYW создали праймеры, плазмиды

и штаммы. MPAB выполнил все эксперименты и создал все

рисунков и таблиц. MPAB, SYW и RCIII проанализировали все данные.

MPAB, SYW и RCIII написали и отредактировали статью. MPAB, SYW и RCIII

прочитали и утвердили окончательную рукопись.

Одобрение этических норм и согласие на участие

Не применимо.

Согласие на публикацию

Не применимо.

Конкурирующие интересы

RCIII является основателем, совладельцем и членом Совета директоров

Curtiss Healthcare, Inc., начинающей биотехнологической компании в Гейнсвилле, Флорида, для разработки и продажи вакцин против болезней. сельскохозяйственных животных. Компания

имеет эксклюзивные лицензии на изобретения и патенты, относящиеся к технологии вакцин —

технологий, поданных в качестве преподавателя Вашингтонского университета в Санкт-Петербурге.Louis, Ari-

Государственный университет Зоны и Университет Флориды. В то время как RCIII с сотрудниками

изобрели два патента США на производство и извлечение биотоплива

из цианобактерий, эти изобретения были переданы ASU, и RCIII

больше не занимается этим направлением исследований. MPAB и SYW не имеют конкурирующих интересов

Примечание издателя

Springer Nature сохраняет нейтралитет в отношении юрисдикционных претензий на опубликованных картах

и институциональной принадлежности.

Получено: 5 октября 2018 г. Принято: 2 января 2019 г.

Источники

1. Stanier RY, Kunisawa R, Mandel M, Cohen-Bazire G. Очистка и свойства

одноклеточных сине-зеленых водорослей (порядок Chroococcales). Бактериол

Ред. 1971; 35: 171–205.

2. Канеко Т., Сато С., Котани Х., Танака А., Асамизу Э., Накамура Ю. и др.

Анализ последовательности генома одноклеточной цианобактерии

Synechocystis sp., Штамм PCC 6803.II. Определение последовательности всего генома

и определение потенциальных областей, кодирующих белок. ДНК Res.

1996; 3: 109–36.

3. Григорьева Г., Шестаков С. Трансформация цианобактерий

Synechocystis sp. 6803. FEMS Microbiol Lett. 1982; 13: 367–70.

4. Marraccini P, Bulteau S, Cassier-Chauvat C, Mermet-Bouvier P, Chauvat F. Конъюгативный плазмидный вектор

для анализа промотора в нескольких цианобактериях

родов Synechococcus и Synechocystis.Завод Мол Биол. 1993; 23: 905–9.

5. Гао З., Чжао Х., Ли З., Тан X. Лу X. фотосинтетическое производство этанола из

углекислого газа в генно-инженерных цианобактериях. Energy Environ Sci.

2012; 5: 9857–65.

6. Чжоу Дж., Чжан Х., Чжан Ю., Ли Й, Ма Ю. Разработка и создание модульного пути синтеза

в цианобактериях Synechocystis позволяет производить

ацетона из углекислого газа. Metab Eng. 2012; 14: 394–400.

7.Ван Б., Пью С., Нильсен Д.Р., Чжан В., Мелдрам Д.Р. Разработка

цианобактерий для фотосинтетического производства 3-гидроксибутирата непосредственно

из CO

. Metab Eng. 2013; 16: 68–77.

8. Лю X, Шэн Дж, Curtiss IIIR. Производство жирных кислот у генетически модифицированных цианобактерий

. Proc Natl Acad Sci. 2011; 108: 6899–904.

9. Като Х., Хагино Н., Огава Т. Железосвязывающая активность субъединицы FutA1 транспортера железа

ABC-типа в цианобактериях Synechocystis sp. Штамм PCC

6803.Physiol растительной клетки. 2001; 42: 823–7.

10. Коропаткин Н., Рэндич А.М., Бхаттачарья-Пакраси М., Пакраси Х.Б., Смит Т.Дж.

Структура железосвязывающего белка FutA1 из Synechocystis 6803. J

Biol Chem. 2007. 282: 27468–77.

11. Бадарау А., Фирбанк С.Дж., Уолдрон К.Дж., Янагисава С., Робинсон Н.Дж., Банфилд М.Дж.,

et al. FutA2 представляет собой белок, связывающий железо из Synechocystis PCC 6803. J Biol

Chem. 2008. 283: 12520–7.

12. Suzuki S, Ferjani A, Suzuki I, Murata N.Двухкомпонентная система SphS-SphR

является эксклюзивным датчиком для индукции экспрессии генов в ответе

на ограничение фосфата у Synechocystis. J Biol Chem. 2004; 279:

13234–40.

13. Питт Ф. Д., Мазард С., Хамфрис Л., Сканлан Д. Д.. Функциональная характеристика кластеров генов

Synechocystis sp. PCC 6803 Pst1 и Pst2 раскрывает новую стратегию

для поглощения фосфата пресноводными цианобактериями. J Bacteriol.

2010; 192: 3512–23.

14. Агарвал Р., Захаров С., Хасан С.С., Райан С.М., Уайтлегдж Дж. П., Крамер В. А..

Структура-функция белка внешней мембраны цианобактерий, Slr1270:

гомолог белка экспорта лекарств Escherichia coli / импорта колицина, TolC. FEBS

Lett. 2014; 588: 3793–801.

15. Оливейра П., Мартинс Н.М., Сантос М., Пинто Ф., Бюттель З., Коуто NAS и др.

универсальный TolC-подобный Slr1270 в цианобактериях Synechocystis sp PCC 6803.

Environ Microbiol.2016; 18: 486–502.

Bellefleur et al. BMC Biotechnology (2019) 19: 5 Стр. 16 из 17

Содержимое любезно предоставлено Springer Nature, применяются условия использования. Права защищены.

наиболее частых вопросов Заявление о расторжении ENVD SP

Для закрытия индивидуального предпринимателя, который облагается вмененным налогом, необходимо сначала подать заявление в инспекцию Федеральной налоговой службы об исключении предпринимателя из реестра как плательщика вмененного налога.Поскольку автоматический вывод с ЕНВД не предусмотрен действующим законодательством РФ.

Снятие с учета ЕНВД: при подаче заявления

Заявление о снятии с учета индивидуального предпринимателя в качестве плательщика ЕНВД подается в налоговую инспекцию, в которой предприниматель ранее был зарегистрирован и которая выдала уведомление о применении данного особого режима (п. 2 п. 3 ст. 346.28 Налогового кодекса РФ).

Ведь регистрация в качестве ИП и плательщика ЕНВД может производиться в разных проверках. Общая регистрация индивидуального предпринимателя осуществляется в Инспекции Федеральной налоговой службы по месту жительства (ст. 22.1 Закона от 08.08.2001 № 129-ФЗ), а регистрация при подаче заявления на ЕНВД — по месту жительства. место ведения хозяйственной деятельности (п. 2 ст. 346.28 Налогового кодекса РФ).

И только в том случае, если предприниматель занимается перевозкой пассажиров или товаров, либо доставкой, либо розничной торговлей, либо размещением рекламы на транспортных средствах и внутри них, его регистрация при переходе на ЕНВД будет осуществляться в Федеральном Инспекция налоговой службы по месту жительства (п.2 ст. 346.28 НК РФ) …

Снятие с учета ЕНВД: сроки подачи заявления

Необходимо подать заявление в ИФНС о снятии с учета в качестве плательщика вмененного налога. в строго оговоренные сроки — в течение 5 рабочих дней с даты прекращения деятельности, облагаемой ЕНВД (п. 3 ст. 346.28 Налогового кодекса РФ).

Налоговая инспекция в течение 5 дней с момента получения заявления снимает с учета плательщика ЕНВД и направляет предпринимателю соответствующее уведомление.Датой снятия с учета ЕНВД будет дата, указанная в заявлении об окончании деятельности, облагаемой вмененным налогом (

Шаг 4. Подать заявку

Организация, изъявившая желание перейти на оплату ЕНВД, в течение пяти дней с даты начала применения указанной системы налогообложения, заявление о постановке на учет по форме ЕНВД-1 в налоговую инспекцию по адресу: место ведения бизнеса.

Дается 5 дней со дня начала применения этой системы налогообложения.

Снятие с учета организации при прекращении предпринимательской деятельности, подлежащей налогообложению ЕНВД, переходу на иной налоговый режим, в том числе в случае нарушения налогоплательщиком требований, установленных подпунктами 1 и 2 пункта 2.2 статьи 346.26 Налогового кодекса Российской Федерации, осуществляется на основании заявления о снятии с учета в качестве налогоплательщика ЕНВД по форме № ЕНВД-3, поданного в налоговый орган в течение пяти дней с даты прекращения хозяйственной деятельности по единому налогу, или со дня перехода на другой налоговый режим или с последнего числа месяца налогового периода, в котором допущены нарушения установленных требований.

При прекращении предпринимательской деятельности на ЕНВД или переходе на другой налоговый режим (в том числе в случае нарушения требований подпунктов 1 и 2 пункта 2.2 статьи 346.26 Налогового кодекса) необходимо снять с учета плательщика ЕНВД. Для этого в налоговый орган необходимо подать заявление по форме ЕНВД-3.

Это необходимо сделать в течение 5 дней:

с даты прекращения предпринимательской деятельности на ЕНВД или перехода на другой налоговый режим;
с последнего числа месяца налогового периода, в котором нарушены требования пп.1 и 2 п. 2.2 ст. 346.26 Налогового кодекса.

В настоящее время плательщики ЕНВД не обязаны сообщать в налоговый орган по месту регистрации об изменении ранее представленной информации о видах и местах деятельности. При этом налогоплательщик вправе сообщить в налоговый орган о таких изменениях, используя форму заявления о постановке на учет / заявление о снятии с учета.

В настоящее время не установлена обязанность налогоплательщиков ЕНВД сообщать в налоговый орган по месту регистрации об изменении ранее представленных сведений о видах деятельности и местах их осуществления.При этом налогоплательщик вправе сообщить в налоговый орган об указанных изменениях, используя Форму Заявления на регистрацию (Заявление на снятие с учета).

Разбираем ситуацию

Организация оказывает бытовые услуги и услуги платной парковки. Несмотря на то, что на ЕНВД переведены оба вида деятельности, каждый из них имеет свой размер базовой доходности, а также свой физический показатель, от которого напрямую зависит размер налога.Это означает, что организация должна отдельно учитывать показатели, необходимые для расчета ЕНВД для платных парковок и ЕНВД для бытовых услуг.

После внесения изменений в Налоговый кодекс использование условного исчисления для всех хозяйствующих субъектов стало добровольным. Теперь переход на вмененный режим разрешен, если организация осуществляет один из видов деятельности из закрытого списка. Если полученные результаты не устраивают администрацию, можно изменить режим вменения.Для этого фирмы подают заявку на вывод из ЕНВД в форме ЕНВД-3.

Закон устанавливает несколько причин, по которым одна может перейти на другую систему.

Эти причины включают:

Компания прекратила осуществлять деятельность, для которой было выбрано применение ЕНВД;
Было решено использовать более благоприятную систему расчета налогов;
Компания перестала соответствовать обязательным критериям для субъектов ЕНВД. Например, количество выросло до более 100 человек.

По любой из этих причин компания обязана составить и подать специальный документ в налоговую. Для организаций законом предусмотрена форма ЕНВД-3. Предприниматели, в свою очередь, предоставляют.

Внимание! Компания обязана предоставить этот документ в течение пяти дней с момента перехода с ЕНВД. В этом случае последним днем использования вменения считается день, указанный в форме, последний день месяца, в котором компания выявила несоблюдение обязательных условий, или дата, с которой был осуществлен добровольный переход. сделали.

Лицо, ответственное за подачу заявления, должно помнить, что некоторые льготы могут применяться только с начала нового календарного года. Эта ситуация включает переход на.

Если такое заявление будет отправлено в налоговую инспекцию в середине года, то с момента подачи до конца года компания будет передана, что повлечет за собой не только увеличение количества и размер налогов, но и количество отчетов.

Вы можете использовать бухгалтерское программное обеспечение и интернет-сервисы для заполнения формы. Вы можете приобрести бланк на принтере или распечатать его пустым, а затем заполнить вручную. В последнем случае это нужно делать только черной ручкой.

buhprofi

Важно! Если компания осуществляет деятельность на ЕНВД сразу в нескольких субъектах страны, то необходимо подать заявление в ФНС каждого из них. Таким же образом, если существует несколько видов деятельности ЕНВД, необходимо будет отменить регистрацию каждого из них.

Каждый налогоплательщик в Российской Федерации, осуществляющий деятельность в качестве частного предпринимателя, имеет право прекратить предпринимательскую деятельность в любое время. Прекращение деятельности индивидуального предпринимателя в 2019 году, применяющего налоговый режим для ЕНВД, обязывает предпринимателя сняться с учета в качестве плательщика данного налога. Это нужно делать своевременно и правильно, чтобы избежать проблем в будущем.

Стандартная процедура закрытия ИП в 2019 году

Особых проблем возникнуть не должно.Рассматриваемая процедура довольно проста. Разберем подробно, как осуществляется прекращение деятельности ИП в 2019 году. Для этого выполните следующие действия:

Нюансы прекращения деятельности ИП с применением налогового режима ЕНВД

Требования по снятию с учета ИП в 2019 году с применением ЕНВД остались прежними. Прекращение деятельности индивидуального предпринимателя, работающего на ЕНВД, происходит на основании заявления установленной формы №ЭНВД-4.

Данное заявление подается в налоговый орган в обязательном порядке в течение пяти дней со дня внесения записи в ЕГРЮЛ о прекращении предпринимательской деятельности.

Налоговый кодекс РФ не устанавливает обязательных сроков подачи декларации и уплаты налогов при закрытии ИП в особых режимах. Однако прекращение деятельности предприятия, работающего на ЕНВД, не влечет списания накопленной задолженности.При закрытии бизнеса налоговая инспекция должна, во-первых, подать «последнюю» декларацию, а во-вторых, обязательно оплатить ЕНВД за последний рабочий квартал. Декларацию ЕНВД можно подать как до подачи заявления по форме ЕНВД-4, так и после окончания налогового периода по общим правилам.

Напомним, что глава 26.3 Налогового кодекса не предусматривает подачи «нулевых» деклараций по ЕНВД.

Особенности закрытия ИП с долгами

При регистрации закрытия индивидуального предпринимателя налоговый орган уведомляет внебюджетные фонды — Пенсионный фонд РФ и ФСС.На основании данных, полученных от налоговых органов, эти органы автоматически снимают с учета индивидуального предпринимателя. Однако невыплаченная задолженность остается, и ее необходимо выплатить даже физическим лицам. В противном случае долги предпринимателя будут взысканы в судебном порядке.

Порядок снятия с учета индивидуального предпринимателя, зарегистрированного в качестве работодателя, немного отличается. Сложность заключается в том, что этим предпринимателям необходимо заранее рассчитать задолженность перед внебюджетными фондами.

Факт официальной регистрации закрытия бизнеса не означает отмены прежних обязательств предпринимателя. Поэтому не рекомендуется откладывать выплату долга кредиторам и бывшим наемным работникам, так как при подаче исков в суд бывший предприниматель рискует потерять все свое имущество.

В заключение необходимо отметить, что после снятия с учета индивидуальному предпринимателю необходимо будет аннулировать учетную запись ИП и провести процедуру снятия с учета кассового аппарата.

Полезные мелочи, которые нужно помнить плательщикам ЕНВД в 2019 году

При официальной регистрации закрытия бизнеса необходимо помнить, что правильно оформленные и своевременно представленные документы гарантируют быстрое завершение процедуры и отсутствие проблем в будущем.

Так, бизнесмены часто ошибаются при заполнении квитанций об уплате госпошлины.

Необходимо помнить, что при уплате комиссии за расторжение ИП в 2019 году необходимо проставить верную БКК.

Также при заполнении налоговой отчетности важно знать, что в 2019 году произошли изменения для индивидуальных предпринимателей, которые имеют возможность уменьшать ЕНВД на страховые взносы,

Изменения коснулись расчета этих взносов. (1 минимальная заработная плата, умноженная на тариф). Фиксированная сумма подлежит оплате до 31 декабря.

В 2019 году не следует забывать, что превышение годового оборота ИП над отметкой 300000 рублей влечет за собой увеличение отчислений в Пенсионный фонд России на 1% от суммы превышения.

Иллюстрация: Ирина Григорьева / Clerk.ru

С 1 января многие организации и индивидуальные предприниматели потеряют право применять ЕНВД и им пора подумать, как снять регистрацию и перейти на другую налоговую систему.

Кто не сможет применять ЕНВД с 2020 года, можно узнать из материала

Для снятия с учета ЕНВД налогоплательщик должен подать заявление в налоговую инспекцию. Его необходимо передать в налоговую инспекцию, в которой организация или индивидуальный предприниматель зарегистрированы плательщиком ЕНВД и где подаются декларации.Если таких налоговых органов несколько (например, несколько отделений в разных городах), то заявление подается в каждую налоговую службу по месту регистрации.

Организации заполняют форму ENVD-3, форма ENVD-4 предназначена для индивидуальных предпринимателей. Разницы между ними практически нет, принцип наполнения одинаковый.

На что нужно обратить внимание в первую очередь — указать причину снятия с учета. В форме четыре базы:

1 - при прекращении предпринимательской деятельности, облагаемой единым налогом на вмененный доход;
2 — с переходом на другой налоговый режим;
3 — с нарушением требований, установленных подпунктом 1 пункта 2.2 статьи 346.26 Налогового кодекса Российской Федерации;
4 — иначе.

Если организация и индивидуальный предприниматель прекращают деятельность, по которой применялся ЕНВД, на территории данной налоговой инспекции, то в заявлении указывается цифра 1. Если после выхода из ЕНВД все же будет переход на упрощенную систему налогообложения, то лучше указать цифру 2, при этом не забыть включить упрощенную систему налогообложения можно только с 1 января и необходимо подать уведомление о переходе. не позднее 31 декабря.

Цифра 4 указывается только при удалении из реестра одного объекта, а не нескольких. Например, закрылась одна торговая точка, остальные продолжают работать на территории налоговой инспекции, где зарегистрирован налогоплательщик. Или прекратилось одно из действий, подпадающих под вменение. В этом случае заполняется приложение к заявке, в котором должен быть указан код вида деятельности (из приложения к приказу) и адрес места нахождения.

Помните, ошибочное указание цифры 4 в заявке приводит к тому, что налогоплательщик ЕНВД не снимается с реестра!

Для отмены регистрации в качестве плательщика ЕНВД с 1 января 2020 г. заявки должны быть поданы не позднее 10 января.

Если в заявлении о причине снятия с учета указан номер 1 — «в связи с прекращением деятельности», налоговый орган снимет с учета все торговые точки (по всем адресам), по которым налогоплательщик зарегистрирован в этом налоговом органе как ЕНВД. плательщик. В этом случае в течение пяти дней со дня поступления заявления налоговый орган отправляет ему уведомление о снятии с учета. Если в качестве причины указано число 4, уведомление не будет.

Заявки ENVD-3 и ENVD-4 могут быть отправлены как через ТКС, так и через Почту России (ценным письмом со списком приложений).Их также можно подать в налоговые органы лично. Не забывайте, что если представитель будет подавать заявку на индивидуального предпринимателя, он должен иметь нотариально заверенную доверенность.

Образец заявления о снятии с учета ЕНВД-4

Если вы не подавали отчеты по ENVD. Законно ли требовать выплаты ENVD, если деятельность не осуществлялась

Учитывая, что ЕНВД рассчитывается на основе физического показателя, то по смыслу ЕНВД должна оплачиваться независимо от того, есть активность или нет.А также плательщики ЕНВД, если деятельность не велась, должны сдать налоговую декларацию в обычном порядке — до 20 числа месяца, следующего за отчетным.

Плательщиками ЕНВД считаются предприятия, осуществляющие на территории района или региона, в котором введен ЕНВД, деятельность, подлежащую налогообложению (п. 1 ст. 346.28 Налогового кодекса).

Статья 19 Налогового кодекса гласит, что налогоплательщиками являются предприятия, которые обязаны платить этот налог.

Согласно статье 44 Налогового кодекса обязанность по уплате налога возникает только с момента возникновения обстоятельств, предусматривающих уплату налога, и прекращается с момента возникновения обстоятельств, предусмотренных настоящей статьей.Эти обстоятельства являются началом вашей деятельности, которая подлежит вменению (ст. 346.26 Налогового кодекса).

Исходя из вышеизложенного, по определению ЕНВД включает не просто предприятия, а предприятия, осуществляющие деятельность (п. 1 ст. 346.28 Налогового кодекса). А если нет активности, то нет и ЕНВД (ст. 44 Налогового кодекса). В этом случае вы подаете в налоговую инспекцию за те месяцы, в которых не было активности, нулевую декларацию и письмо произвольной формы с указанием причины (если это необходимо налоговым органам), а также вас вызовут на налоговая служба дает объяснения, но это не так страшно, как кажется на первый взгляд.Лучше прийти и поговорить с инспектором, чем заплатить пару тысяч и не волноваться. Хотя у некоторых общение с налоговыми органами вызывает дикий ужас и им проще платить.

Петербургский юрист

Добрый день,

Исходя из положений гл. 26.3 Налогового кодекса обстоятельством, при котором Кодекс связывает налогоплательщиков с обязанностью по уплате ЕНВД, является фактическое осуществление такими налогоплательщиками в соответствующем налоговом периоде видов хозяйственной деятельности, подпадающих под систему налогообложения в виде ЕНВД, или Другими словами, налогоплательщики имеют соответствующие значения физических показателей, характеризующих их деятельность.В вашем случае никакой деятельности — нет налога.

Но, тем не менее, субъекты хозяйствования, зарегистрированные в налоговых органах в качестве налогоплательщиков ЕНВД, обязаны подавать налоговые декларации по единому налогу вне зависимости от наличия или отсутствия доходов от ведения бизнеса (наличие соответствующих значений физических показателей) в налоговом периоде.

Если в ходе камеральной налоговой проверки «нулевой» декларации ЕНВД обнаружены ошибки в налоговой декларации и (или) несоответствие информации, предоставленной налогоплательщиком, сведениям, имеющимся в налоговом органе и полученным им в ходе Выявляются меры налогового контроля, затем налоговый орган в соответствии со ст.88 Кодекса обязан сообщить об этом налогоплательщику с требованием предоставить необходимые объяснения.

Для расчета платежей по налогу на ЕНВД вы можете воспользоваться бесплатным онлайн-калькулятором прямо на этом сайте.

Что такое ЕНВД

Единый налог на вмененный доход — это особый налоговый режим, который может применяться индивидуальными предпринимателями и организациями в отношении отдельных видов деятельности.

Примечание : в отличие от ГНС, для ЕНВД фактический полученный доход не имеет значения.Налог рассчитывается исходя из размера предполагаемого дохода, который установлен (вменен) государством.

Особенностью ЕНВД, как и любого другого специального режима, является замена основных налогов общей системы налогообложения одним — единым. По вменению не подлежат оплате:

НДФЛ (для индивидуальных предпринимателей).
Налог на прибыль (для организаций).
НДС (без вывоза).
Налог на имущество (за исключением объектов, налоговая база которых определяется их кадастровой стоимостью).

Кто имеет право подавать ЕНВД

Индивидуальные предприниматели и организации, отвечающие определенным условиям, в частности:

Количество сотрудников не превышает 100 человек (указанное ограничение до 31.12.2020 не распространяется на кооперативы и хозяйственные общества, учрежденные потребительским обществом или союзом).
Доля участия других организаций составляет не более 25%, за исключением организаций, уставный капитал которых состоит из взносов общественных организаций инвалидов.

Кто не может подать заявку на ЕНВД

Организации и индивидуальные предприниматели, количество сотрудников которых превышает 100 человек.
Организации, в которых доля участия других организаций не превышает 25%, за исключением ряда организаций, перечисленных в п. 2 п. 2.2 ст. 346.26 Налогового кодекса РФ.
Индивидуальные предприниматели и организации, осуществляющие деятельность по договорам простого товарищества или доверительного управления.
Индивидуальные предприниматели и организации, оказывающие услуги по аренде автозаправочных станций и автозаправочных станций.
Образовательные, медицинские и социальные учреждения, оказывающие услуги общественного питания.
Организации, относящиеся к крупнейшим налогоплательщикам.

Критерии отнесения организации к крупнейшим налогоплательщикам установлены Приказом ФНС России от 16 мая 2007 г. № ММ-3-06 / [email protected] Различают 2 категории крупнейших налогоплательщиков: региональные и федеральные уровни.

К региональным организациям относятся организации, отвечающие следующим условиям:

Объем выручки за год от 2 до 20 млрд руб.
Среднесписочная численность персонала не менее 50 человек человек.
Активы варьируются от 100 млн до 20 млрд рублей. , или общая сумма начисленных налогов и сборов составляет от 75 млн рублей до 1 млрд рублей.

Крупнейшими налогоплательщиками федерального уровня являются организации:

Общая сумма начисленных налогов, из которых не менее 1 млрд рублей Для организаций, оказывающих услуги связи и транспорта, сумма налогов должна превышать 300 млн рублей
Общая сумма доходов превышает 20 млрд руб.

Отдельные критерии установлены для организаций оборонно-промышленного комплекса, стратегических предприятий и обществ.

При наличии лицензии к крупнейшим налогоплательщикам относятся кредитные организации, страховые компании (страхование, перестрахование, взаимное страхование), участники рынка ценных бумаг, страховые брокеры, организации, занимающиеся пенсионным страхованием и безопасностью.

Примечание : организация, применяющая специальные режимы налогообложения, не может быть признана крупнейшим налогоплательщиком.

примечание , законопроект от 2 июня 2016 г. продлил действие ЕНВД до 2021 г. … Впоследствии указанный налоговый режим планируется полностью отменить.

Деятельность, подпадающая под ЕНВД

Классификатор видов деятельности, по которым предусмотрено применение ЕНВД

В каждом муниципальном образовании органы местного самоуправления самостоятельно решают, какие виды деятельности налогоплательщики имеют право перейти на ЕНВД. В связи с этим, в зависимости от тематики, этот список может меняться. Перечень видов деятельности, подлежащих вменению, указывается в нормативном акте органов местного самоуправления.

Примечание : в ряде регионов, например, в Москве, ЕНВД не установлен.

Переход на ЕНВД в 2019 году

Для перехода на ЕНВД необходимо в течение 5 дней , после начала деятельности заполнить заявление в 2-х экземплярах (для организаций — форма ЕНВД-1, для индивидуальных предпринимателей — форма ЕНВД-2) и подать в налоговую.

Заявление подается в ИФНС по месту нахождения , но в случае оказания таких услуг как:

Доставка или доставка розничная торговля.
Размещение рекламы на транспортных средствах.
Оказание автотранспортных услуг по перевозке пассажиров и грузов

Заявление о переходе на ЕНВД, организация должна быть подана по месту нахождения, а индивидуальный предприниматель — по месту жительства.

Если деятельность осуществляется в нескольких местах одного города или района (с одним ОКТМО), то регистрироваться плательщиком ЕНВД в каждой налоговой службе не нужно.

В течение 5 дней после получения заявления налоговая служба должна оформить уведомление, подтверждающее регистрацию индивидуального предпринимателя или организации в качестве плательщика ЕНВД.

Условия перехода на ЕНВД в 2019 году

Количество сотрудников менее 100 человек.
Доля участия других организаций не более 25%.
Организация или индивидуальный предприниматель не принадлежит к лицам, которым запрещено использовать ЕНВД (п.2 п.2.2 ст. 346.26 Налогового кодекса РФ).
ЕНВД.

Расчет налога ЕНВД в 2019 году

Единый налог на вмененный доход за один месяц рассчитывается по следующей формуле:

ЕНДВ = Базовая прибыльность x Физический показатель x K1 x K2 x 15%

Базовая доходность устанавливается государством на единицу физического показателя и зависит от вида предпринимательской деятельности.

Физический показатель каждому виду деятельности свой (как правило, это количество сотрудников, квадратные метры и т. Д.).

Таблица 1. Основные показатели рентабельности и физических показателей по видам деятельности ЕНВД

K1 Коэффициент дефлятора. Его значение на каждый календарный год устанавливается Минэкономразвития России. В 2019 году этот коэффициент составляет К1 = 1,915 .

К2 — поправочный коэффициент.Устанавливается властями муниципальных образований с целью уменьшения размера налога на ЕНВД по отдельным видам деятельности. Узнать его значение можно на официальном сайте Федеральной налоговой службы (вверху сайта выберите свой регион, после чего правовой акт с необходимой информацией появится внизу страницы в разделе «Особенности региональных Законодательство »).

примечание , с 1 октября 2015 года органы местного самоуправления в регионах получили право изменить ставку налога ЕНД.Диапазон значений составляет от 7,5 до 15 процентов в зависимости от категории налогоплательщика и вида предпринимательской деятельности.

Расчет налога ЕНВД за квартал

Для расчета ЕНД за квартал необходимо сложить сумму налогов по месяцам. Вы также можете умножить сумму налога за один месяц на 3. , но только при условии, что физический показатель не изменился в течение квартала (новое значение показателя необходимо учитывать при расчете, начиная с того же месяца, в котором оно изменилось).

Расчет налога ЕНВД за неполный месяц

Для расчета ЕНД менее чем за месяц необходимо сумму налога за весь месяц умножить на количество фактических дней ведения дел в этом месяце и разделить на количество календарных дней в месяце.

Расчет налога на ЕНВД по нескольким видам деятельности

Если у вас несколько видов деятельности , подпадающих под ЕНВД, то налог по каждому из них необходимо рассчитывать отдельно, после чего необходимо прибавить полученные суммы.Если деятельность осуществляется в различных муниципальных образованиях, , то налог необходимо рассчитывать и уплачивать отдельно для каждого ОКТМО.

Как уменьшить налог ЕНВД

Индивидуальные предприниматели без работников могут уменьшить 100% ЕНВД налог в размере фиксированных платежей, уплаченных в налоговом периоде (квартале) за себя. Индивидуальные предприниматели самостоятельно выбирают для себя наиболее удобный график уплаты страховых взносов (главное, чтобы вся сумма была выплачена вовремя в течение календарного года, т.е.е. с 1 января по 31 декабря).
примечание , что в соответствии с Письмом Минфина России от 26 января 2016 г. № 03-11-09 / 2852 истцам разрешено уменьшить налог на страховые взносы, уплаченные в другом квартале, при условии, что они были выплачены до подачи декларации за прошедший отчетный период. Например, индивидуальный предприниматель может снизить налог на 1 квартал по взносам, уплаченным до 20 апреля (крайний срок сдачи отчетности за 1 квартал).
Также, если страховые взносы уплачены за один налоговый период в другом (например, за 4 квартал 2018 года в 1 квартал 2019 года), они также могут быть приняты к уменьшению при исчислении налога за 1 квартал 2019 года. (Письмо от 29 марта 2013 г. № 03-11-09 / 10035).
Индивидуальные предприниматели и организации со штатом можно снизить до 50% налог на сумму уплаченных страховых взносов для сотрудников и фиксированных взносов на себя (ИП).
Примечание : изменения в ст. 346.32 Налогового кодекса Российской Федерации, предоставляющего индивидуальным предпринимателям возможность снизить для себя налог на взносы при наличии наемного персонала, вступил в силу с 1 января 2017 года. До 2017 года индивидуальные предприниматели осуществляют выплаты своим работникам. не имели права снижать для себя налог на страховые взносы.
Ограничение налоговой скидки в размере 50% для ИП распространяется только на те кварталы, в которых у него были работники.
Индивидуальные предприниматели на ЕНВД могут учесть расходы на покупку и установку онлайн-кассы в размере 18 000 руб. при расчете налога.Для получения данной льготы индивидуальному предпринимателю необходимо зарегистрировать онлайн-кассу в период с 1 февраля 2017 года по 1 июля 2019 года, а если индивидуальный предприниматель оказывает услуги общественного питания и ведет розничную торговлю с работниками, то кассовый аппарат должен быть зарегистрирован с 1 февраля 2017 года по 1 июля 2018 года.
примечание о том, что для получения вычета эти расходы не должны ранее учитываться в других системах налогообложения.
Размер пособия — 18 000 рублей за каждую кассу.

Пример расчета налога ЕНВД с уменьшением страховых взносов

Исходные данные

Предположим, что в 2019 ИП Антонов В. предоставлял услуги по ремонту обуви в Балашихе (Московская область).

Базовая доходность 7500 руб.

Физическим показателем услуг по ремонту обуви является количество работающих (включая индивидуальных предпринимателей).В течение года физический показатель не изменился и был равен 2. .

Коэффициент К1 в 2019 году равен 1915 .

Коэффициент К2 для данного вида деятельности в г. Балашиха равен 0,8. .

Ежемесячно ИП Антонов В.М. удержал страховые взносы для своего сотрудника. Все заплатил 86000 руб. (1 квартал: 20000 руб., 2 квартал: 23000 руб., 3 квартал: 22000 руб., 4 квартал: 21000 руб.)

Для себя ИП Антонов В.М. уплачено в 2019 году фиксированных страховых взносов в размере 36 238 руб.

Расчет налогов

Поскольку физический показатель в течение года не менялся, налог в каждом квартале будет рассчитываться одинаково: 7 500 руб. х 2 х 1,915 х 0,8 х 3 мес х 15% = 10 341 руб.

Полученная сумма налога может быть уменьшена на уплаченные страховые взносы за работника и фиксированные взносы за себя, но не более чем на 50% .

Таким образом, ИП Петров В.М. в каждом квартале необходимо будет платить по 5 171 руб. (10 341 руб. X 50%).

Пример расчета ЕНВД ИП без рабочих

Исходные данные

В 2019 году Иванов А.А. оказывала ветеринарные услуги в г. Смоленске.

Базовая доходность по данному виду деятельности составляет 7500 руб.

Физическим показателем ветеринарной службы является количество работающих (включая индивидуальных предпринимателей).В течение года физический показатель не изменился и был равен 1 (собственно СП) .

Коэффициент К1 в 2019 году равен 1915 .

Коэффициент К2 для данного вида деятельности в Смоленске равен 1. .

Ежеквартально Иванов А.А. заплатил страховые взносы за себя. Он заплатил всего руб. 36 238 (9 059,5 руб. Ежеквартально).

Расчет налогов

Поскольку физический показатель в течение года не менялся, налог в каждом квартале будет рассчитываться одинаково: 7 500 руб.x 1 x 1,915 x 1 x 3 мес x 15% = 6 463

руб.

Поскольку размер уплаченных страховых взносов превышает исчисленную сумму налога, ИП Петров В.М. не должны ничего платить в конце квартала (6 463 руб. — 9 059,5 руб. = 0 руб.)

Пример расчета ЕНД для ИП без сотрудников при уплате страховых взносов в другом налоговом периоде

Исходные данные

В 1 квартале 2019 года Сергеев А.А. оказывала услуги по ремонту, обслуживанию и мойке автотранспорта в городе Пушкино Московской области.

Базовая доходность по данному виду деятельности составляет 12000 руб.

Физический показатель — чел. (С учетом индивидуальных предпринимателей) .

Коэффициент К1 в 2019 году равен 1915 .

Коэффициент К2 для данного вида деятельности в г. Пушкино равен 1 .

В 1 квартале 2019 года Сергеев уплатил за себя страховых взносов за 4 квартал 2018 года и 1 квартал 2019 года на общую сумму 17 155.7 руб. (8 096,2 руб. За 4 квартал 2018 г. и 9 059,5 руб. За 1 квартал 2019 г.).

Расчет налога за 1 квартал 2019 года

12000 руб. X 1 x 1,915 x 1 x 3 мес x 15% = руб. 10341

Полученная сумма налога может быть уменьшена на уплаченные вами страховые взносы в полном объеме.

Таким образом, ИП Сергеев А.А. за 1 квартал нужно будет заплатить 1281 рублей (10 341 рубль — 9 059,5).

Сроки уплаты налога на ЕНВД в 2019 году

Налоговый период для ЕНВД составляет квартал.

Сроки оплаты ЕНВД в 2019 году

Примечание : в 2019 году сроки уплаты налога не приходятся на праздничные и выходные дни, и поэтому они не переносятся, а срок уплаты ЕНВД за 4 квартал приходится на выходные (субботу), поэтому переносится на 27 января 2020 года.

Налог необходимо уплачивать ежеквартально вовремя до 25 числа первого месяца следующего квартала.

Налоговый учет и отчетность ЕНД

Учет физических показателей

Все индивидуальные предприниматели и организации ЕНВД обязаны вести учет физических показателей.В какой форме это делать — кодекс не регламентирует, поэтому все так называемые «Книги ЕНВД», которые настойчиво рекомендуют сотрудники налоговой службы, незаконны, … Тем более, если они содержат такие разделы, как « Доходы »,« Расходы »и др.

Однако в любом случае необходимо учитывать физические показатели, поэтому при приемлемой стоимости такой книги (штраф за ее отсутствие от 500 до 700 рублей) ее можно и стоит приобрести. .Но, при этом, важно помнить, что вести нужно только с учетом физических показателей , всю остальную информацию о доходах и расходах вводить туда не нужно.

Налоговая декларация

Налоговый период для ЕНВД составляет квартал.

По результатам каждого квартала , не позднее 20-го первого месяца следующего квартала, все индивидуальные предприниматели и организации на ЕНВД обязаны подавать налоговую декларацию.

Сроки подачи декларации ЕНВД в 2019 году

Примечание : в связи с тем, что крайние сроки подачи декларации ЕНВД на 1, 2 и 3 квартал 2019 года приходятся на выходные (20 апреля и 20 июля — суббота, и 20 октября — воскресенье), они перенесен на первый рабочий день — 22 апреля, 22 июля и 21 октября соответственно.

Бухгалтерский учет и отчетность

Индивидуальные предприниматели, применяющие ЕНВД, не обязаны сдавать финансовую отчетность и вести учет.

Организации на ЕНВД, помимо налоговой декларации и учета физических показателей, обязаны вести бухгалтерский учет и сдавать бухгалтерскую отчетность.

Бухгалтерская отчетность для разных категорий организаций разная. В целом он состоит из следующих документов:

Бухгалтерский баланс (форма 1).
Отчет о финансовых результатах (форма 2).
Отчет об изменениях в капитале (Форма 3).
Отчет о движении денежных средств (форма 4).
Отчет о целевом использовании денежных средств (форма 6).
Пояснения в табличной и текстовой форме.

Подробнее о финансовой отчетности

Кассовая дисциплина

Организации и индивидуальные предприниматели, осуществляющие операции, связанные с приемом, снятием и хранением наличных денег (кассовые операции), должны соблюдать правила кассовой дисциплины.

Узнайте больше о кассовой дисциплине.

примечание , с 2017 года все индивидуальные предприниматели и организации, осуществляющие расчеты с использованием наличных и электронных платежных средств (за некоторыми исключениями), перешли на онлайн-кассы.Для ИП на ЕНВД это нужно будет сделать чуть позже, а именно не позднее 1 июля 2019 года.

Дополнительная отчетность

Объединение ЕНВД с другими налоговыми режимами

Примечание : одновременно заниматься одним и тем же видом деятельности при разных налоговых режимах запрещено … Кроме того, необходимо отдельно для каждой системы налогообложения, вести налоговый учет (имущество, обязательства, хозяйственные операции) , сдавать отчеты и платить налоги.

Раздельный учет ЕНВД

При объединении налоговых режимов необходимо отделить доходов и расходов по ЕНВД от доходов и расходов по прочим видам деятельности. Как правило, сложностей с разделением доходов не возникает. В свою очередь, ситуация с затратами несколько сложнее.

Есть расходы, которые нельзя однозначно отнести ни к ЕНВД, ни к другим видам деятельности, например, заработная плата сотрудников, которые одновременно занимаются всеми видами деятельности (директор, бухгалтер и т.). В таких случаях затраты требуются. разделить на две части пропорционально дохода, полученного методом начисления с начала года.

Утрата права на применение ЕНВД

Организация и индивидуальный предприниматель теряют право применять ЕНВД, если на конец налогового периода (квартала) среднесписочная численность сотрудников превысила 100 человек, а также если доля участия других организаций составила более 25% .

Если организация и индивидуальный предприниматель применяют только ЕНВД, то при утрате права на вменение они автоматически переводятся на общий режим налогообложения с того квартала, в котором были допущены нарушения.

Если наряду с ЕНВД вы используете СТС, то в случае потери права на вменение вы автоматически будете переведены на СТС в качестве основного налогового режима. В этом случае повторная подача заявления о переходе на упрощенную систему налогообложения не требуется.

Переход на другой налоговый режим

Переход с ЕНВД на другой режим налогообложения возможен только со следующего года, за исключением случая, когда индивидуальный предприниматель или организация перестают быть плательщиком вмененного налога.В этом случае плательщик может перейти, скажем, на упрощенную систему налогообложения с месяца прекращения вмененной деятельности.

Снятие с учета ЕНВД

Заявление о снятии с учета необходимо оформить в течение 5 дней с момента прекращения деятельности на ЕНВД в 2-х экземплярах (для организаций — форма ЕНВД-3, для индивидуальных предпринимателей — форма ЕНВД-4) и подать в налоговую. служба.

В течение 5 дней после получения заявления ИФНС должна выдать уведомление об исключении ИП или организации из реестра как плательщика ЕНВД.

Часто задаваемые вопросы по применению ЕНВД

Какая дата начала деятельности на ЕНВД? Дата аренды, дата открытия магазина или дата первого дохода?

Датой начала деятельности является день получения первого дохода. Таким образом, при подаче заявки на переход на ЕНВД отчет необходимо вести с момента получения первого дохода, а не с момента заключения договора аренды или подписания акта приема-передачи помещения.

Есть ли предел дохода для ЕНВД, как, например, по упрощенной системе налогообложения или патенту?

Нет ограничения дохода для ЕНВД. В этом основное отличие ЕНВД от других специальных режимов.

Может ли индивидуальный предприниматель, занимающийся розничной торговлей, заключать договоры с иностранными компаниями?

Налоговый кодекс не устанавливает никаких ограничений на розничную торговлю с иностранными компаниями для применения ЕНВД. При соблюдении условий для данного вида деятельности (а именно розница, а не оптовая торговля) индивидуальный предприниматель вправе осуществлять внешнеэкономическую деятельность, являясь плательщиком ЕНВД.

Вправе ли индивидуальный предприниматель на ЕНВД на оказание услуг по перевозке пассажиров и грузов юридическим лицам?

В соответствии с подпунктом 5 пункта 2 статьи 346.26 Налогового кодекса Российской Федерации система налогообложения в виде единого налога на вмененный доход по отдельным видам деятельности может применяться в отношении предпринимательской деятельности в положении автотранспортных услуг по перевозке пассажиров и грузов, осуществляемых организациями и индивидуальными предпринимателями, имеющими на праве собственности или иного права (пользования, владения и (или) распоряжения) не более 20 транспортных средств, предназначенных для предоставления таких Сервисы.

Под количеством транспортных средств, имеющихся на праве собственности или иного права (владения, пользования и (или) распоряжения), следует понимать количество транспортных средств, но не более 20 единиц, предназначенных для оказания платных услуг по перевозке. пассажиров и грузов, находящихся на балансе налогоплательщиков, либо сданных в аренду (полученных), в том числе по договору аренды и субаренды.

Статья 346.27 Налогового кодекса Российской Федерации определяет, что транспортные средства — это транспортные средства, предназначенные для перевозки пассажиров и грузов автомобильным транспортом (автобусы любого типа, легковые и грузовые автомобили).К транспортным средствам не относятся прицепы, полуприцепы и разборные прицепы.

Отношения при оказании автотранспортных услуг регулируются главой «Транспортные услуги» Гражданского кодекса Российской Федерации (далее — Гражданский кодекс Российской Федерации).

Пункт 1 статьи 784 Гражданского кодекса Российской Федерации устанавливает, что перевозка грузов и пассажиров осуществляется на основании договора перевозки.

Дата публикации: 23.09.2014 15:38 (архив)

Ситуация, ставшая предметом многолетних споров, достаточно обычна на практике и актуальна по сей день: организация или индивидуальный предприниматель временно прекращают свою деятельность, но в будущем намерены снова ею заниматься.Нужно ли в этом случае снимать плательщика ЕНВД с налогового учета или можно подавать нулевые декларации и не платить налог на период приостановки деятельности?

Правила постановки на учет и снятия с учета организаций и индивидуальных предпринимателей как плательщиков ЕНВД в налоговых органах изложены в п. 3 ст. 346.28 Налогового кодекса РФ. Для постановки на учет налогоплательщики должны подать заявление в налоговый орган, а налоговый орган, в свою очередь, должен выдать плательщику уведомление о постановке на учет.Если плательщик ЕНВД прекратил заниматься предпринимательской деятельностью, то он должен подать в налоговый орган заявление о снятии с учета в качестве плательщика ЕНВД. Это необходимо сделать в течение пяти дней с момента прекращения хозяйственной деятельности, подлежащей обложению данным налогом. После получения такого заявления налоговый орган отправляет налогоплательщику уведомление о снятии с учета в течение пяти дней. Следовательно, если налогоплательщик даже временно не вел предпринимательскую деятельность, он должен подать заявление о снятии налогов.При этом глава 26.3 Налогового кодекса РФ не предусматривает подачи нулевых деклараций.

Получается, что если налогоплательщик какое-то время не ведет свою деятельность (например, делает ремонт в помещении магазина), он все равно должен подать декларацию на ЕНВД с указанием физических показателей и расчетом суммы налога, подлежащего уплате в бюджет. . Или он должен быть снят с учета на время ремонта и не платить ЕНВД, а потом снова облагаться налогом.Такая позиция налогового органа объясняется тем, что вмененный доход признается объектом налогообложения ЕНВД. Под ним понимается потенциальный доход налогоплательщика, рассчитываемый с учетом набора условий, непосредственно влияющих на получение указанного дохода, и используемый для расчета стоимости ЕНВД по установленной ставке.

На основании вышеизложенного налоговые органы сделали следующий вывод, который впоследствии был полностью поддержан специалистами Минфина России.Сам по себе факт временного приостановления организацией или индивидуальными предпринимателями их деятельности не снимает статуса плательщика ЕНВД и не освобождает его от возложенных на него обязанностей. Следовательно, если плательщик ЕНВД приостанавливает ведение своей деятельности (например, при отсутствии заказов, длительной болезни и т. Д.), Но у него есть физические показатели, характеризующие вид осуществляемой деятельности (например, есть грузовые автомобили, которые могут использоваться для перевозки грузов), то перед снятием с учета он должен рассчитать ЕНВД, исходя из имеющихся физических показателей (легковые автомобили) и установленной базовой рентабельности в месяц.

Он обязывает налогоплательщиков ЕНВД (ИП, ООО) своевременно сообщать в свою ИФНС. При этом за каждый налоговый период (квартал) обязанные лица должны подавать декларацию до 20 числа месяца, следующего за этим кварталом.

Начиная с 3 квартала 2018 года ФНС РФ рекомендовала использовать новую форму декларации КНД 1152016, которая содержит дополнительный раздел 4. Рекомендуемая форма КНД 1152016 прилагается к письму Федеральной налоговой службы РФ №SD-4-3 / [email protected] от 25.07.2018 и выглядит так.

Обновленный формат документа утвержден Приказом ФНС РФ № ММВ-7-3 / [email protected] от 26.06.2018. Дополнительный раздел предназначен для ввода информации о расчете суммы затрат на приобретение кассового аппарата, уменьшающих ЕНВД.

К сведению, несвоевременная подача декларации признается налоговым правонарушением. ИФНС удерживает с нарушителя 5% от суммы ЕНВД, но не менее 1 тыс. Руб.

Почему нет «нулевых» деклараций по ЕНВД: пояснения с учетом применения норм законодательства

«Вмененный» доход (сокращенно ВД) — это потенциальный, возможный доход, который предполагается получить индивидуальному предпринимателю (ООО ). Именно ВД подлежат налогообложению ЕНВД. Об этом говорится в ст. 346.27 и ст. 346.29 Налогового кодекса РФ. Соответственно, расчет налога основан на вероятном доходе (PD), а не на фактическом доходе, полученном индивидуальным предпринимателем (ООО).

ИФНС обязывает зарегистрированных плательщиков (ИП, ООО) рассчитывать, вносить ЕНВД до снятия с учета. Это означает, что обязанные лица должны рассчитывать ЕНВД, как это принято, с учетом всех доступных показателей (DB, FP, K1, K2, ставки 15%). Далее в установленный срок (до 25-го дня) рассчитанный налог должен быть удержан инспекцией Федеральной налоговой службы.

Из этого следует, что доставка «нулевой» формы отчетности для ЕНВД априори невозможна.Налоговый кодекс РФ этого не предусматривает.

Важно! Факт временной приостановки деятельности не освобождает плательщиков ЕНВД (ИП, ООО) от исчисления, уплаты налога и подачи соответствующей декларации.

ЕНД рассчитывается плательщиками непрерывно, начиная с регистрации в ИФНС и до дня снятия с учета. Сам факт отсутствия активности по этому курсу никак не отражается. Эта позиция подкреплена соответствующей правовой базой.

Действующая правовая база

(отдельные документы)

Краткое описание по теме

Это письмо носит ознакомительный характер.

Это обзор судебной практики с точки зрения практического применения гл. 26.3 Налогового кодекса РФ.

Окончательное заключение по названному документу:

приостановление (некоторое время не ведение деятельности) не освобождает индивидуального предпринимателя (юридического лица) от уплаты ЕНВД и подачи декларации по нему

Определение Высшего Арбитражного Суда РФ №ВАС-1903/14 от 26 февраля 2014 г.

Суть вопроса сводится к следующему:

«Нулевые» декларации по ЕНВД не подаются, так как налог рассчитывается исходя из VD

Важно! Действие Письма ФНС РФ № ШС-22-3 / [email protected] от 27 августа 2009 г. (о законности подачи «нулевых» деклараций на ЕНВД) отменено Письмом Минприроды. Финансы Российской Федерации No.03-11-09 / 17087.

Что необходимо сделать индивидуальному предпринимателю ООО на ЕНВД при прекращении деятельности

Отдельно стоит ситуация, когда плательщик ЕНВД прекратил свою деятельность. Фактически, у него осталось два варианта: уплатить налог, подать налоговую декларацию и далее или отменить регистрацию.

В последнем случае вам просто нужно будет подать заявление о снятии с учета в налоговой инспекции. Это действие является ключевым для индивидуального предпринимателя (ООО).

Основные составляющие процедуры снятия с учета для ИП (ООО)	Краткие пояснения
Формат заявлений на снятие с учета	Для юридических лиц — «ЭНВД-3»; для индивидуальных предпринимателей — «ЭНВД-4». Порядок регламентирован Приказом ФНС РФ № ММВ-7-6 / [email защищен] от 11.12.2012
Сроки обращения в IFTS	До 5 дней, отсчет времени начинается после прекращения активности
Формат уведомлений, которые ФНС выдает заявителям после снятия с учета	Для юридических лиц: №1-5-Бухгалтерия; Для индивидуальных предпринимателей: №2-4-Бухгалтерия Обозначенный формат введен: Приказом ФНС РФ №ЯК-7-6 / [email защищен] от 11.08.2011

После прохождения данной процедуры обязанные лица (ИП, ООО) должны:

подать в инспекцию ФНС декларацию по ЕНВД;
уплатили дополнительный налог за то время, когда были зарегистрированы, но фактически не работали.

Датой снятия с учета признается день утраты статуса плательщика ЕНВД.Эта датировка, как обычно, указывается в заявке. Исходные позиции — а. 3 шт. 3 арт. 346.28 Налогового кодекса РФ.

Пример 1. Нарушение сроков подачи заявления ЕНВД-4: возможные последствия для ИП

ИП по ЕНВД (пошив кожаной одежды). Прекратив деятельность, он окончательно заполняет анкету-заявление ЕНВД-4 и с задержкой в 7 дней подает в ФНС.

В результате выясняется, что срок обращения в ФНС по снятию с учета (5 дней после прекращения работы) не соблюден. Так называемая задержка составила неделю.

Последствия просрочки рассматриваемой ситуации будут следующими:

Индивидуальный предприниматель будет исключен из реестра, но не ранее последнего числа месяца, в котором он обратился в инспекцию Федеральной налоговой службы с заявление.
Датой отмены регистрации также является день окончания этого месяца.
ЕНВД также выплачивается до сегодняшнего дня.

Сам факт того, что ИП раньше перестал работать, ни на что не повлияет.

Типичные ошибки при составлении и сдаче деклараций ЕНВД

Ошибка 1. Организация на ЕНВД, зарегистрированная в налоговом регистре по месту нахождения, не должна подавать декларации в свои обособленные подразделения.Это было бы ошибкой.

Подробные разъяснения по этому поводу даны Федеральной налоговой службой РФ в письме № ГД-4-3 / [email protected] от 17 февраля 2014 года со ссылками на Налоговый кодекс Российской Федерации и соответствующие правила. В частности, выборочно отмечалось:

Установлено, что плательщиком ЕНВД в ИФНС значится именно организация, а не ее структурные составляющие — подразделения. Соответственно, именно она отчитывается в налоговую по месту постановки на учет.

Часто организация регистрируется по месту своего нахождения на территории, которая подчиняется только одной ИФНС. При этом ряд мероприятий он ведет через свои обособленные подразделения. В этой ситуации организация должна подавать одну декларацию по ЕНВД, как того требует Налоговый кодекс РФ, за каждый прошедший квартал.

Государственный советник Российской Федерации 2 класса Д.Ю. Григоренко.

Ошибка 2. При определении пятидневного срока, который устанавливается плательщикам для подачи заявлений по форме «ЕНВД-3» и «ЕНВД-4 (о снятии с учета), обратный отсчет ведется в рабочих днях. При исчислении срока, праздничные дни учитываются выходные дни, а также перенос состоявшихся дней

Пример 2. Дата снятия с учета ООО «Хлеб»

ООО «Хлеб» на ЕНВД осуществляло розничную торговлю хлебобулочными изделиями в г. центральный рынок в городе Н.Для информации, «вмененный» режим на территории города Н. был введен соответствующим решением местных властей.

С 03.11.2018 ООО «Хлеб» прекратило работу. Соответственно, с этой даты продукция перестала продаваться, ранее арендованные места освободились.

В порядке, установленном п. 2 ст. 6.1 НК РФ отсчет пятидневного срока подачи заявления ЕНВД-3 в ИФНС ведется со следующего дня после прекращения работы.В рассматриваемой ситуации по идее обратный отсчет должен начинаться с 04.11.2018. Но сегодня воскресенье, днем. Следовательно, период отсчитывается с понедельника (05.11.2018). Это означает:

Пятидневный период закончится 09.11.2018. Именно эта дата является крайним сроком для подачи заявки в IFTS с целью отмены регистрации ЕНВД.
Фактический день (дата) снятия с учета, который, к вашему сведению, должен быть отмечен в заявлении, — 03.11.2018.

Примечательно, что аналогично рассчитывается пятидневный срок обращения в ИФНС для индивидуального предпринимателя с заявлением ЭНВД-4.

Fc-Engineering для модулированных эффекторных функций — улучшение антител для лечения рака

Abstract

Большинство терапевтических препаратов с моноклональными антителами (mAb) обладают способностью задействовать эффекторы врожденного иммунитета посредством взаимодействий, опосредованных их фрагментарно кристаллизующимся (Fc) доменом.Обеспечивая взаимодействия Fc-Fc гамма-рецептора (FcγR) и Fc-C1q, mAb способны связывать исключительную специфичность с мощными клеточными и опосредованными комплементом эффекторными функциями. Взаимодействия Fc могут также способствовать усиленной кластеризации мишеней, чтобы вызвать мощную передачу сигналов рецептора. Эти наблюдения стимулировали многолетние исследования по определению свойств внутри Fc, которые вызывают эти различные активности, идентификации ключевых аминокислотных остатков и выяснения важной роли гликозилирования. Они также способствовали растущему интересу к Fc-инженерии, посредством чего эти знания используются для модуляции эффекторной функции Fc в соответствии с конкретными механизмами действия и терапевтическими целями.В этом обзоре мы документируем понимание, которое было получено в результате изучения домена Fc; раскрытие основополагающих структурно-функциональных взаимосвязей и того, как Fc был сконструирован для производства растущего числа антител, которые появляются в клинике с расширенными возможностями лечения рака.

Ключевые слова: Fc-инженерия, Fc гамма-рецептор, иммунотерапия антителами, комплемент, антителозависимая клеточная цитотоксичность (ADCC), антителозависимый клеточный фагоцитоз (ADCP)

1.Введение

Антитела — это центральный компонент иммунитета, служащий для предотвращения и контроля распространения патогенов, обеспечивая при этом длительную защиту от повторного заражения. Классически описываемые как молекулы Y-образной формы, антитела содержат два идентичных фрагмента связывания антигена (F (ab)), связанных через шарнир с фрагментом кристаллизующегося (Fc) домена. Плечи F (ab) обеспечивают специфичность и опосредуют связывание антигена-мишени, в то время как Fc облегчает взаимодействие с иммунными эффекторными функциями (т.е.е. клеточный иммунитет через взаимодействие с рецепторами Fc и системой комплемента через связывание с C1q) [1,2,3]. Fc также продлевает период полужизни в кровотоке за счет взаимодействия с FcRn [4]. Кроме того, хотя домены F (ab) могут обеспечивать терапевтическую активность, например, предотвращая событие связывания патоген: хозяин, ведущее к инфекции, большая часть эффекторной функции антитела, особенно IgG1, доставляется Fc.

Эти знания привели к согласованным усилиям в области антител, чтобы понять, какие части Fc регулируют взаимодействие с различными ответвлениями иммунной эффекторной системы и, следовательно, могут ли модификации обеспечивать повышенную активность.В этом обзоре суммируются достижения в этих начинаниях и дается обзор того, где они были или скоро будут, переведены в клинические исследования для лечения рака.

Центральным моментом в продвижении антител в качестве клинических терапевтических средств стала разработка моноклональных антител (mAb) после появления гибридомной технологии [5]. Этот прорыв позволил производить антитела с единственной специфичностью, облегчая одобрение регулирующими органами для использования у людей, а также позволяя структуру: исследования функций гомогенных препаратов антител и анализ посттрансляционных модификаций, таких как гликозилирование [6].За этим последовал взрыв в технологиях молекулярной биологии, которые с тех пор позволили манипулировать молекулами антител до невиданной ранее степени. Вместе эти достижения проложили путь для последующей эры инженерии Fc. В этом отношении антитела, нацеленные на рак, были на переднем крае.

Как обсуждалось выше, основное свойство домена Fc состоит в том, чтобы вызывать иммунную эффекторную функцию посредством взаимодействия с рецепторами Fc и инициатором комплемента, C1q. Хотя в настоящее время в клинику поступают и другие классы антител (см. Другие статьи в этом сборнике), почти все терапевтические антитела, одобренные на сегодняшний день, относятся к классу IgG, и поэтому большая часть нашего нынешнего понимания эффекторной функции антител эволюционировала из их исследования.Ниже (Раздел 1.1, Раздел 1.2 и Раздел 1.3) мы суммируем три критических взаимодействия, которые опосредует Fc IgG при модулировании эффекторной функции и поведения антитела.

1.1. Связывание FcγR, ведущее к клеточным эффекторным функциям

Молекулы IgG связываются с рецепторами Fc-гамма (FcγR). Люди обладают 6 различными FcγR: hFcγRI, hFcγRIIA, hFcγRIIB, hFcγRIIC, hFcγRIIIA и hFcγRIIIB [1,7], которые связывают IgG на поверхности клетки, но с различным сродством. hFcγRI содержит три внеклеточных иммуноглобулиновых домена и является единственным высокоаффинным FcγR, способным связывать мономерный IgG, в то время как другой FcγR содержит два внеклеточных иммуноглобулиновых домена и имеет сродство от низкого до среднего, связывая только IgG в иммунном комплексе или когда он связан с патогеном или клеточная поверхность.

В целом, FcγR функционально можно разделить на два основных типа; активирующий и тормозной. Активирующий FcγR (hFcγRI, hFcγRIIA, hFcγRIIC, hFcγRIIIA) содержат или связаны с иммунным мотивом активации тирозина (ITAM). В двух активирующих рецепторах человека (hFcγRIIA и hFcγRIIC) ITAM содержится во внутрицитоплазматическом домене самого FcγR, тогда как на остальных активирующих рецепторах он содержится в связанной цепи FcRγ. У мышей, которые содержат 4 FcγR, все 3 активирующих FcγR требуют γ-цепи FcR как для экспрессии, так и для передачи сигналов [1,8].FcγRIIB, напротив, содержит иммунный ингибирующий тирозин мотив (ITIM) и является единственным ингибирующим FcγR как у людей, так и у мышей. В дополнение к этим активирующим и ингибирующим FcγR существует один GPI-связанный hFcγR, в котором отсутствуют мотивы ITAM и ITIM, hFcγRIIIB. Его функция менее ясна, с сообщениями о различных поддерживающих его ролях в качестве нейтрального или ложного рецептора, модулирующего FcγRIIA-опосредованную дегрануляцию нейтрофилов и продукцию ROS [9]. FcγRI представляет собой рецептор с высоким сродством к IgG и, как таковой, в значительной степени считается насыщенным IgG в кровотоке [10].Несмотря на данные, свидетельствующие о том, что он способен опосредовать противоопухолевую иммунотерапию на определенных моделях мышей B16, он по-прежнему считается второстепенным игроком в иммунотерапии [11]. Таким образом, было сравнительно мало усилий по созданию антител с измененным связыванием с FcγRI. Несмотря на hFcγRIIIB, общая концепция заключается в том, что когда как активирующий, так и ингибирующий FcγR существуют на данном типе клеток (обычно на миелоидных клетках), тогда относительное связывание IgG с каждым экспрессированным FcγR интегрируется для модуляции клеточного ответа.На практике соотношение активирующего и ингибирующего связывания FcγR A: I в профилях клеточной экспрессии Fc и / или FcγR является хорошей оценкой последующей клеточной активности [12,13], с высокими отношениями A: I, обеспечивающими устойчивые ответы. Одной из ключевых детерминант является изотип антитела, причем каждый изотип обеспечивает разнообразный профиль связывания FcγR и клеточный ответ. Например, hIgG1 прочно связывается с большинством FcγR, а hIgG4 — в гораздо меньшей степени. Семейство FcγR и их изотипические взаимодействия были подробно описаны в другом месте [14], поэтому в этом обзоре выделены только конкретные моменты.

Генетические вариации hFcγR также могут влиять на экспрессию и функцию [15,16]. В частности, определенные однонуклеотидные полиморфизмы (SNP) влияют на связывание с IgG. Примечательно, что SNP валина (V) к фенилаланину (F) в положении 158 влияет на связывание FcγRIIIA с IgG1, IgG2 и, в меньшей степени, с IgG3, в результате чего V158 имеет повышенное сродство к hIgG1 по сравнению с F158, что приводит к повышенной активации [4, 17]. Точно так же SNP гистидина (H) к аргинину (R) в FcγRIIA в положении 131 влияет на связывание с hIgG2 (и в меньшей степени с hIgG1), при этом наблюдается повышенное связывание для h231 по сравнению с R131.

FcγR явно обладают потенциалом влиять на эффективность противораковых антител, особенно за счет активации эффекторных функций Fc, таких как антителозависимая клеточная цитотоксичность (ADCC) и антителозависимый клеточный фагоцитоз (ADCP). Считается, что ADCC в основном опосредуется NK-клетками [18]. NK-клетки связываются с массивом Fc меченных антителами опухолевых клеток, преимущественно через один активирующий FcγR (FcγRIIIA). Связывание IgG с FcγRIIIA может активировать NK-клетки и стимулировать высвобождение литических гранул, содержащих такие молекулы, как перфорин и гранзимы, что в конечном итоге приводит к лизису клетки-мишени [19].Было показано, что многие клинически значимые противораковые антитела, такие как ритуксимаб, герцептин и цетуксимаб, вызывают NK-опосредованную ADCC in vitro.

ADCP опосредуется фагоцитарными клетками, такими как макрофаги, моноциты и нейтрофилы, и запускается, когда антитела взаимодействуют с соответствующими активирующими FcγR [20]. Антитело к CD30, SGN-30, используемое для лечения нескольких гематологических заболеваний, таких как болезнь Ходжкина, является примером противоракового антитела, которое может стимулировать ADCP in vitro [21].Также известно, что ритуксимаб и другие антитела к CD20 вызывают мощный ADCP как in vitro, так и in vivo на различных моделях животных [22,23]. В этих системах удаление макрофагов устраняет всю способность этих антител к делеции мишеней, подчеркивая важность этого Fc-опосредованного эффекторного механизма.

1.2. Вовлечение C1q и индукция эффекторных функций, опосредованных комплементом

Другим важным взаимодействием, опосредованным Fc, является его связывание с первым компонентом комплемента, C1q.Когда достаточное количество молекул Fc взаимодействует с 6 глобулярными головками C1q, он инициирует протеолитический каскад белков комплемента в сыворотке, приводящий к высвобождению анафилатоксинов, таких как C3a и C5a, и образованию комплекса мембранной атаки на поверхности клетки-мишени, способного зависеть от комплемента. цитотоксичность (CDC) [24]. Первоначально доказательства важности CDC в эффекторных функциях противораковых мАт были продемонстрированы в исследованиях in vitro, в которых было обнаружено, что опухолевые клетки сверхэкспрессируют защитные молекулы комплемента, такие как CD55 и CD59; и их блокирование может повысить способность ритуксимаба убивать опухоли [25].Дополнительные данные, свидетельствующие о том, что CDC играет роль в эффективности противораковых антител, включают повышенное потребление компонентов комплемента, когда клетки хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL) лечат ритуксимабом; и сниженная способность сывороток пациентов с ХЛЛ, лишенных комплемента, лизировать клетки-мишени [26]. Ритуксимаб также оказался неэффективным на C1q-дефицитных мышах в экспериментах по ксенотрансплантату с клетками лимфомы человека, предполагая, что активация комплемента необходима для активности делеции опухоли in vivo [27].Однако модели ксенотрансплантатов могут не предсказывать активность комплемента у пациентов, поскольку клетки-мишени могут быть гиперчувствительными к ксенокомплементу [28,29]. Соответственно, эксперименты с сингенными моделями, такими как трансгенные мыши hCD20, продемонстрировали, что антитела против CD20, сконструированные без функции активации комплемента, обладают эквивалентной способностью к истощению В-клеток, как и антитела против CD20 дикого типа (WT) [30]. Это указывает на то, что активность комплемента не требуется, по крайней мере, у мышей. В соответствии с этим, генетическая делеция C1q или C3 не оказывает заметного влияния на делецию трансгенных В-клеток hCD20 с помощью различных mAb против CD20 [31].Клинические данные, демонстрирующие, что экспрессия защитных молекул комплемента на опухолевых клетках не может предсказать клинический исход для пациентов с фолликулярной лимфомой (ФЛ) после лечения ритуксимабом, также позволяют предположить, что CDC не является ключевым фактором успешного избавления от опухоли после ритуксимаба [32].

1.3. Взаимодействие FcRn, ведущее к длительному периоду полужизни

Третье основное взаимодействие, опосредованное Fc, связано с рецептором ежевики или неонатальным FcR (FcRn), рассмотренным в ссылке [4]. Этот рецептор существенно отличается от семейства FcγR как по структуре, так и по функциям.Структурно рецептор более похож на рецептор главного комплекса гистосовместимости (MHC), и он не содержит доменов, способных передавать сигнал, и не ассоциируется с ними [4,33]. Первоначально было определено, что он важен для транспортировки IgG через плаценту от матери к плоду, однако вскоре была установлена его более широкая роль в поддержании гомеостаза IgG [34,35]. В отличие от прямых эффекторных функций, описанных выше, это взаимодействие отвечает за обеспечение длительного периода полужизни антител, который для IgG составляет более 20 дней у людей и 9 дней у мышей [36,37].Белки сыворотки, включая IgG, постоянно подвергаются эндоцитозу моноцитами и эндотелиальными клетками. FcRn способен убирать интернализованный IgG и возвращать его в кровоток. Во время этого процесса FcRn связывает интерфейс Ch3-Ch4 Fc в зависимости от pH. Консервативные остатки гистидина (h410 и h535) в доменах Ch3-Ch4 IgG становятся протонированными при кислом pH (

Все свойства и активности, описанные выше, передаются через высокоразвитую и точно настроенную серию молекулярных взаимодействий между Fc и детализированными молекулами, связывая антитела с мощными эффекторными функциями иммунной системы и обеспечивая их длительный период полужизни. .Поэтому неудивительно, что были предприняты многочисленные попытки усилить или изменить каждое из этих взаимодействий. Сводные данные о вариантах антител, которые были разработаны для модификации этих взаимодействий, представлены в следующих таблицах и на рисунках. Более подробный обзор вариантов, их открытие и основные последствия расширены в следующих разделах в соответствии с их функциональным выходом (функция эффекторных клеток, опосредованная комплементом, связывание FcγRIIB и продление периода полужизни) и обсуждаются ниже.Кроме того, мы рассматриваем те mAb, у которых сниженная эффекторная функция была сконструирована для улучшения терапевтических ответов.

2. Конструирование Fc для усиления функции эффекторных клеток антител

Как подробно описано выше, FcγR являются центральными для эффекторных функций IgG. Следовательно, стратегии Fc-инженерии были использованы для увеличения сродства к FcγR, чтобы усилить Fc-эффекторные функции, такие как ADCC и ADCP, и тем самым повысить эффективность противораковых антител. Эти стратегии были обобщены и обсуждаются ниже.

Таблица 1

Мутации, усиливающие эффекторную функцию клеток и связывание FcγR.

I2063 G3 / G3.

		Эффекторная функция по сравнению с WT		Аффинность связывания по сравнению с WT
Fc-модификация	ID	ADCC	ADCP	FcγRIIA ^H	FcγRIIA 920γR 920γR 920γR 920 II20 9202 9202 9202R 920 II20 9202 R9	FcγRIIIA ^V	Ref
S298A / E333A / K334A	AAA	↑	n.d.	↓↓	н.о.	↓↓	↑↑	↑	[40]
Афукозилирование (Potelligent)	Potelligent	↑↑	н.о.	н.о.	н.о.	н.о.	↑↑↑	н.о.	[41]
S239D / I332E	DE	↑↑	↑	н.о.	н.о.	↑↑↑	↑↑↑	↑↑↑↑	[42]
S239D / A330L / I332E	DLE	↑↑↑	↑	n.d.	н.о.	↑↑↑	↑↑↑	↑↑↑↑	[42]
G236A	G236A	—	↑	↑↑	↑↑	↑	—	—	[43]
ADE	↑	↑	↑↑	↑↑↑	↑↑↑	↑↑↑	↑↑↑	[43]
G236A / A330L / 9 I332E 900IE	г.n.s.	н.о.	↑↑	↑↑	↓↓	↑↑	↑↑	[44]
G236A / S239D / A330L / I332E	GASDALIE	n.d.	н.о.	↑↑↑	↑↑↑	↑	↑↑↑	↑	[45]
F243L / R292P / Y300L / V305I / P396L	LPLIL		↑	↑↑	↑	↑	↑↑↑	↑↑↑	[46]
L235V / F243L / R292P / Y300L / P396L	VLPLL	↑	↑.d.	↑	↓↓	↓↓	↑↑	↑	[47]
Одна тяжелая цепь: L234Y / L235Q / G236W / S239M / h368D / D270E / S298A D270E и противоположная тяжелая цепь / K326D / A330M / K334E	Asym-mAb1	↑↑	nd	↑↑	↑↑	—	↑↑↑↑	↑↑↑↑	[48]

За последние 2–3 десятилетия использовались методы определения аминокислот, участвующих в связывании FcγR с IgG.В плодотворном исследовании 2001 года Шилдс и др. выполнили картирование с высоким разрешением с использованием аланинового сканирующего мутагенеза [40] для определения остатков в hIgG1, необходимых для связывания hFcγR и hFcRn (A). Сайт связывания hFcγRs был обнаружен в нижних шарнирных и проксимальных областях Ch3 hIgG1 [40]. Ключевые остатки, участвующие в этих взаимодействиях, впоследствии были в центре внимания мутационных исследований и выделены в B. Эти исследования проложили путь к большему пониманию того, как молекулы IgG взаимодействуют с FcγR.

Фрагментные кристаллизующиеся (Fc) модификации, которые усиливают эффекторную функцию антитела. ( A ) Хронология методов детализации событий, использованных для обнаружения вариантов с усиленной функцией эффекторных клеток, и когда варианты Fc были впервые описаны [40,41,42,43,44,45,46,47,48]. Буквы относятся к общепринятым обозначениям введенных аминокислотных замен, обсуждаемых в основном тексте. ( B ) Ранее идентифицированные точечные мутации в Fc, которые влияют на функцию эффекторных клеток, аннотированы на модели кристаллической структуры hIgG1 Fc (PDB: 3AVE; [49,50]) и подробно описаны в.

2.1. Аминокислотные замены для усиления функции эффекторных клеток

Руководствуясь приведенными выше исследованиями, многочисленные группы впоследствии ввели аминокислотные замены в Fc-область антител для увеличения соотношения связывания A: I и, следовательно, усиления их эффекторных функций, опосредованных hFcγR (суммировано в A ). Основываясь на своих первоначальных наблюдениях, Шилдс и др. разработаны варианты, включающие аминокислотные замены, которые демонстрируют повышенное связывание с FcγRIIIA, но снижают связывание с FcγRIIB [40].Это включало вариант S298A / E333A / K334A, который показал повышенный ADCC по сравнению с WT IgG при введении в гуманизированное IgG1 анти-IgE mAb E27 [40].

Группы также внедрили моделирование на основе вычислительной структуры в сочетании с высокопроизводительным скринингом белков для выявления аминокислотных замен для усиления эффекторных функций, опосредованных hFcγR. Например, было обнаружено, что анти-CD52 hIgG1, алемтузумаб, с мутациями S239D / I332E или S239D / A330L / I332E, имеет повышенную аффинность связывания с обоими аллотипами FcγRIIIA (хотя и выше для аллеля V158) и FcγRIIB [42,51].Следовательно, было продемонстрировано, что ADCP незначительно улучшился, в то время как ADCC был значительно усилен введением этих аминокислот в антитело против HER2 hIgG1, трастузумаб [42,51]. Важно отметить, что хотя обе мутации S239D / I332E и S239D / A330L / I332E могут успешно усиливать ADCC, только варианты S239D / I332E сохраняют емкость CDC, тогда как она снижена для вариантов S239D / A330L / I332E по сравнению с WT hIgG1 [42,51]. Возможные последствия этой разницы обсуждаются ниже. In vivo ритуксимаб, включающий замены S239D / I332E, приводит к значительно более низкому значению IC50 истощения В-клеток у яванских макак (от 10 мкг ^-1 кг ^-1 для ритуксимаба дикого типа до 0.2 мкг ^— 1 кг ⁻¹ для варианта S239D / I332E) [42].

Используя аналогичные методы скрининга, были обнаружены другие варианты, которые обладали большей аффинностью к FcγRIIA по сравнению с FcγRIIB для усиления ADCP [43]. Это включало мутацию G236A, которая обеспечивала 6-7-кратное усиление связывания с обоими аллотипами FcγRIIA, при этом не изменяя существенно сродство к FcγRIIB или FcγRIIIA по сравнению с WT hIgG1 [43]. Примечательно, что отношения IIA / IIB (Kd (FcγRIIA) / Kd (FcγRIIB)) составляли 15 и 12 (для аллотипов h231 и R131 соответственно) для варианта G236A по сравнению с 2.7 и 2.5 для WT hIgG1 [43]. В результате эта единственная аминокислотная мутация была введена в антитело против EpCAM hIgG1, что привело к умеренному увеличению ADCP при сохранении уровней ADCC, сравнимых с антителом WT [43]. Однако было обнаружено, что мутация G236A снижает сродство к FcγRI примерно в 7 раз, что может сделать этот вариант субоптимальным с терапевтической точки зрения [43]. Следовательно, для восстановления связывания с FcγRI были включены другие мутации, включая мутацию S239 для создания варианта G236A / S239D / I332E [43].G236A / S239D / I332E hIgG1 продемонстрировал существенно усиленное связывание со всеми FcγR с повышенным ~ 30-кратным связыванием для аллотипа FcγRIIA-R131, хотя наблюдались лишь незначительные увеличения ADCC и ADCP () [43].

Совсем недавно были созданы антитела, несущие мутации G236A / A330L / I332E и G236A / S239D / A330L / I332E, и была оценена их способность усиливать опосредованные FcγR эффекторные функции [44,45]. Было обнаружено, что оба имеют повышенное связывание с активирующими FcγR (FcγRIIA и FcγRIIIA), при этом G236A / A330L / I332E hIgG1 также демонстрирует более низкое связывание с ингибирующим FcγRIIB, тогда как G236A / S239D / A330L / I332E hIgG1 имеет повышенное связывание с FcγIIB, 44,4IIB [44]. ].In vitro, G236A / A330L / I332E hIgG1 обладал большей способностью к ADCC по сравнению с WT [44]. При включении в hIgG1 анти-CD20 оба варианта продемонстрировали значительно более высокое истощение В-клеток hCD20 ⁺ у трансгенных мышей hCD20 / hFcγR по сравнению с анти-CD20 hIgG1 дикого типа [44,52]. Тем не менее, G236A / S239D / A330L / I332E hIgG1 не только показал снижение измерения теплового сдвига белка по сравнению с WT (~ 55 ° C против ~ 68 ° C, соответственно), но он также обладал значительно меньшим периодом полураспада в hFcγR. трансгенных мышей, что, как предполагается, происходит из-за их повышенного сродства к FcγR и снижения стабильности in vivo [44].Это открытие подчеркивает два важных соображения, когда Fc-engineering; Во-первых, может существовать предел полезного увеличения связывания с низкоаффинными hFcγR, а во-вторых, непредвиденные эффекты на другие свойства Fc.

Для идентификации новых Fc-областей человеческого IgG1 с повышенным связыванием с FcγRIIIA, но пониженным связыванием с FcγRIIB с целью увеличения соотношения A: I и усиления эффекторных функций Fc, также использовались функциональные генетические скрины с использованием методов отображения поверхности дрожжей (A) [ 46].Комбинация мутаций F243L / R292P / Y300L / V305I / P396L была обнаружена таким образом и продемонстрировала 10-кратное усиление связывания с FcγRIIIA по сравнению с ритуксимабом WT с минимальным усилением связывания с FcγRIIA и FcγRIIB [41].

2.2. Гликоинженерия для улучшения функции эффекторных клеток

Гликоинженерия также оказалась мощным инструментом для модификации Fc-опосредованных эффекторных функций клеток. Это следует за осознанием того, что гликаны, присоединенные к остатку N297 Fc, являются критическими для эффективного связывания с FcγR и C1q [53,54,55,56,57].Хотя изначально непонятно, почему эти углеводы так важны, недавно было показано, что гликан hIgG1 Fc N297 участвует во внутримолекулярных взаимодействиях между углеводом и аминокислотой, которые стабилизируют C’-цепь Fc и C’E-петлю и ориентируют интерфейс hFcγRIIIA для связывания Fc. [58]. Что касается функции эффекторных клеток, было обнаружено, что гликозилирование по сайту N297 имеет решающее значение для индукции ADCC из-за его способности стабилизировать область Fc и сохранять ее в «открытой» конформации [59,60].На этом участке часто могут встречаться различные комбинации олигосахаридов, и многие IgG часто включают N-ацетилглюкозамин (GlcNAc), который в сочетании с другими остатками образует основной углевод [59,60]. Остаток, который часто является частью ядра GlcNAc, представляет собой фукозу [60]. Из-за стерических затруднений эта фукоза нарушает оптимальное взаимодействие IgG с FcγRIIIA [53,59]. Следовательно, удаление фукозы из этого сайта широко исследовалось для усиления связывания с FcγRIIIA и усиления функции эффекторных клеток.

В 1999 году было обнаружено, что сверхэкспрессия фермента N-ацетилглюкозаминилтрансферазы III (GnTIII) в клетках СНО может продуцировать антитела к hIgG1 со значительно сниженным фукозилированием [61]. Конструирование химерного антитела против нейробластомы IgG1 (chCE7) таким образом привело к более высокому ADCC [61]. Этот механизм генерации антител с пониженным фукозилированием продавался как технология GlycoMab ^®, разработанная Swiss Biotech, Glycart, а затем приобретенная Roche [62].

Другой метод получения афукозилированных антител был основан на исследовании 2003 г., показавшем, что гуманизированные антитела, полученные в клеточной линии гибридомы YB2 / 0 крысы, имели в 50 раз более высокую активность ADCC по сравнению с антителами, продуцируемыми в линиях клеток CHO (A) [63] .Анализ состава моносахаридов и профилирования олигосахаридов показал, что антитела, продуцируемые в клеточных линиях YB2 / 0, имеют более низкое содержание фукозы по сравнению с антителами, продуцируемыми в клеточных линиях CHO [63]. Это вызвало интерес к созданию антител с еще более низким содержанием фукозы. В частности, метод, теперь лицензированный как POTELLIGENT ^® от Kyowa Hakko Kirin Co., использует клетки CHO, нокаутированные по FUT8, для генерации афукозилированных антител [64]. Первоначальные исследования афукозилированных антител, полученных таким образом, показали 13-кратное увеличение связывания с FcγRIIIA-F158 и 5-кратное увеличение ADCC () [41].Было обнаружено, что афукозилированное антитело против CCR4, полученное таким образом, значительно более эффективно в моделях мышей SCID с привитыми PBMC человека, а также в подавлении роста опухоли в моделях сингенных и ксенотрансплантатных мышей по сравнению с его аналогом WT [65].

С тех пор было предпринято много других попыток разработать гликоинженерные антитела для усиления функции эффекторных клеток, подробно рассмотренные ранее [66,67]. Однако афукозилирование остается наиболее распространенным методом гликоинженерии для улучшения функции эффекторных клеток, и антитела, использующие эти технологии, оцениваются в клинических испытаниях, некоторые из которых уже одобрены ().Однако важно отметить, что препараты гликоинженерных антител могут иметь высокую степень гетерогенности, что является ключевым препятствием для получения одобрения регулирующих органов.

Таблица 2

Конструированные антитела Fc, в настоящее время одобренные для клинического использования или на поздних стадиях разработки.

ЕС — 2018

63 Labituxim CD20

Антитело	Производитель	Цель	Модификация Fc	Эффект модификации	Показание (я)	Стадия
Обинутузумаб	Повышение АД	ROCC	ROC79	В-клеточная лимфома	Одобрено: США — 2013 ЕС — 2014
Могамулизумаб	Киова Хакко Кирин	CCR4	Афукосилирование	Повышенное значение ADCC		92 Т-клеточная лимфома	92 Т-клеточная лимфома
Могамулизумаб	Киова Хакко Кирин	CCR4	Афукосилирование	Повышенное значение ADCC		Margetuximab	MacroGenics	HER2	L235V / F243L / R292P / Y300L / P396L	Повышенный ADCC	Рак молочной железы	Phaseotherapy
Афукозилирование	Повышено ADCC	NHL	Фаза 3
Тафаситамаб	MorphoSys	CD19	S239D / I332E	Повышенный ADCC	Лимфома Ходжкина
Тафаситамаб	MorphoSys	CD19	S239D / I332E	Повышенный ADCC	Лимфома Ходжкина	Подтверждено: США — 2020 г.	Залифрелимаб	Agenus	CTLA-4	S239D / A330L / I332E	Повышенный ADCC	Продвинутые солидные опухоли	Фаза 2
	BI 836837	Boehringer		BI 836837	Boehringer	Повышенный ADCC	DLBCL	Фаза 2
Окаратузумаб	Mentrik Biotech	CD20	P247I / A339Q	Повышенный ADCC	Лейкемия / лимфома 86		Dustra		PD-L1	L234F / L235E / P331S	Fc отключен	Уротелиальный рак	Одобрено: США — 2017
NSCLC	ЕС — 2018									L234F / L235E / P331S	Fc отключен
Атезолизумаб	Roche	PD-L1	N298A	Fc инвалид	Уротелиал USA 79 2016 EU — 2017
					NSCLC
					SCLC
					Рак молочной железы
APL502	Apollomics	PD-L1	Неизвестно	Fc отключен Фазо-клеточный рак		Squamous 3

2.3. Противораковые антитела с улучшенной функцией эффекторных клеток, поступающие в клинику

Многочисленные антитела, сконструированные для демонстрации усиленных эффекторных функций Fc, в настоящее время проходят оценку в клинических испытаниях, краткое изложение утвержденных и находящихся на поздних стадиях клинических испытаний показано в. Из-за того, что большинство клинически одобренных противораковых антител проявляют свои эффекты через прямую делецию популяции клеток-мишеней, усиление их эффекторной функции было областью разработки mAb, которая достигла наибольшего клинического прогресса.Первым таким антителом, одобренным для использования при раке, был обинутузумаб в 2015 году, анти-CD20-антитело, разработанное с использованием технологии Glycart GlycoMAb ^® для достижения низкого уровня фукозилирования. В ключевых прямых исследованиях ХЛЛ и ФЛ обинутузумаб в сочетании с химиотерапией улучшал выживаемость без прогрессирования заболевания (ВБП) по сравнению с ритуксимабом в сочетании с химиотерапией [69,70]. Однако в исследовании 1418 пациентов с диффузной большой B-клеточной лимфомой (DLBCL) обинутузумаб в сочетании с химиотерапией CHOP не давал никаких преимуществ перед R-CHOP, предполагая, что повышенное связывание FcγRIII в результате гликоинженерии может принести пользу только при определенных заболеваниях. [71,72].Также важно отметить, что в этих испытаниях уровни дозирования и режимы различались в группах ритуксимаба и обинутузумаба. Дополнительным предостережением в отношении этих сравнений является то, что ритуксимаб и обинутузумаб имеют различия в механизме действия. Ритуксимаб представляет собой mAb типа I против CD20 и может перераспределять CD20 в липидных рафтах для индукции сильного CDC, в то время как обинутузумаб представляет собой mAb типа II, которое не обладает этими свойствами, но может вызывать неапоптотическую форму прямой гибели клеток [31,73] . Точно так же ритуксимаб быстро интернализуется с поверхности клетки, в то время как обинутузумаб не является, опять же, из-за их соответствующей природы типа I / II [74,75].Таким образом, трудно определить, насколько улучшение эффективности может быть отнесено на счет Fc-гликоинженерии.

Ублитуксимаб — еще одно антитело против CD20, сконструированное с низким содержанием фукозы [76]. В исследовании GENUINE фазы 3 с участием пациентов с ХЛЛ высокого риска ублитуксимаб стал первым моноклональным антителом против CD20, обеспечивающим дополнительную пользу пациентам от ингибитора BTK ибрутиниба, со значительным улучшением общей скорости ответа (ЧОО) и ВБП [76]. В сопоставимом исследовании ритуксимаб в комбинации с ибрутинибом не улучшил ВБП по сравнению с одним ибрутинибом, что свидетельствует о том, что усиление эффекторной функции ублитуксимаба может принести пользу пациенту [77].Кроме того, в исследовании UNITY-CLL сравнивали ублитуксимаб плюс ингибитор PI3K умбралисиб и обинутузумаб плюс хлорамбуцил. Исследование было прекращено досрочно из-за более высокой эффективности в группе ублитуксимаба [78]. Однако при введении обоих антител в совершенно разных комбинациях относительный вклад различных антител (и, более конкретно, их модификаций Fc) в терапевтический результат не может быть непосредственно оценен. Другое антитело к CD20, окаратузумаб, содержащее мутации P247I / A339Q для усиления ADCC, также исследовалось в клинике [79].Однако, несмотря на завершение в 2011 году испытания фазы 2 ({«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT00003874», «term_id»: «NCT00003874»}} NCT00003874), результатов не было. опубликовано.

Отходя от mAb против CD20, mAb против CCR4, могамулизумаб, одобрено Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) для использования при Т-клеточном лейкозе / лимфоме взрослых (ATLL), а также при грибковых микозах (MF) и Сезари. синдром, 2 подтипа кожной Т-клеточной лимфомы (CTCL) [80]. В крупнейшем испытании, когда-либо проводившемся с CTCL, могамулизумаб давал более высокую ВБП по сравнению с ингибитором HDAC вориностатом (7.7 против 3,1 месяца) [81]. При ATLL могамулизумаб также имел благоприятную ЧОО по сравнению с контрольной группой, выбранной исследователями, но не улучшал ВБП [82]. Это контрастирует с более ранним, но меньшим исследованием ATLL, которое показало улучшение PFS, хотя это может отражать важность подтипа ATLL в ответ на могамулизумаб [83].

Тафаситамаб (MOR208) — это антитело, нацеленное на CD19, одобренное FDA в 2020 году для использования при рецидивирующем / рефрактерном DLBCL. Он был сконструирован с мутацией S239D / I332E для усиления ADCC за счет увеличения сродства к FcγRIIIA.В исследовании RE-MIND пациенты с DLBCL, получавшие тафазитамаб в сочетании с леналидомидом, сравнивались с соответствующими историческими данными для пациентов, получавших только леналидомид. В ходе исследования был сделан вывод о том, что комбинированная группа имела более высокую ЧОО (67,1%), чем монотерапия леналидомидом (34,2%) [84]. После этих многообещающих результатов в настоящее время проводится прямое сравнение тафазитамаба с ритуксимабом в комбинации с бендамустином в исследовании B-MIND [85]. Основные результаты этого исследования ожидаются в начале 2022 года.Несмотря на то, что ритуксимаб нацелен на другой антиген, результаты могут дать представление об улучшении клинического результата, которое может быть достигнуто за счет усиления связывания FcγRIIIA.

Как уже указывалось, прямые сравнения между WT и Fc-модифицированными реагентами hIgG1 отсутствуют, что затрудняет получение окончательных доказательств важности Fc-инженерии. Действительно, в дополнение к положительным показаниям, подробно описанным выше, не все антитела, сконструированные для усиления эффекторной функции, дали ожидаемую пользу для пациента.Например, окрелизумаб, mAb против CD20, который имеет общий перекрывающийся эпитоп CD20 с ритуксимабом, был разработан для повышения активности ADCC [86]. В исследовании фазы I / II с участием пациентов с ФЛ, ранее получавших ритуксимаб, ЧОО достигло 38% [87]. Однако такая же ЧОО была достигнута в аналогичном исследовании пациентов, повторно принимавших ритуксимаб [88]. В результате разработка окрелизумаба для лечения гематологических злокачественных новообразований была приостановлена. Несмотря на это, антитело было впоследствии одобрено для использования при рассеянном склерозе.Точно так же CetuGEX, афукозилированная версия цетуксимаба mAb против EGFR, не улучшила PFS по сравнению с нативным антителом. Более того, его использование было связано с увеличением числа событий, связанных с инфузией [89]. Это исследование предполагает, что, по крайней мере, для определенных целей, потенциальную пользу от усиления активации эффекторных клеток, возможно, необходимо уравновесить с повышенной токсичностью.

Несмотря на эти осложнения, Fc-усиленные mAb оказались успешными при лечении солидных опухолей. Macrogenics недавно сообщила о промежуточных результатах своего анти-HER2 антитела маргетуксимаба, сконструированного для усиленного связывания FcγRIIIA за счет 5 аминокислотных замен (L235V / F243L / R292P / Y300L / P396L) [47].При прямом сравнении сочетание маргетуксимаба и химиотерапии привело к умеренному улучшению ВБП по сравнению с трастузумабом в сочетании с химиотерапией (5,8 против 4,9 месяцев) [90]. Возможно, наиболее важно то, что улучшенный ответ был наиболее выражен у пациентов, несущих по крайней мере 1 копию низкоаффинного аллеля 158F FcγRIIIA (6,9 против 5,1 месяца). Пациенты, экспрессирующие эту аллельную форму FcγRIIIA, обычно имеют худший ответ на ряд антител прямого нацеливания, включая трастузумаб [91]. Таким образом, разработка mAb для усиления функции эффекторных клеток может позволить пациентам из этих групп с плохим ответом получить большую пользу от терапии mAb.После этих многообещающих результатов проводится оценка маргетуксимаба в сочетании с блокадой ингибитора контрольной точки с помощью mAb против PD1 при раке желудка и пищеводно-пищеводного соединения; предполагается, что испытание завершится в 2024 году [92].

Первоначально считалось, что антитела, нацеленные на ингибиторы контрольных точек, такие как CTLA-4, вызывают терапевтические ответы исключительно за счет блокады рецептора на Т-клетках. Однако последующие исследования показали, что делеция Treg также может способствовать их активности, хотя степень этого вклада оспаривается [93,94].Появление делеции Treg как потенциального механизма активности mAb против CTLA4 дало толчок для разработки mAb против CTLA4 с усиленной делецией клеток-мишеней. На сегодняшний день в клинику поступили два антитела против CTLA4, сконструированные для усиления функции Fc; залифрелимаб (AGEN1884) и AGEN1181. Анализ in vitro показал, что залифрелимаб может улучшить делецию Treg-клеток [95]. Однако промежуточный анализ исследования фазы I показал, что при сочетании с mAb против PD1 ответы были сравнимы с ответами, наблюдаемыми с немодифицированным mAb против CTLA-4 ипилимумабом, хотя и с благоприятным профилем безопасности [96].

4. Конструирование Fc для усиления связывания антител с FcγRIIB

FcγRIIB является единственным ингибирующим FcγR, экспрессируемым людьми и мышами. Для прямого нацеливания, удаляющих опухоль антител, экспрессия FcγRIIB была связана со сниженной эффективностью. Например, интернализация ритуксимаба с поверхности опухолевых клеток была связана с экспрессией FcγRIIB in vitro, а высокий уровень FcγRIIB был связан со сниженной активностью ритуксимаба in vivo, предположительно из-за его способности снижать ADCP [75,106].Семенные исследования Clynes и Ravetch также продемонстрировали, что мышиный FcγRIIB нарушает активность антитела к раку груди трастузумаба [106,107]. Однако, напротив, было показано, что FcγRIIB положительно регулирует активность иммуномодулирующих агонистических антител за счет более эффективного кластеризации рецепторов-мишеней mAb [108]. Первоначально об этом сообщалось для агонистических антител против DR5, которые требуют перекрестного связывания с помощью FcγRIIB для успешного достижения контроля над опухолью, но теперь это было показано для членов суперсемейства рецепторов множественного фактора некроза опухоли (TNFRSF), таких как CD40, 4-1BB и OX40, по крайней мере, в доклинических моделях [109,110,111,112,113,114].Следовательно, разработка антител для усиления связывания с FcγRIIB представляет особый интерес для агонистических противораковых антител. Данные этих исследований обобщены и подробно описаны в Разделе 4.1.

Модификации Fc, которые усиливают связывание с FcγRIIB. ( A ) Ранее идентифицированные точечные мутации в Fc, которые влияют на связывание с FcγRIIB, аннотированы на модели кристаллической структуры hIgG1 Fc (PDB: 3AVE; [49,50]). ( B ) Величину аффинности связывания вариантов сравнивали с антителами WT того же изотипа IgG и области F (ab).Каждая строка отображает независимый эксперимент и, следовательно, часто независимые методы, использующие различную основу IgG из конкретного исследования, как указано в последнем столбце. NB = нет обнаруживаемого связывания, н.о. = нет данных, — = нет изменений, ↑ <2-кратная повышающая регуляция, ↑↑ 2–9,99-кратная повышающая регуляция, ↑↑↑↑> 100-кратная повышающая регуляция, ↓↓ 2–9,99-кратная понижающая регуляция, ↓↓↓ 10–99,99-кратная понижающая регуляция, Fc γRIIA ^H FcγRIIA-h231, Fc γRIIA ^R FcγRIIA-R131, Fc γRIIIA ^F Fc1976VIIRIIIA ^F Fc1976IIRIIIA- Fc1976 VIA- Fc1976 VIA- Fc1976 VIA- Fc1976 VIA- Fc1976 Fc1976 VIA- Fc1976 Fc1976 VIA- Fc1976 Fc1976 VIA- Fc1976 .

4.1. Аминокислотные замены, предназначенные для усиления связывания FcγRIIB

Сочетание моделирования на основе вычислительной структуры и высокопроизводительного скрининга белков, Chu et al. проверили более 900 вариантов, чтобы выявить Fc-домены антител с оптимальными профилями связывания FcγR для иммуностимуляции, то есть с низким соотношением A: I [115]. Благодаря этой стратегии скрининга группа обнаружила аминокислотные замены S267E / L328F, которые при введении в hIgG1 обеспечивали 430-кратное увеличение аффинности связывания с FcγRIIB с минимальными изменениями в связывании с FcγRI и FcγRIIA-h231 и устранением связывания с FcγRIIIA-V158 по сравнению с к WT hIgG1 [115].Сообщалось, что мутации S267E / L328F облегчают связывание сконструированных антител против OX40 с FcγRIIB и усиливают агонизм более чем в 2 раза in vitro [116]. In vivo модифицированное анти-CD40 hIgG2 антитело S267E / L328F обладало повышенной способностью активировать Т-клетки у трансгенных мышей hFcγR / hCD40 по сравнению с вариантами hIgG1 или hIgG2 дикого типа [117].

В одном из вариантов этого подхода Mimoto et al. провели скрининг более 500 вариантов hIgG1, заменив около 30 остатков в нижних шарнирных и Ch3 областях на другие аминокислоты [118].Благодаря этому процессу они обнаружили мутацию P238D, которая усиливает связывание с FcγRIIB, при этом либо полностью устраняя, либо сильно снижая связывание с активирующими FcγR (FcγRI, FcγRIIA-h231, FcγRIIIA-V131) по сравнению с WT hIgG1 [118]. Затем группа добавила дополнительные аминокислотные изменения к P238, чтобы усилить связывание с FcγRIIB, включая мутации: G237D / h368D / P271G / A330R (обозначенные как V11), которые усиливали связывание с FcγRIIB в 40 раз по сравнению с WT IgG1 [118 ]. Однако именно комбинация из 6 аминокислотных замен E233D / G237D / P238D / h368D / P271G / A330R (обозначенная как V12) имела самое высокое усиление связывания с FcγRIIB примерно в 217 раз по сравнению с WT IgG1 [118].V12 также не обнаруживает связывания ни с одним из аллотипов FcγRIIIA; снижение связывания с FcγRI и FcγRIIA-h231 и только небольшое усиление связывания с FcγRIIA-R131 по сравнению с WT hIgG1 [118]. Эти мутации V12 были введены в антитела против OX40 и продемонстрировали> 2-кратное увеличение агонизма in vitro, как измерено с помощью репортерного анализа NF-κB [48]. С момента открытия мутаций, усиливающих связывание с FcγRIIB, было обнаружено множество противораковых антител, которые включили их, и они оцениваются в клинических испытаниях, как обсуждается в Разделе 4.2.

4.2. Противораковые антитела с усиленным связыванием FcγRIIB, поступающие в клинику

Как обсуждалось выше, появляется все больше доказательств того, что иммуностимулирующие антитела, особенно те, которые нацелены на членов TNFRSF, могут быть дополнительно сшиты с помощью FcγRIIB для увеличения кластеризации рецепторов и обеспечения эффективного агонизма [110, 112] . Конечно, это было показано для mAb против CD40, хотя важно понимать, что это варьируется в зависимости от конкретного mAb и эпитопа на CD40-мишени [119].Соответственно, LVGN7408, разработанный Lyvgen Biopharma, был сконструирован для повышенного связывания FcγRIIB, хотя подробности выполненных точных модификаций не были раскрыты. В настоящее время данные ограничены, но его прогресс будет тщательно отслеживаться, в частности, поскольку усиленный агонизм, опосредованный FcγRIIB, часто был связан с повышенной токсичностью, а доклинические данные показывают, что внутриопухолевое введение требовалось для другого mAb против CD40, когда оно было оптимизировано. для взаимодействия FcγRIIB через мутации V11 (G237D / P238D / h368D / P271G / A330R) [120].

4-1BB (CD137) — еще один член TNFRSF, который является привлекательной терапевтической мишенью. Подобно CD40, он более эффективно сшивается и агонизируется mAb, которые взаимодействуют с FcγRIIB [121], но, как и CTLA-4, его высокая относительная экспрессия на Treg делает его более сложным для терапевтического воздействия. Например, взаимодействие mAb против 4-1BB с активирующим FcγR приводит к делеции Treg, в то время как перекрестное связывание с помощью FcγRIIB требуется для эффективной совместной стимуляции эффекторов CD8 ⁺, причем оба механизма обеспечивают противоопухолевую активность в доклинических условиях. модели [121].Действительно, оптимальная противоопухолевая активность наблюдалась у мышей с антителом mIgG2a, содержащим шарнир hIgG2, обеспечивающим эффективную делецию при одновременном обеспечении оптимального перекрестного связывания [121]. MAb LVGN6051 против 41BB в настоящее время исследуется в комбинации с пембролизумабом. Это антитело было оптимизировано для взаимодействий с FcγRIIB, и было обнаружено, что оно индуцирует эффективную активацию Т-клеток без обычно наблюдаемой токсичности для печени [122]. Однако активирующее участие FcγR было отменено, предотвращая делецию Treg как механизм действия.Эффективность этого антитела с одним механизмом действия еще предстоит выяснить, и это может предоставить дополнительные полезные данные о механизме действия для последующих mAb против 41BB. Интересный альтернативный подход для преодоления требования вовлечения FcγRIIB для кластеризации 4-1BB заключается в разработке биспецифических препаратов. В одном формате, разработанном Roche, одно плечо F (ab) нацелено на 4-1BB, в то время как другое нацелено на антигены, которые высоко экспрессируются в микроокружении конкретной опухоли, такие как CD19 или белок активации фибробластов (FAP) [123].Сообщалось, что это способствует эффективной кластеризации рецепторов без необходимости вовлечения FcγRIIB.

5. Разработка Fc для получения антител без функций Fc

В предыдущем тексте был описан ряд подходов, разработанных для усиления эффекторной функции Fc. Однако вовлечение иммунных эффекторов посредством взаимодействий FcγR и комплемента может быть вредным для определенных механизмов действия mAb, и поэтому могут быть желательны Fc-нулевые или молчащие антитела. Например, с антителами, целью которых является блокирование рецепторов или цитокинов на клеточной поверхности, эффекторные функции Fc не требуются и могут даже быть вредными [105].Для противораковых антител это особенно важно для антител к ингибиторам иммунных контрольных точек, где истощение клеток-мишеней нежелательно, и многие клинически одобренные противораковые ингибиторы контрольных точек были выбраны с изотипами с естественной низкой эффекторной функцией Fc или разрабатываются с Fc-нулевым. или форматы с глушителем Fc, как обсуждается далее в этом обзоре. Методы подавления Fc суммированы ключевыми остатками, выделенными в B.

Модификации Fc, которые снижают эффекторную функцию антитела и / или связывание FcγR.( A ) Хронология событий, подробно описывающих основные открытия, методы, используемые для обнаружения вариантов, которые имеют заглушенную область Fc, и когда варианты Fc были впервые описаны в литературе [57,115,124,127,129,130,132,133,134,135,136]. Буквы относятся к общепринятым обозначениям введенных аминокислотных замен, обсуждаемых в основном тексте. ( B ) Ранее идентифицированные точечные мутации в Fc, которые подавляют функции Fc, аннотированные на модели кристаллической структуры Fc hIgG1 (PDB: 3AVE; [49,50]) и подробно описаны в.

Таблица 3

Снижение эффекторной функции или аффинности связывания с FcγR в вариантах с подавленным Fc по сравнению с антителами дикого типа.

↓

		Эффекторная функция против WT			Сродство связывания против WT
Модификация Fc	ID	ADCC	ADCP	CDC	FcγRI	FcγRIIA ^H	FcγRIIA ^Rc20IIR920 920γRIA 9202 922 922 922 922 922 920 922 922 920 922 920 920 922 920 922 920 922 920 922 920 920 922 920 922 920 920 920 922 920 922 920 922 920 922 920 920 922 922 920 922 920 920 922 920 922 920 922 920 922 920 922 920 922 920 C1q	Ссылка
Агликозилирование (N297A / Q / G)	NA	↓	n.d.	↓↓	↓↓↓	NB	NB	NB	NB	NB	NB	[57,124,125,126]
L235A / G237A /		AA	AA nd	н.о.	↓↓ **						н.о.	[127]
L234A / L235A	LALA	↓↓	н.о.	↓↓	↓↓↓↓	NB *		NB	NB *		NB	[128,129]
S228P / L235E	IgG4-PE	Нет	Нет.d.	н.о.	↓↓↓↓	↓↓↓	↓↓↓	↓↓	н.о.	NB	NB	[130]
G236R / L328R	RR	н.о.	н.о.	н.о.	↓↓↓↓	NB	н.о.	NB	н.о.	NB	н.о.	[115]
S298G / T299A	GA	н.о.	н.о.	н.d.	↓↓↓	↓	↑↑	↑	NB	NB	NB	[124]
L234F / L235E / P331S	FES	н.о.	н.о.	н.о.	NB	↓↓ *		н.о.	н.о.	↓↓↓	↓↓↓	[131]
h368Q / V309L / A330S / P331S	IgG2m4	н.о.	н.о.	н.о.	NB	—	n.d.	↓↓	NB	NB	NB	[132]
E233P / L234V / L235A / G236del / S267K	XmAb ^® биспецифический	н.о.	н.о.	н.о.	NB	NB	NB	NB	н.о.	NB	н.о.	[133]
L234A / L235A / P329G	LALA-PG	Нет	н.о.	н.о.	NB	NB	NB	↓↓↓↓	n.d.	Нет	Нет	[130]
V234A / G237A / P238S / h368A / V309L / A330S / P331S	IgG2c4d			Нет	Нет				Нет	Нет			Нет	Нет	NB *	NB	[134]
L234F / L235E / D265A	FEA	nd	н.о.	н.о.	NB	NB **			NB *		NB	[135]

5.1. Аминокислотные замены для снижения эффекторной функции

После характеристики сайтов связывания FcγR и C1q в hIgG [137] различные группы использовали сайт-направленный мутагенез для создания вариантов с пониженными эффекторными функциями (). В 1995 году было показано, что антитело L235A / G237A / E318A hIgG1 неспособно связываться с линиями клеток человека, экспрессирующими FcγR, что привело к почти 4-кратному снижению ADCC по сравнению с hIgG дикого типа [127]. В 2000 г. мутации L234A / L235A, отключающие Fc, были обнаружены аналогичным образом с использованием сайт-направленного мутагенеза сайта связывания C1q [128].Антитела OKT3 с доменами Fc hIgG1 и hIgG4 L234A / L235A не показали обнаруживаемого связывания с низкоаффинными FcγRs и C1q и существенно уменьшили связывание с FcγRI, что привело к значительному снижению ADCC и CDC по сравнению с WT hIgG1 или IgG4 [128].

Мутации были впоследствии введены в определенные остатки в hIgG1, о которых известно, что они взаимодействуют как с FcγR, так и с C1q (см. B) [129]. Эти исследования идентифицировали аминокислотные замены L234F / L235E / P331S, которые привели к снижению связывания с низкоаффинными FcγR (FcγRIIB и FcγRIIIA-F158 не оценивались) и не обнаруживали связывания с FcγRI [129].В том же году сочетание дизайна белка на основе вычислительной структуры и высокопроизводительного скрининга белков более 900 вариантов привело к открытию пары мутаций G236R / L328R [115]. Эти мутации привели к снижению или полному прекращению связывания с измеренными FcγR (аллотипы FcγRIIA-R131 и FcγRIIIA-F158 не оценивались) [115]. Это исследование также обнаружило замену S267E, которая снижает связывание для всех низкоаффинных hFcγR (NB: изученный аллель FcγRIIA был h231; изученный аллель FcγRIIIA был V158) [115].В последующем исследовании замена S267K была объединена с серией мутаций, которые были обнаружены в нижнем шарнире hIgG2 (мутации E233P / L234V / L235A и делеция остатка G236) и включены в фон hIgG1 [133,138]. Полученное антитело показало отсутствие связывания со всеми исследованными hFcγR (hFcγRIIIA-F158 не оценивалось), и эти мутации стали основой, для которой генерируются биспецифические платформенные антитела Xencor XmAb ^® [133]. Также, анализируя интерфейс hFc-hFcγR, Schlothauer et al.идентифицировали новую мутацию P329G, которая способна нарушать взаимодействие между hIgG и hFcγR. В сочетании с мутациями L234A / L235A, тем самым создав тройной мутант L234A / L235A / P329G, они произвели вариант без детектируемого связывания с C1q или FcγR, что привело к аннулированию ADCC при введении в hIgG1 антитело против EGFR [130].

Многие из этих исследований вводили аминокислотные замены в аналогичных положениях, поэтому в 2020 году Engelberts et al. объединили несколько точечных мутаций (N297Q, L234F, L235E, D265A, P331S), ранее обнаруженные как подавляющие функцию Fc [135], и оценили их в анти-CD3-hIgG1.Они обнаружили, что комбинация L234F / L235E / D265A была наиболее сильной в подавлении молчания области Fc, что продемонстрировано отсутствием детектируемого связывания с FcyRI, уменьшением связывания с низкоаффинными FcyRs и уменьшением связывания с C1q [135].

В альтернативном подходе с использованием кристаллических структур комплекса IgG1 Fc: FcγRIII Sazinsky et al. обнаружили, что обширные контакты были установлены с доменом Ch3 IgG1, особенно в петле Fc C ‘/ E [124]. Таким образом, группа создала библиотеки мутагенеза с насыщением сайтов, сосредоточенные вокруг Fc C ‘/ E петли, теоретически кодирующие все комбинации аминокислот в остатках 296–299, 297–299 и 297–300 в hIgG1.Впоследствии была создана серия мутантов, которые подверглись скринингу на предмет снижения связывания FcγR с помощью проточной цитометрии [124], показав, что мутации S298G / T299A отменяли или значительно снижали связывание с C1q и большинством FcγR, за исключением FcγRIIA-R131 и FcγRIIB [124].

5.2. Гликоинженерия для снижения эффекторной функции

Гликоинженерия также использовалась для создания антител с пониженной эффекторной функцией. Например, в 1989 г. антитела были продуцированы в присутствии туникамицина для образования агликозилированных антител [57].Было показано, что эти агликозилированные антитела имеют значительно меньшее связывание с FcγRI (примерно в 35 раз меньшее ингибирование розетки эритроцитов, чем у IgG1 дикого типа) и FcγRII [57]. Впоследствии были созданы агликозилированные варианты, нацеленные на конкретные аминокислотные замены, для получения антител с подавленным Fc (см. B и). Как упоминалось ранее, гликан N297 является центральным для связывания между hIgG1 и FcγRs и C1q, при этом структурные данные демонстрируют, как поддерживаются взаимодействия между HIgG1 Fc N297-гликаном и FcγRIIIA [139].Кроме того, было также высказано предположение, что взаимодействия между различными hFcγR, C1q и другими изотипами hIgG опосредуются одинаковым образом [58]. Из-за важности гликана N297 для связывания FcγR и C1q было показано, что аминокислотные мутации в этом сайте, включая N297A, N297Q и N297G, которые удаляют этот гликан, снижают связывание со всеми FcγR и C1q, что приводит к снижению ADCC. и CDC [124,125,126]. Что касается степени подавления любой из этих модификаций Fc, следует отметить, что многие из вышеупомянутых исследований использовали проточную цитометрию и / или поверхностный плазмонный резонанс (SPR) для оценки связывания FcγR.Эти методы обычно основаны на использовании растворимых или мономерных версий этих антител, однако в 2009 году было показано, что для определения связывания FcγR для изотипов hIgG следует рассматривать более физиологически релевантные иммунные комплексы [140], при этом иммунные комплексы демонстрируют гораздо более высокий связывание, опосредованное авидностью, чем мономерные форматы. Lux et al. затем расширили эту оценку SPR для оценки различных форматов Fc-сайлент-сайлент-антител путем создания комплексов антиген: Fc-молчащие антитела (в данном случае анти-TNP: TNP-комплексы) и наблюдения за связыванием с hFcγR, стабильно экспрессируемыми на клетках СНО, линиях В-клеток человека или мононуклеарные клетки периферической крови [141].Они обнаружили, что агликозилированные антитела к hIgG1 / 2/3, представленные в виде больших иммунных комплексов, сохраняют WT-уровни связывания с FcγRIIA-131R [141], тогда как предыдущие исследования с использованием мономерного, агликозилированного hIgG1 / 3 не показали обнаруживаемого связывания [57,124]. Кроме того, они показали, что hIgG1-N297A или ферментативно дегликозилированный hIgG1 поддерживают связывание с высокоаффинным FcγRI, независимо от размера иммунного комплекса [141], что снова противоречит предыдущим отчетам об оценке мономерных Fc-сконструированных антител [57].Это подчеркивает осторожность, которую необходимо соблюдать при интерпретации данных, полученных от мономерных антител: исследования связывания FcγR с использованием методов подавления Fc и, возможно, антител, которые включают стратегии Fc-инженерии в целом.

5.3. Разработка hIgG4 и hIgG4 Fc для снижения эффекторной функции

Простейшим показателем снижения эффекторной функции Fc, возможно, является использование hIgG4 в качестве изотипа. Хотя это и не Fc-engineering per se , давно известно, что разные изотипы hIgG передают различные уровни эффекторной функции [142], что позже было приписано их дифференциальному связыванию с FcγRs и C1q [140,143,144].В частности, известно, что изотип hIgG4 имеет низкую аффинность ко всем FcγR, за исключением FcγRI, и исторически использовался для разработки Fc-инертных антител [144]. Фактически, антитела к hIgG4 являются вторым наиболее одобренным классом продуктов антител после hIgG1. Для противораковых антител класс hIgG4 часто используется для антител-ингибиторов контрольных точек, таких как антитела, нацеленные на PD-1. Это связано с относительной неспособностью антител к hIgG4 стимулировать ADCC или CDC, что является желательным признаком антител, нацеленных на важные адаптивные иммунные клетки, необходимые для индукции противоопухолевого иммунитета [142].

Однако, несмотря на эти пониженные эффекторные функции Fc, антитела к hIgG4 подвержены феномену обмена F (ab) плеча и поэтому требуют специфических аминокислотных замен для предотвращения этого. Обмен плеч F (ab) включает образование молекул полуантитела, состоящих из одной тяжелой и одной легкой цепи, которые могут рекомбинировать с другими полумолекулами (например, в сыворотке) с образованием моновалентных биспецифических антител неизвестной специфичности [144]. Было обнаружено, что серин в положении 228 играет ключевую роль в этом явлении, делая дисульфидные связи между тяжелыми цепями более восприимчивыми к восстановлению, стимулируя разрыв ковалентной связи между полумолекулами и, таким образом, являясь предпосылкой для F (ab) обмен оружием [145].Важность серина на 228 была подтверждена, когда было показано, что замена S228P обеспечивает гомогенный hIgG4 при анализе с помощью SDS-PAGE. Эта замена обычно вводится в терапевтические антитела к hIgG4, чтобы предотвратить замену F (ab) плеча [144, 146].

Исходя из присущего ей отсутствия эффекторной функции, константная область γ4 человека стала предметом различных подходов к подавлению Fc. В 2001 году группа изменила конфигурацию химерного (примат / человека) IgG1 анти-CD4-антитела, киликсимаба, путем замены области γ1 человека на область γ4 человека, что привело к снижению эффекторной функциональности [136].Для дальнейшего уменьшения остаточного связывания FcγR они сравнили последовательности изотипов hIgG с изотипом мышиного IgG2b, который также имеет низкую активность связывания FcγR, который обнаружил аминокислоту, которая отличается от последовательности hIgG4 в положении 235 [136]. Включение остатка мышиного IgG2b (глутаминовой кислоты) в антитело hIgG4 в этом положении дополнительно минимизировало эффекторную функцию Fc [136]. Было обнаружено, что полученное антитело с мутациями S228P / L235E либо не имело, либо существенно снижало связывание со всеми FcγR и C1q, что приводило к отсутствию измеримого ADCC [130].У шимпанзе анти-CD4-антитело S228P / L235E (кленоликсимаб) не могло истощить CD4 Т-клетки в отличие от WT hIgG4 [136].

Вместо замены всей константной области hIgG1 на hIgG4, как указано выше, различные группы впоследствии использовали сайт-направленный мутагенез для введения специфических аминокислот из человеческого γ4 в антитела других изотипов IgG. Например, An et al. обнаружили комбинацию аминокислотных мутаций — h368Q / V309L / A330S / P331S (IgG2m4), которые произошли от hIgG4 [132]. Когда эти мутации были введены в остов hIgG2, это не привело к обнаруживаемому связыванию с hFcγRI, hFcγRIIIA или C1q; снижение связывания с hFcγRIIB и отсутствие изменений в связывании с FcγRIIA-h231 по сравнению с антителом к hIgG2 дикого типа [132].

Другим примером использования дизайна на основе hIgG4 для снижения эффекторных функций являются мутации V234A / G237A / P238S / h368A / V309L / A330S / P331S (IgG2c4d), где несколько остатков в константной области hIgG2 были заменены остатками IgG4 [134]. Введение этих мутаций IgG2c4d не привело к детектируемому связыванию с какими-либо FcγR или C1q, а также к отсутствию измеримых ADCC, ADCP или CDC по сравнению с аналогом WT hIgG2 [134].

Несмотря на выбор hIgG4 в качестве Fc-инертного изотипа, появляются новые доказательства того, что остаточное связывание FcγR все еще имеет эффект.Например, в случае антител против PD1 остаточное связывание FcγR участвовало в удалении mAb против PD1 из клетки-мишени миелоидными эффекторами [147]. Это предполагает, что дополнительная инженерия может позволить дальнейшее улучшение активности mAb против PD1 за счет уменьшения любых оставшихся взаимодействий FcγR. С этой целью в реагенты, поступающие в клинику, были внесены несколько дополнительных мутаций (см. Раздел 5.4).

5.4. Противораковые антитела с пониженной эффекторной функцией, поступающие в клинику

Возможно, самый большой класс агентов, поступающих в клинику с пониженной эффекторной функцией, — это те, которые нацелены на молекулы контрольных точек, причем наиболее заметными являются те, которые нацелены на ось PD1: PDL-1.Их роль заключается в блокировании взаимодействия между PD1 на эффекторных Т-клетках и PDL-1 на антигенпрезентирующих клетках или опухоли, чтобы позволить реактивацию опухолеспецифических Т-клеток [148]. Таким образом, важно, чтобы антитела, нацеленные на PD1, не приводили к делеции полезных опухолево-реактивных Т-клеток. Следовательно, все анти-PD1 mAb, одобренные на сегодняшний день (камрелизумаб, пембролизумаб, ниволумаб, цемиплимаб), а также ряд других, проходящих клиническую оценку (достарлимаб, спартализумаб и тислелизумаб), являются hIgG4 и включают мутацию S228P для предотвращения F (ab) плеча. обмен [149].

Тислелизумаб был дополнительно сконструирован как mAb против PD1 hIgG4 с рядом дополнительных мутаций (E233P / F234V / L235A / D265A / R409K) для более полного исключения взаимодействий FcγR [150]. В исследовании фазы 2 классической лимфомы Ходжкина тислелизумаб достиг ЧОО 87% по сравнению с 71% для пембролизумаба в отдельном исследовании при том же заболевании [151, 152]. Хотя сравнение результатов отдельных испытаний следует проводить с осторожностью, это указывает на то, что разработка mAb против PD1 для устранения взаимодействий FcγR может принести дополнительную пользу в клинике.Тислелизумаб, пембролизумаб и ниволумаб оценивались при плоскоклеточном НМРЛ. ВБП для антител с химиотерапией по сравнению с одной химиотерапией в их соответствующих исследованиях составляли: тислелизумаб 7,6 против 5,5 месяцев, пембролизумаб 6,4 против 4,8 месяцев и ниволумаб 7,1 против 4,4 месяца [153,154,155], хотя последний не смог достичь своей основной конечной точки повышения общей выживаемости (OS ). По мере того, как становится доступным больше данных, истинное преимущество Fc-инженерии для антител против PD1 должно стать более ясным.

Другая сторона оси PD1: PD-L1 также представляла интерес с точки зрения Fc-инженерии, поскольку в настоящее время одобрены три антитела, нацеленных на PD-L1: авелумаб, атезолизумаб и дурвалумаб. Последние два были разработаны для уменьшения взаимодействий FcγR с целью усиления блокады взаимодействий PD1: PDL1 без делеции Т-клеток, экспрессирующих APC или PD-L1 [156]. Атезолизумаб представляет собой hIgG1, содержащий мутацию N297A, удаляющую гликозилирование, чтобы отменить связывание со всеми FcγR, кроме FcγRI [40, 157].Между тем дурвалумаб содержит тройную мутацию (L234F / L235E / P331S), при которой теряется связывание со всеми FcγR [131, 158]. Как атезолизумаб, так и дурвалумаб привели к умеренному увеличению общей выживаемости в сочетании с химиотерапией в отдельных исследованиях SCLC по сравнению с одной химиотерапией (12,3 против 10,3 и 13,0 против 10,3 мес соответственно) [159 160]. Как обсуждалось выше, оценка эффекта модификаций Fc затруднена без проведения параллельных сравнений. Все три мАт были одобрены для использования при нескольких злокачественных новообразованиях, однако, возможно, стоит отметить, что оба модифицированных антитела (атезолизумаб и дурвалумаб) одобрены для использования при НМРЛ, в то время как исследование авелумаба по тому же показанию не показало улучшения общей выживаемости [156, 161]. .Эти антитела в настоящее время проходят оценку в ряде других опухолей, что может помочь построить лучшую картину в отношении важности подавления Fc при нацеливании на PD-L1.

Помимо PD1: PDL-1, использование сайленсинга Fc также рассматривается как привлекательная стратегия для разработки реагентов, нацеленных на появляющуюся молекулу контрольной точки TIM-3. Два таких реагента, Beigene BGB-A425 и Five Prime Therapeutics / BMS BMS-986258, в настоящее время набираются для участия в ранней фазе испытаний.

Помимо модуляции эффекторных функций, различные группы также пытались понять и управлять периодом полужизни антител [40, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172].

6. Разработка Fc для увеличения периода полужизни антител

Модификация Fc для модуляции аффинности связывания IgG с FcRn и, таким образом, периода полужизни IgG представляет явный интерес в различных терапевтических и диагностических сценариях. Возможно, наиболее актуальными при раке являются модификации Fc, которые увеличивают эффективность рециклирования IgG, увеличивая период полужизни и позволяя долгосрочное подавление терапевтической мишени при одновременном снижении необходимой частоты дозирования. Например, расширенные схемы лечения с использованием моноклональных антител к CD20 посредством поддерживающих стратегий помогли продлить ремиссию при определенных лимфомах и, таким образом, могли улучшить период полувыведения [173, 174].Примеры этих модификаций приведены в. Однако очевидно, что увеличение периода полужизни может быть неприменимо для всех противораковых антител, таких как иммуностимулирующие mAb (например, TGN1412), где могут возникнуть трудности с контролем побочных эффектов, таких как реакции цитокинового шторма [175]. Тем не менее, определенные антитела-ингибиторы иммунных контрольных точек, такие как ипилимумаб и авелумаб, продемонстрировали значительную положительную взаимосвязь между воздействием и эффективностью, при этом снижение клиренса связано с благоприятными терапевтическими ответами [176].Однако важно отметить, что для некоторых ингибиторов иммунных контрольных точек также сообщалось о значительной взаимосвязи воздействия и безопасности, о чем свидетельствует увеличение воздействия, коррелирующее с повышенным риском нежелательных явлений [176]. Следовательно, соотношение риска и пользы должно быть тщательно оценено для этих целей, прежде чем рассматривать вопрос о продлении периода полувыведения. Возможно, по этим причинам на сегодняшний день ограниченное количество клинически значимых противораковых антител адаптировало технологии увеличения периода полужизни, как будет обсуждаться в Разделе 6.1.

модификации Fc, улучшающие период полураспада. ( A ) Хронология событий, подробно описывающих, когда были сделаны основные открытия в отношении взаимодействий Fc: IgG, методы, используемые для обнаружения вариантов с увеличенным периодом полужизни, и когда варианты Fc были впервые описаны в литературе [40, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 177]. Буквы относятся к общепринятым обозначениям введенных аминокислотных замен, обсуждаемых в основном тексте. ( B ) Ранее идентифицированные точечные мутации в Fc, которые влияют на функцию эффекторных клеток, аннотированы на модели кристаллической структуры hIgG1 Fc (PDB: 3AVE; [49,50]) и подробно описаны в таблице ниже.( C ) Величину изменения периода полужизни или аффинности связывания для FcRn вариантов сравнивали с антителами дикого типа того же изотипа IgG и области F (ab). Каждая строка отображает независимый эксперимент и, следовательно, часто независимые методы, использующие различную основу IgG из конкретного исследования, как указано в последнем столбце. NB — связывание отсутствует, н.о. — данные отсутствуют, — нет изменений, ↑ <2-кратное усиление, ↑↑ 2–9,99-кратное усиление, ↑↑↑ 10–99,99-кратное усиление, ↑↑↑↑> 100-кратное усиление.

6.1. Аминокислотные замены, ведущие к увеличению периода полужизни.

Сайт связывания hIgG1 для FcRn был картирован у людей в 1999 году, а 2 года спустя структура сокристалла была разрешена, ссылаясь на механизм pH-зависимого связывания посредством протонирования остатков h410 и h535 [39,178]. Используя эти данные, группы сконструировали варианты антител, которые демонстрируют более высокое сродство связывания с FcRn и демонстрируют увеличенный период полужизни (). Чтобы продлить период полужизни mAb, реагенты должны иметь повышенное сродство к FcRn при кислом pH, в то же время эффективно диссоциируя при нейтральном pH, механизм, который представляет собой уникальную проблему для инженерии антител.

Как уже было описано, в 2001 году анализ сайта связывания hIgG1 для FcyRs и FcRn привел к созданию множества вариантов hIgG1 с различными атрибутами, включая усиленное связывание с FcRn (A) [40]. Тройная мутация T307A / E380A / N434A демонстрирует 11,8-кратное увеличение связывания FcRn при эндосомном pH, сохраняя при этом эквивалентное связывание с низкоаффинными FcyR по сравнению с WT hIgG1 [40]. В последующих исследованиях было обнаружено, что не только связывание с FcRn при эндосомном pH увеличивалось, но и связывание с FcRn при внеклеточном pH также увеличивалось на 2.4-кратный [177]. In vivo мутант T307A / E380A / N434A привел к 2,5-кратному увеличению периода полужизни на модели трансгенной мыши hFcRn по сравнению с антителом к hIgG1 дикого типа [177].

Dall’Acqua et al. использовали эти знания для рационального конструирования библиотек фагового дисплея для идентификации других вариантов с повышенной аффинностью связывания с FcRn (A) [162]. Они идентифицировали тройную мутацию M252Y / S254T / T256E, которая усиливала связывание FcRn в 11 раз при эндосомном pH, не изменяя связывания с FcRn при внеклеточном pH [162, 163].Последующий анализ кристаллической структуры мутаций показал, что мутация T256E в hIgG1 приводит к созданию 2 новых солевых мостиков между остатком 256E Fc-YTE и остатком Gln2 субъединицы β2m FcRn, который считается ответственным за усиленное связывание с FcRn. [179]. Dall’Alcqua et al. Исследование на обезьянах cynomolgus продемонстрировало, что период полужизни IgG1 M252Y / S254T / T256E был в 4 раза выше, чем антитела дикого типа, и когда была введена начальная доза 30 мг / кг, антитело дикого типа не определялось к 55 дню, тогда как ~ 60 мкг / мл M252Y / S254T / T256E IgG1 был обнаружен в сыворотке в тот же момент времени [163].Однако введение мутаций M252Y / S254T / T256E уменьшало связывание с FcyR и уменьшало их способность к ADCC. Более того, было обнаружено, что IgG с мутациями M252Y / S254T / T256E имеют более низкую термостабильность на -8 ° C по сравнению с WT hIgG1, что может влиять на растворимость и агрегацию антител, что является неблагоприятным для терапевтических антител свойствами [162,180].

Другие варианты увеличения периода полужизни, обнаруженные благодаря рациональному дизайну и высокопроизводительному скринингу, включают мутации M428L / N434S [168].In vitro было обнаружено, что M428L / N434S hIgG1 имеет 11-кратное повышение аффинности связывания с FcRn при pH 6 и отсутствие изменений в связывании с FcRn при внеклеточном pH по сравнению с WT hIgG1 [168]. Последующий анализ показал, что остаток N434 в Fc вовлечен в неблагоприятное взаимодействие с остатком L135 FcRn, и мутация этого остатка (N434S) позволила создать дополнительные водородные связи с карбонилами FcRn [179]. In vivo антитело M428L / N434S hIgG1 против VEGF имело 3.Время полужизни в 2 раза больше у трансгенных мышей hFcRn и в 3 раза больше у обезьян cynomolgus [168].

Группы

также использовали сайт-направленный мутагенез для более целенаправленных мутаций, основываясь на знании сайта связывания IgG для FcRn (A). В сочетании с анализом молекулярных моделей сложных кристаллических структур hFc: FcRn, Hinton et al. идентифицировали аминокислотные замены T250Q / M428L, которые привели к 28-кратному увеличению связывания с FcRn при эндосомном pH, не влияя при этом на связывание с FcRn при внеклеточном pH [164].In vivo гуманизированный IgG4 T250Q / M428L имел 1,9-кратное увеличение периода полужизни, а объем сыворотки антитела, очищенного за единицу времени, был в 2,8 раза ниже у макак-резусов по сравнению с гуманизированным IgG4 дикого типа [164]. Введение единственной мутации, V308P в hIgG1, также продемонстрировало значительное усиление связывания (более чем в 43 раза) с FcRn при эндосомном pH, отсутствие изменений в связывании с FcRn при внеклеточном pH и увеличение периода полужизни у приматов (2,4-кратное увеличение у яванского макака). обезьяны) по сравнению с WT hIgG1 [169].

Другие комбинации остатков, которые предположительно усиливают связывание с FcRn, включают два остатка, h533 и N434, которые находятся в непосредственной близости от аминокислот, которые, как известно, играют центральную роль во взаимодействиях FcRn-IgG человека [167]. Следовательно, двойной мутант h533K / N434F был оценен и обнаружил, что он имеет 16-кратное усиление связывания с FcRn при эндосомном pH, минимизируя изменения связывания FcRn при внеклеточном pH по сравнению с WT [167].

Используя структурную модель и сеть белковых остатков для понимания взаимодействия Fc с FcRn при различных pH, Booth et al.искали варианты, специально направленные на уменьшение k _от взаимодействия Fc: FcRn при pH 6 при сохранении связывания с FcyRs [171]. Через их каркас они идентифицировали тройной мутант h385D / T307Q / A378V, который увеличивал связывание с FcRn при эндосомном pH более чем в 13 раз и увеличивал период полужизни более чем в 8 раз у трансгенных мышей hFcRn, в то же время усиливая связывание со всеми FcRn и C1q и усиление соответствующих эффекторных функций Fc (ADCC и CDC) по сравнению с WT [171].

Другим механизмом увеличения периода полужизни антител является создание вариантов антител с усиленным связыванием FcRn при эндосомном pH и отменой связывания при внеклеточном pH.Было показано, что остаточное связывание IgG при pH 7,4 отрицательно влияет на рециркуляцию плазмы и постоянство циркуляции [172, 181]. Этот процесс был бы полезен для антител, которые требуют высвобождения в плазму и персистенции в ней, например, антител, нацеленных на связанные с клетками мишени, и где удаление любого остаточного связывания IgG при внеклеточном pH может быть благоприятным [97]. Ли и др. рационально разработанные библиотеки для высокопроизводительного скрининга Escherichia coli с целью выявления мутаций Fc hIgG1, которые селективно связываются с FcRn при pH 5.8, но не при pH 7,4 [172]. Благодаря этим стратегиям скрининга они обнаружили, что тройной мутант L309D / Q311H / N434S имел 5-кратное усиление связывания с FcRn при эндосомном pH и не связывался с FcRn при внеклеточном pH по сравнению с WT hIgG1 [172]. In vivo период полужизни L309D / Q311H / N434S hIgG1 был увеличен более чем в 4 раза у мышей hFcRn / hβ2m / hFcγR / hIgG1, κ по сравнению с hIgG1 дикого типа [172]. В отличие от тройной мутации M252Y / S254T / T256E, антитела с мутациями L309D / Q311H / N434S сохранили связывание FcyR и способность ADCC [172].

Вышеупомянутые варианты Fc были обнаружены в исследованиях, направленных на усиление связывания с FcRn при эндосомном pH без изменения или минимизации изменений связывания при внеклеточном pH, однако варианты также могут быть разработаны для модуляции связывания при внеклеточном pH. Одним из оснований для идентификации вариантов антител с дифференциальным связыванием с FcRn при внеклеточном pH является создание так называемых «вытесняющих антител» для удаления растворимых мишеней. Нежелательные последствия нацеливания на растворимые антигены с использованием антител заключаются в том, что это может парадоксальным образом привести к более чем 1000-кратному увеличению антигена [182,183].Это происходит из-за того, что период полужизни IgG намного больше, чем период полужизни связанного антигена, что способствует накоплению комплексов антитело-антиген и, таким образом, увеличению присутствия антигена в плазме из-за снижения клиренса [170]. Чтобы противодействовать этому, разработаны антитела для усиления связывания с FcRn как при эндосомном, так и при внеклеточном pH. Увеличение связывания с FcRn при pH 7,4 останавливает высвобождение антитела в плазму, позволяя ему оставаться в комплексе с растворимым антигеном [170].Вместо этого антитела прочно связаны с эндосомальной мембраной и связываются с лигандами на поверхности клетки [170]. Поскольку эти антитела все еще остаются связанными с клеточной поверхностью, комплекс антитело: антиген может быстро интернализоваться в клетку. Сканирующие антитела часто конструируют так, чтобы они были способны диссоциировать от антигена после интернализации в эндосоме, таким образом, направляя антиген только для лизосомальной деградации [184]. Поскольку антитело удерживается на поверхности клетки из-за повышенного связывания с FcRn при внеклеточном pH и удерживается в эндосоме из-за сильного связывания с FcRn при эндосомном pH, вытесняющее антитело не высвобождается в плазму с образованием комплексов антитело-антиген или деградирует в лизосомах и вместо этого постоянно рециркулирует внутри клетки [184].Следовательно, эти антитела очень эффективны при удалении растворимых мишеней с увеличенным периодом полужизни. Что касается противораковых антител, эти широкие антитела могут быть ценными для нацеливания на иммуносупрессивные цитокины, такие как TGF-β [185]. Например, было показано, что антитела против этих цитокинов в сочетании с ингибиторами иммунных контрольных точек, такими как антитела против PD-1 / PD-L1, усиливают противоопухолевую активность [185]. Подвижные антитела могут более эффективно очищать эти растворимые мишени и, таким образом, обращать вспять иммунную супрессию.Хотя быстрые антитела еще не применялись для лечения рака, модификации Fc для получения этих реагентов описаны ниже и могут быть реализованы в будущем.

С помощью молекулярного моделирования остатки в Fc hIgG1 рядом с сайтом связывания FcRn были идентифицированы как кандидаты на мутацию, чтобы изменить связывание с FcRn. Было обнаружено, что полученные мутации M252Y / S254T / T256E + h533K / N434F (обозначаемые как YTE-KF, MST-HN или Abdeg) имеют 20-кратное увеличение связывания с FcRn как при эндосомном, так и при внеклеточном pH [165].

Другой пример мутаций, включенных в hIgG1, которые способны усиливать связывание с FcRn как при эндосомном, так и при внеклеточном pH, включают мутации M252Y / V308P / N343Y. Мутации M252Y / V308P / N343Y были обнаружены Igawa et al. и было обнаружено, что они усиливают связывание с FcRn при эндосомном pH в> 400 раз и внеклеточном pH в> 2500 раз по сравнению с WT hIgG1. In vivo антитела к hIgG1 против IL-6R с мутациями M252Y / V308P / N343Y снижали общий растворимый IL-6R человека в плазме в 1000 раз по сравнению с антителом к hIgG1 WT у трансгенных мышей hFcRn [170].

6.2. Противораковые антитела с увеличенным периодом полужизни, поступающие в клинику

Как описано выше, Fc-инженерия для улучшения периода полужизни наделяет mAb пролонгированной биодоступностью и потенциально терапевтическим эффектом, наряду с уменьшенными требованиями к частоте дозирования. В доклинических исследованиях цетуксимаб и бевацизумаб, разработанные с использованием технологии Xencor Xtend, имели значительно улучшенный период полувыведения по сравнению с немодифицированными mAb, которые переводились в более длительный контроль опухоли [168].На сегодняшний день FDA одобрило только одно антитело с увеличенным периодом полураспада. Равулизумаб — это модифицированная версия экулизумаба, нацеленная на C5, для использования при пароксизмальной ночной гемоглобинурии и атипичном гемолитико-уремическом синдроме [186]. Введенные аминокислотные замены (VH_Y27H, VH_S57H, M428L, N434S) привели к 4-кратному увеличению периода полувыведения, что позволило снизить дозировку с каждых 2 недель до каждых 8 недель при сохранении эффективности [187]. На сегодняшний день технология усиления Fc для противораковых реагентов была ограничена панелью блокады контрольных точек, нацеленной на биспецифические mAb, созданные Xencor с использованием технологии Xtend (Xmab23104: PD-1 x LAG3, XmAb22841: CTLA-4 x LAG3 и XmAb20717: PD-1 x CTLA-4), а целые молекулы IgG не прогрессировали.

Заявление о снятии с учета ЕНВД – бланк, сроки, порядок, заполнение 2020

Сроки снятия с учета ЕНВД

Порядок заполнения заявления о снятии с учета ЕНВД

Бланк заявления о снятии с учета ЕНВД

Тоже может быть полезно:

Информация полезна? Расскажите друзьям и коллегам

Комментарии

Добавить комментарий

Как встать на учет по ЕНВД и сняться с учета – «Моё дело»

Для кого доступен переход на ЕНВД

Как перевести деятельность на ЕНВД

Снятие с учета ЕНВД в 2019 году

сроки, причины, штрафы, порядок — Контур.Бухгалтерия

Скидка 45% в ноябре: 7 590 р. вместо

Порядок снятия с учета по единому налогу

Нужно ли сниматься с учета и писать заявление, если ЕНВД в 2021 году отменяют

Заполнение заявления ЕНВД-3 для организации

Причина снятия с учета

Особенности заявления ЕНВД-4 для индивидуальных предпринимателей

Заявление о снятие с учета ЕНВД ИП

Порядок снятия с учета ЕНВД

Образец заполнения ЕНВД-4

Скачать бланк заявления ЕНВД-4

О порядке уведомления о начале и прекращении применения специального налогового режима «Налог на профессиональный доход» | ФНС России

куда предприниматель обязан подавать 6-НДФЛ?

Файлы для скачивания

Переход с ЕНВД и ПСН при реализации маркированных товаров

1. Выбор другой системы налогообложения

Переход с ЕНВД на УСН

Переход с ЕНВД на ОСН

Переход с ПСН на УСН

2. Отправка документов в ФНС

3. Изменение настроек ККТ

Close IP по UNVD в год. Прекращение вида деятельности на ЕНВД. Как закрыть ИП на ЕНВД

Стандартная процедура закрытия ИП в 2019 году

Нюансы прекращения деятельности ИП, применяющих налоговый режим УНВД

Специфика закрытия ИП с долгами

Полезные мелочи, о которых нужно помнить плательщикам ENVD в 2019 году

Что делать в отчете

Где найти анкету-заявку с ENVD 2018-2019

Какие сроки должны быть соблюдены, чтобы подать заявление об исключении из UNVD

Как оформить заявление о снятии с учета ЕНВД для ООО

Как ИП должно оформить акт об снятии с учета ENVD

Подготовка к закрытию ИП

Закрыть ИП на «Венчейн»

Какая форма ENVD-4 и почему это важно

Закрытие ИП Пошаговая инструкция в 2017 году

Шаг 1. Сбор документов для закрытия ИП

Шаг 2. Оплата госпошлины

Шаг 3. Запросить справку из пенсионного фонда

Заявление об исключении из ENVD ИП в 2017 году

Пошаговая инструкция по закрытию IP на UNVD

Погашение всей задолженности

Увольнение работников

Уплата госпошлины

Оформление пакета документов

Нарушение пломбы

Подача документов

Получение сертификатов о закрытии ИП

Заключение

Инструкция по наполнению. За сколько дней со дня подачи документов о прекращении деятельности ИП налог снимут с учета предпринимателя

Даты снятия с учета УНВД

Порядок заполнения декларации о снятии с учета УНВД

Образец заполнения и пустой бланк формы ENVD-4

Использование формы

Особенности наполнения

Сроки и особенности подачи

Когда форма ЭНВД-4 не нужна

Образец заливки ЭНВД-4

Как снять обременение с дома, купленного на материнский капитал

(PDF) Описание механизмов активного транспорта свободных жирных кислот и антибиотиков у Synechocystis sp. PCC 6803

наиболее частых вопросов Заявление о расторжении ENVD SP

Снятие с учета ЕНВД: при подаче заявления

Снятие с учета ЕНВД: сроки подачи заявления

Стандартная процедура закрытия ИП в 2019 году

Нюансы прекращения деятельности ИП с применением налогового режима ЕНВД

Особенности закрытия ИП с долгами

Полезные мелочи, которые нужно помнить плательщикам ЕНВД в 2019 году

Если вы не подавали отчеты по ENVD. Законно ли требовать выплаты ENVD, если деятельность не осуществлялась

Что такое ЕНВД